swant 6B3说明书

产品名称：   钙网膜蛋白小鼠单抗

     英文名称 ： Mouse anti-calretinin (monoclonal)

货号 ： 6B3

批号： 010399

外观： 冻干粉

      溶解：每管用200 µl双蒸水

规格：200UL

产品描述

6B3钙网膜蛋白抗体是用重组人calretinin-22k[1]免疫小鼠制备的单克隆抗体。calretinin 22k是calretinin基因的另一个剪接产物，与calretinin在Arg178之前*相同。融合后，以重组人视网膜蛋白为靶点筛选杂交瘤细胞，筛选出克隆6B3。6B3抗体识别前4个EF-手性结构域内的一个表位，该结构域与calretinin及calretinin-22k[1]识别位点相同。该蛋白与钙结合蛋白D-28k和钙调素[2]都属于EF-手性家族的钙结合蛋白。6B3抗体与人和大鼠组织中的钙网膜发生特异性反应，与钙结合蛋白D-28k或其他已知的钙结合蛋白不产生交叉反应。此特异性取决于改抗原在脑组织中的分布位置。

6B3抗体也可识别人间皮瘤[3，4]中的钙网膜蛋白。

抗体特异性及效价：

1、生物素-亲和素标记免疫组化检测4%多聚甲醛（或10%福尔马林缓冲液）固定的脑组织冷冻/石蜡切片；

2、免疫酶标记/免疫印迹验证；

3、免疫组织化学方法对Calretinin敲除小鼠的组织进行鉴定。

反应种属：

                  WB：小鼠、大鼠、豚鼠、兔子、斑马鱼、食蟹猴、和鸡。

 IHC：人，大鼠，小鼠

 经测试 应用：

 WB，IHC-P/Fc,，ELISA

 WB： 免疫印迹； IHC ：免疫组织化学； ELISA：酶联免疫。

 稀释比例：

 免疫组化（IHC-P/Fr）： 1：2'000 - 1：5'000. 4%多聚甲醛/福尔马林固定组织的冰冻或石蜡切片。

 免疫印迹（WB）： 1：1'000  - 1：2'000。

抗体稀释比例是基于生物素标记法的免疫组化及免疫印迹检测方法，其宜的抗体浓度需根据客户具体实验，经过预实验摸索确定。

储存：

解冻后分装（如每管1ul或5ul等）保存于- 80°C冰箱。短期保存-20°C。近期频繁使用保存于 4°C (增加0.01% 叠氮钠)。避免反复冻融。建议分装小份储存。

免疫印迹WB检测（ 脑组织抽提液）

钙网膜蛋白6B3抗体在脑组织抽提液中的特异表达：(图 1)

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Calretinin基因敲除小鼠的免疫组织化学染色

钙网膜蛋白6B3高表达于正常小鼠脑组织（图2a），calretinin基因敲除小鼠脑组织相同区域未见阳性表达（图2b）。

参考文献

1. Zimmermann, L. and Schwaller B (2002) Monoclonal antibodies recognizes epitopes of calretinin. Cell Calcium 31: 13-25.
2. Rogers J.H. (1987) Calretinin: a gene for a novel calcium-binding protein expressed principally in neurons. J. Cell Biol. 105:1343-1353.
3. Gotzos V., Vogt P. and M.R. Celio (1995) Calretinin is a selective marker for malignant pleural mesotheliomas of the epithelial type. Pathol. Res. Pract. 192:137-147.
4. Doglioni, C. et al. (1996) Calretinin: a novel immunocytochemical marker for mesothelioma. Am. J. Surg. Pathol. 20:1037-1046.
5. Schiffmann S.N. et al (1999) Impaired motor coordination and Purkinje cell excitability in mice lacking calretinin. PNAS, 96: 5257-5262.