ArcticZymes将利用其在北极海洋中的生物勘探活动,成为分子研究和诊断新型冷适应酶商业化的。
ArcticZymes 71800-100说明书
数量 | 产品信息 | 货号 | 价钱 |
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T4 DNA连接酶包装大小:250 kU数量 | 包装尺寸:250 kU浓度:5000 U / µl | #71800-202 | 25 欧元 |
不适用 | 包装尺寸:根据协议浓度:根据协议 | #71800-100 | 询价 |
T4 DNA连接酶是一种依赖ATP和Mg 2+的 dsDNA连接酶,可催化双链DNA,双链RNA和某些DNA / RNA杂交中3'-羟基和5'-磷酸末端之间的磷酸二酯键的形成。T4 DNA连接酶在平末端和内聚末端底物上均具有活性。
T4 DNA连接酶是一种依赖ATP和Mg 2+的 dsDNA连接酶,可催化双链DNA,双链RNA和某些DNA / RNA杂交中3'-羟基和5'-磷酸末端之间的磷酸二酯键的形成。T4 DNA连接酶在平末端和内聚末端底物上均具有活性。
这是T4 DNA连接酶的高质量(商业级)版本。T4 DNA连接酶在大肠杆菌中重组产生。ArcticZymes的T4 DNA连接酶经过了广泛的测试,能够污染DNase和RNase活性以及残留的宿主细胞gDNA。
T4 DNA Ligas中的大肠杆菌 gDNA 污染 |
图1:T4 DNA Ligases通常含有大肠杆菌 gDNA。分析了ArcticZymes的T4 DNA连接酶和四种市售的T4 DNA连接酶(5000个单位)是否污染了大肠杆菌 gDNA。在两个商业连接酶中检测到了大肠杆菌 gDNA。使用基于探针的qPCR分析,一式三份进行分析。 |
单位定义: 一个单位的定义是在总反应体积为5%的情况下,对λDNA的2322和2927 bp HindIII片段进行75%连接(5´DNA末端浓度为0.12 µM,300 µg / ml)所需的酶量。在16°C下30分钟内于50 mM Tris-HCl(pH 7.5),10 mM MgCl 2、1 mM ATP和10 mM DTT中20μl。
一个Weiss单位约等于500 ArcticZymes单位。
灭活:通过在70°C下孵育10分钟,可以*灭活T4 DNA连接酶。
该酶在提供的存储缓冲液中在-20°C稳定1年以上。
该酶可耐受至少四个冻融循环(-80°C)而不会丧失活性。
ArcticZymes致力于提高产品质量。T4 DNA连接酶是在挪威的ISO 13485认证工厂生产的。
将10,000 U T4 DNA连接酶与超螺旋质粒(1 µg)在37°C下孵育4小时。琼脂糖凝胶电泳未显示出封闭的环状DNA向有切口的DNA的任何转化。
将10,000 U T4 DNA连接酶与M13 ssDNA(0.5 µg)在37°C下孵育4小时。琼脂糖凝胶电泳未显示任何可见的ssDNA降解迹象。
将10,000 U T4 DNA连接酶与3 H-dATP标记的ds或ssDNA(0.5 µg,500 bp)在37°C 下孵育4小时。对于任何一种底物,标记DNA的酸溶放射性均未超过空白测试。
将5000 U T4 DNA连接酶与2 kb RNA转录物(0.5 µg)在37°C下孵育4小时。琼脂糖凝胶电泳未发现任何可见的RNA降解迹象。
在基于探针的qPCR分析中分析了5000 U T4 DNA连接酶,检测了大肠杆菌中的23S核糖体亚基。无大肠杆菌的gDNA可以检测(LOD:<3 大肠杆菌基因组拷贝)。