欢迎进入上海起发实验试剂有限公司!
技术文章
首页 > 技术文章 > Kerafast EC1001说明书

Kerafast EC1001说明书

 更新时间:2019-09-30 点击量:1031

Kerafast是一家总部位于波士顿的试剂公司,其主要任务是使科学界可以轻松访问*的实验室制造的研究工具。我们的产品组合包括细胞系,抗体,小分子,染料等,其中许多是其他地方所没有的。自2011年成立以来,来自190多个机构的研究人员已通过我们的在线平台提供了创新试剂,该平台可快速访问材料,而无需经过传统的“材料转让协议”流程。

我们为提供实验室处理所有的销售和运输物流,并从每次销售中返还丰厚的特许权使用费。因此,我们有助于为实验室节省时间和资源,同时为进一步的研究产生额外的资金。采购科学家可以更轻松地发现和获取通常在其他地方无法获得的*试剂,同时还可以资助其他研究人员的工作。这创建了一个由科学家组成的社区,这些科学家为更大的利益贡献和获取试剂,以促进他们自己的研究以及整体科学进步。

2018年,Kerafast与英国公司Absolute Antibody合并,其愿景是向所有研究人员提供重组抗体技术。合并使两家公司共同致力于改善科学界可用的研究工具的选择。

 

Kerafast EC1001说明书

LOBSTR E. coli Expression Strain

LOBSTR大肠杆菌表达菌株

LOBSTR(低背景菌株)是一种用于表达重组多组氨酸标签蛋白的大肠杆菌菌株。该菌株已针对一步下游多组氨酸标签亲和纯化进行了优化,是表达能力差的蛋白质的理想选择。

强调:

  • 通过减少大肠杆菌 ArnA和SlyD 的污染,获得更高纯度的重组多组氨酸标签蛋白
  • 一步纯化即可消除主要的大肠杆菌污染物
  • 基于BL21(DE3)-与其他市售感受态细胞相同
  • 纯化具有挑战性的低表达蛋白靶标的理想选择
  • 也可用:BL21(DE3)-RIL版本-包含argUileYleuW tRNA基因的额外副本,以及氯霉素标记

大肠杆菌中表达的蛋白质的多组氨酸标签亲和纯化的主要缺点是天然富含组氨酸的蛋白质的存在,导致这些污染物的共纯化。在LOBSTR,ArnA和SlyD中,两种常见的大肠杆菌污染物已根据表面工程进行了修改。LOBSTR维持正常的细胞生长,但显着降低了ArnA和SlyD的多组氨酸标签结合亲和力。与其他表达菌株相比,LOBSTR可产生更高纯度的重组蛋白,可一步纯化低表达的重组蛋白。

来自麻省理工学院Thomas U. Schwartz博士的实验室。

CATALOG NUMBERPRODUCTSIZEPRICE

EC1001

LOBSTR-BL21(DE3), 4x50uL

4x50uL

$269.00

EC1002

LOBSTR-BL21(DE3)-RIL, 4x50uL

4x50uL

$269.00

产品规格

产品类别:
名称:LOBSTR 大肠杆菌表达菌株
单元格类型:具有化学活性(CaCl2方法)
生物:大肠杆菌 BL21(DE3)
能力:> 1x106cfu / ug DNA
生长条件:标准大肠杆菌生长培养基(LB,SOC等)在37℃
转型:标准热震协议(42摄氏度,持续20秒)
感应:IPTG高达1mM
评论:源自大肠杆菌 BL21(DE3)
存储:-80C(避免冻融循环)
发货:干冰

数据

LOBSTR和亲本BL21(DE3)菌株显示可比的增长

从0小时的初始同步直到终收获,测量了LOBSTR和亲本BL21(DE3)菌株的生长(OD600)。两种菌株均携带相同的表达质粒,并在37°C下生长直至OD600〜0.7,此时在18、25和37C下诱导蛋白质表达(黑色箭头)。LOBSTR和BL21(DE3)的生长曲线分别以红色和黑色显示。两种菌株在对数期和终细胞密度期间的细胞生长相似。取决于表达质粒,观察到不同的生长行为,但通常在LOBSTR和BL21(DE3)之间未观察到生长差异。

从LOBSTR的His-tag纯化中去除了ArnA和SlyD

显示了使用普通金属亲和力树脂从BL21(DE3)和LOBSTR纯化得到的测试样品。(A)使用Ni Sepharose 6FF树脂(GE Healthcare)从亲本BL21(DE3)菌株和LOBSTR中纯化出七个蛋白质构建体。该构建体编号为1-7,并含有6×His标签(1和4)或10×His标签(2、3、5→7)。洗脱样品在SDS-PAGE凝胶上电泳,并用考马斯蓝R250染色。ArnA和SlyD用箭头表示,靶蛋白用黑圈(△)表示。双星号(**)表示Hsp15,这是另一种蛋白质,在LOBSTR中显示出降低的Ni结合亲和力。(B)还在两种另外的常用树脂Ni-NTA(Qiagen)和Talon(Clontech)上从BL21(DE3)和LOBSTR纯化构建体1和5。在每种情况下,

改编自: Andersen KR等。蛋白质。2013年11月; 81(11):1857-61。