genebridges K006说明书

genebridges K006说明书

Quick & Easy E. coli Gene Deletion Kit

gene bridges快速简便的大肠杆菌基因删除试剂盒

细节：

特征

• Red / ET的忠实重组

• 快速

• 可能有多个淘汰赛

• 方便地去除重组质粒

应用

该试剂盒旨在在不到一周的时间内敲除或改变大肠杆菌染色体上的基因。

描述

红色/ ET重组使碱基对可以，特异性和忠实的方式交换遗传信息。试剂盒随附有FRT侧翼的卡那霉素抗性标记盒，可用于替换大肠杆菌染色体上的基因。Red / ET重组可替代大肠杆菌染色体上长达30kb的片段。如果需要，使用FRT侧翼抗性盒替代目标基因可以随后通过FLP重组酶步骤去除选择标记。FLP表达质粒可以从Gene Bridges购买。重复插入试剂盒随附的功能盒或与Gene Bridges提供的其他功能盒组合可产生多个基因敲除。重组过程由于pRed / ET表达质粒的优化设计而受到严格控制。重组蛋白的基因在诱导型启动子的控制下，质粒带有温度敏感的复制起点，可在重组后方便地除去质粒。

内容

• 两个Red / ET重组蛋白表达质粒pRed / ET（tet）和pRed / ET（amp）。通过用这些质粒转化，可将任何大肠杆菌菌株制成Red / ET精通的

• FRT位于卡那霉素抗性模板的侧面（FRT-PGK-gb2-neo-FRT），可用于您自己的实验。

• 阳性对照，用于替换大肠杆菌染色体上的甘露糖转运蛋白（man X）基因。

• 详细的协议，质粒，图谱和序列的描述

序列

FRT-PGK-GB2-NEO-FRT

FRT  启动子neo ^R 终止子   

AATTAACCCTCACTAAAGGGCGGCCGC GAAGTTCCTATTCTCTAGAAAGTATAGG AACTTC ATTCTACCGGGTAGGGGAGGCGCTTTTCCCAAGGCAGTCTGGAGCATGC GCTTTAGCAGCCCCGCTGGGCACTTGGCGCTACACAAGTGGCCTCTGGCCTCGCA CACATTCCACATCCACCGGTAGGCGCCAACCGGCTCCGTTCTTTGGTGGCCCCTT CGCGCCACCTTCCACTCCTCCCCTAGTCAGGAAGTTCCCCCCCGCCCCGCAGCTC GCGTCGTGCAGGACGTGACAAATGGAAGTAGCACGTCTCACTAGTCTCGTGCAGA TGGACAGCACCGCTGAGCAATGGAAGCGGGTAGGCCTTTGGGGCAGCGGCCAATA GCAGCTTTGCTCCTTCGCTTTCTGGGCTCAGAGGCTGGGAAGGGGTGGGTCCGGG GGCGGGCTCAGGGGCGGGCTCAGGGGCGGGGCGGGCGCCCGAAGGTCCTCCGGAG GCCCGGCATTCTGCACGCTTCAAAAGCGCACGTCTGCCGCGCTGTTCTCCTCTTC CTCATCTCCGGGCCTTTCGACCTGCAGCAGCACGTGTTGACAATTAATCATCGGC ATAGTATATCGGCATAGTATAATACGACAAGGTGAGGAACTAAACCATGGGATCG GCCATTGAACAAGATGGATTGCACGCAGGTTCTCCGGCCGCTTGGGTGGAGAGGC TATTCGGCTATGACTGGGCACAACAGACGATCGGCTGCTCTGATGCCGCCGTGTT CCGGCTGTCAGCGCAGGGGCGCCCGGTTCTTTTTGTCAAGACCGACCTGTCCGGT GCCCTGAATGAACTGCAGGACGAGGCAGCGCGGCTATCGTGGCTGGCCACGACGG GCGTTCCTTGCGCAGCTGTGCTCGACGTTGTCACTGAAGCGGGAAGGGACTGGCT GCTATTGGGCGAAGTGCCGGGGCAGGATCTCCTGTCATCTCACCTTGCTCCTGCC GAGAAAGTATCCATCATGGCTGATGCAATGCGGCGGCTGCATACGCTTGATCCGG CTACCTGCCCATTCGACCACCAAGCGAAACATCGCATCGAGCGAGCACGTACTCG GATGGAAGCCGGTCTTGTCGATCAGGATGATCTGGACGAAGAGCATCAGGGGCTC GCGCCAGCCGAACTGTTCGCCAGGCTCAAGGCGCGCATGCCCGACGGCGAGGATC TCGTCGTGACCCATGGCGATGCCTGCTTGCCGAATATCATGGTGGAAAATGGCCG CTTTTCTGGATTCATCGACTGTGGCCGGCTGGGTGTGGCGGACCGCTATCAGGAC ATAGCGTTGGCTACCCGTGATATTGCTGAAGAGCTTGGCGGCGAATGGGCTGACC GCTTCCTCGTGCTTTACGGTATCGCCGCTCCCGATTCGCAGCGCATCGCCTTCTA TCGCCTTCTTGACGAGTTCTTCTGAGCGGGACTCTGGGGTTCGAATAAAGACCGA CCAAGCGACGTCTGAGAGCTCCCTGGCGAATTCGGTACCAATAAAAGAGCTTTAT TTTCATGATCTGTGTGTTTGTTTTTGTGTGCGGCGCG GAAGTTCCTATTCTCTAG AAAGTATAGGAACTTCCTCGAGCCCTATAGTGAGTCGTATTA