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laebio K007说明书

 更新时间:2019-03-03 点击量:1007

 

laebio K007说明书

 

Sumoylation Control Kits 
Catalog # K007 supplied with proteins

 

描述:
该检测试剂盒含有用于常规检测SUMO化活性的试剂。包括Sumoylation标记(人拓扑异构酶I蛋白)以允许清楚地检测反应。已经证明该测定法适用于粗提物。强烈建议将人类EI,活性物质(Cat#P001; P006),人类E II,活性物质(Cat#P002; P011)和人类SUMO I,活性物质(Cat#P003; P012)与此试剂盒一起使用。

K007套件包含:

  • SAE I和SAE II(人类EI)(Cat#P006)
  • UBC9(人类E II)(Cat#P011)
  • SUMO I(活动形式)。(Cat#P012)
  • 人DNA拓扑异构酶I片段。(Cat#B007)
  • 抗拓扑异构酶I抗体。(Cat#AP006)(冻干的抗体应在使用前用100ul H 2 O 重构。)
  • 10X的SUMO化反应缓冲液。(Cat#B006)(10x缓冲液含有200mM Hepes pH 7.5,50mM MgCl 2和20mM ATP。)

上述试剂适用于50次SUMO化反应。

 

测定条件:
SUMO化测定在20微升的终体积中含有20mM的Hepes pH为7.5,5mM的氯化镁反应缓冲液中进行2,2mM的ATP。我们建议添加新鲜的2mM ATP以确保提供足够的能量。

拓扑异构酶I Sumoylation Control Protocol:

  1. 加入2ul 50kd拓扑异构酶I片段(Cat#B007)作为每个反应的底物。
  2. 在每个反应中,首先向底物中加入2ul E2,然后加入2ul Sumo-1,2ul 10x反应缓冲液(Cat#B006),2ul E1和2μl20mMATP。后,加入H 2 O使总体积达到20μl 
  3. LAE SUMO化蛋白的宜反应浓度如下:
    • EI:7.5ug / ml
    • E II:50ug / ml
    • SUMO-1:50ug / ml
          为对照测定的推荐条件是37 ø 30〜60分钟c。。
     
  4. 在10 ml(Cat#AP006)中使用1000倍稀释的提供的拓扑异构酶I抗体进行免疫印迹。应检测四个主要的sumoylated波段。

使用Topo-1抗体(cat#AP006)的SUMO化 50Kd Topo-1蛋白(cat#B007)的Western印迹(12.5%凝胶)。泳道1:sumoylated 50Kd Topo-I片段; 泳道2:未经过酰化的50Kd Topo-I片段。

Topo-1抗体( Cat#AP006)可检测至少四个主要的SUMO化Topo-1片段 。

 

Sumoylation Protocol:

  1. 准备合适的纯化底物蛋白。
  2. 在每个反应中,首先向底物中加入2μlE2,然后加入2μlSy,2μl10μl反应缓冲液,2μlE1和2μl20mMATP。后,加入H 2 O使终体积达到20μl。
  3. LAE蛋白的宜反应浓度如下:
    • EI:7.5ug / ml
    • E II:50ug / ml
    • SUMO-1:50ug / ml

 

运输/储存:
此套件随附干冰,应储存在-70 o C或更低温度。  

法律考虑:仅供研究使用。

 

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laebio K007说明书

 

Sumoylation Control Kits 
Catalog # K007 supplied with proteins

 

描述:
该检测试剂盒含有用于常规检测SUMO化活性的试剂。包括Sumoylation标记(人拓扑异构酶I蛋白)以允许清楚地检测反应。已经证明该测定法适用于粗提物。强烈建议将人类EI,活性物质(Cat#P001; P006),人类E II,活性物质(Cat#P002; P011)和人类SUMO I,活性物质(Cat#P003; P012)与此试剂盒一起使用。

K007套件包含:

  • SAE I和SAE II(人类EI)(Cat#P006)
  • UBC9(人类E II)(Cat#P011)
  • SUMO I(活动形式)。(Cat#P012)
  • 人DNA拓扑异构酶I片段。(Cat#B007)
  • 抗拓扑异构酶I抗体。(Cat#AP006)(冻干的抗体应在使用前用100ul H 2 O 重构。)
  • 10X的SUMO化反应缓冲液。(Cat#B006)(10x缓冲液含有200mM Hepes pH 7.5,50mM MgCl 2和20mM ATP。)

上述试剂适用于50次SUMO化反应。

 

测定条件:
SUMO化测定在20微升的终体积中含有20mM的Hepes pH为7.5,5mM的氯化镁反应缓冲液中进行2,2mM的ATP。我们建议添加新鲜的2mM ATP以确保提供足够的能量。

拓扑异构酶I Sumoylation Control Protocol:

  1. 加入2ul 50kd拓扑异构酶I片段(Cat#B007)作为每个反应的底物。
  2. 在每个反应中,首先向底物中加入2ul E2,然后加入2ul Sumo-1,2ul 10x反应缓冲液(Cat#B006),2ul E1和2μl20mMATP。后,加入H 2 O使总体积达到20μl 
  3. LAE SUMO化蛋白的宜反应浓度如下:
    • EI:7.5ug / ml
    • E II:50ug / ml
    • SUMO-1:50ug / ml
          为对照测定的推荐条件是37 ø 30〜60分钟c。。
     
  4. 在10 ml(Cat#AP006)中使用1000倍稀释的提供的拓扑异构酶I抗体进行免疫印迹。应检测四个主要的sumoylated波段。

使用Topo-1抗体(cat#AP006)的SUMO化 50Kd Topo-1蛋白(cat#B007)的Western印迹(12.5%凝胶)。泳道1:sumoylated 50Kd Topo-I片段; 泳道2:未经过酰化的50Kd Topo-I片段。

Topo-1抗体( Cat#AP006)可检测至少四个主要的SUMO化Topo-1片段 。

 

Sumoylation Protocol:

  1. 准备合适的纯化底物蛋白。
  2. 在每个反应中,首先向底物中加入2μlE2,然后加入2μlSy,2μl10μl反应缓冲液,2μlE1和2μl20mMATP。后,加入H 2 O使终体积达到20μl。
  3. LAE蛋白的宜反应浓度如下:
    • EI:7.5ug / ml
    • E II:50ug / ml
    • SUMO-1:50ug / ml

 

运输/储存:
此套件随附干冰,应储存在-70 o C或更低温度。  

法律考虑:仅供研究使用。