adarbiotech环氧活化珠说明书

成立于2006年3月的Adar Biotech是下一代医疗技术的开发商。该公司开发了用于增强药物输送的微型医疗设备，并开发了另一种具有国土安全/生物应用的医疗设备。该公司还向研究团体提供产品和服务。Adar Biotech生产功能性树脂和重组蛋白，并为客户提供免疫学和细胞培养服务。

adarbiotech环氧活化珠说明书

环氧活化珠

Epoxy-Activated Beads

Adar的环氧活化微珠是一种通用产品，可将胺和含羟基的配体与微珠上存在的游离环氧基结合。就配体结合而言，所得的连接既稳定又起作用。

Epoxy-Activated Beads Cat. 1004-5/10/25

多用途激活支持版本。1.2 2007年3月

介绍

环氧活化珠是一种含有高密度环氧基的预活化载体，用于固定各种配体。通过与氨基、硫醇和羟基的稳定连接，该载体可用于固定蛋白质、碳水化合物和各种配体。当ph值为11-13时，与羟基的偶联反应为有利，而含巯基的配体在ph值为7.5-9.0时，偶联反应为有利。

环氧树脂活化珠特性

基质：sepharose cl-4b

活性组：Oxiran。

活性组密度：10–25μmole/ml

珠径：45-165微米

珠状结构：高度交联的球形琼脂糖，6%

大背压：0.3Mpa，3bar

大流速：4ml/min/cm~2

建议流速：1-2ml/min/cm~2

基质稳定性：ph 2-11。

方案：将配体固定在环氧树脂活化的珠上

A.所需缓冲器

通常在碳酸盐、硼酸盐或磷酸盐缓冲液中进行耦合。钠

氢氧化物可用于提高缓冲剂。避免使用含有三胺或游离胺的缓冲剂。

结合过程中的缓冲液和其他亲核试剂，因为这些基团可能与

环氧基。如果需要有机溶剂溶解配体，

二甲基甲酰胺和二氧六环的用量可达终体积的50%。这个

相同浓度的有机溶剂应包含在

以避免配体在偶联过程中沉淀。

配体与10毫升环氧活化珠结合所需的缓冲液。

一。双蒸馏水（100毫升）。

2.耦合缓冲液（50ml）：碳酸氢钠或碳酸盐缓冲液ph-8-10。也可使用中性共轭缓冲液，但宜使用碱性偶联缓冲液：使用DDH2O或磷酸盐缓冲液，如PBS。

三。封闭液（100毫升）：1米乙醇胺，pH值8.0。

四。洗涤缓冲液（200毫升）：PBS pH 7.4。

B.协议

一。轻轻混合珠子，形成均匀的混合物，并用吸管移走所需数量的珠子。用双蒸馏水清洗珠子3次。洗涤可以使用合适的滤漏斗或通过每分钟1分钟的离心循环进行，在大约600～1000 xg下进行。不要超过1000xg，因为珠子可能会变形。

2.在耦合缓冲液中溶解配体。可使用有机溶剂。对于大配体（即分子量大于10000的蛋白质），制备2-10 mg/ml的溶液；对于小配体，例如小肽，制备每ml耦合缓冲液中至少200μmoles配体的溶液。

三。将两体积的配体溶液加入到一体积的洗涤环氧树脂中

在聚丙烯管和轻轻混合珠。样品100ul上清液

（不含珠子）在时间零点作为参考样品并保存在冰箱中。

四。在4oC至45℃之间缓慢混合（配体的稳定性限制顶线温度），优选使用摇臂。不要用磁力搅拌器搅拌

5。样品100ul上清液（不含珠子）的接合效率

利用耦合缓冲液去除未结合的生物分子，测定并清洗多余的配体。

6.加入大约两个凝胶体积的封闭溶液。放置至少4小时或在4℃下过夜。

7号。在室温下用20体积的清洗缓冲液清洗凝胶三次，以去除未粘合的乙醇胺。

C.储存

将凝胶冷藏在磷酸盐缓冲盐（PBS）或添加0.1%叠氮化物（W/V）作为防腐剂的其他配体兼容缓冲液中，直至使用。