NFK GreenScreen™ Assays

NFK GreenScreen™检测

色氨酸代谢在免疫调节和神经退行性疾病中起重要作用。色氨酸代谢酶是癌症免疫疗法和神经退行性疾病的重要药物靶标。为了高通量筛选色氨酸代谢酶，我们开发了NFK GreenScreen™检测方法来筛选吲哚胺2,3-二加氧酶（IDO1）和色氨酸双加氧酶（TDO）。

NFK Green™测定法可在温和条件下工作，适用于高通量筛选。NFK GreenScreen™试剂盒包含所有进行测定的成分，包括参考抑制剂。下面显示了用NFK GreenScreen™测量的IDO1和TDO参考抑制剂的剂量反应曲线。

该套件有五种格式：
1. hIDO GreenScreen™；包括纯化的人吲哚胺2，3-二加氧酶（IDO1）
2。包括纯化的人色氨酸双加氧酶（TDO）
3。
mTDO GreenScreen™; 包括纯化的小鼠吲哚胺2,3-二加氧酶（IDO1）4。包括纯化的小鼠色氨酸双加氧酶（TDO）
5。NFKGreen™用于基于细胞的筛选；用于基于细胞的测定 不含酶

与当前用于IDO和TDO测试的检测标准相比，NFK GreenScreen™检测条件温和（环境温度和中性pH），避免了加热和添加酸性，碱性或剧毒试剂的情况。荧光测定法基于NTRC开发的名为NFK Green™的高度特异性和*标记。该协议可以快速实施测定以进行高通量筛选或常规化合物测试。

通过分别筛选IDO1和TDO的384孔或1536孔格式的约90.000种化合物，证明了其高通量筛选的适用性。筛选所有化合物的浓度为10 µM。

根据您的需求，我们可以提供1,000或10,000个数据点的套件。对于高通量的屏幕（> 100.000数据点），我们可以为您提供针对屏幕定制的蛋白质，试剂和缓冲液。

我们已经证明，该试剂可用于IDO1和TDO的生化测定中检测NFK。此外，该测定法可用于测量细胞代谢色氨酸的能力，从而确定IDO1和TDO抑制剂的细胞效力。

IDO1和TDO的生化测定已开发为“仅加法”。首先，将化合物和酶结合。接下来，通过添加L-色氨酸开始反应。10或30分钟后，通过添加NFK Green终止反应，并通过在37°C下孵育4小时进行反应。

NFK Green™与NFK反应形成绿色荧光分子，激发波长为400 nm，发射波长为510 nm，其中库化合物的荧光干扰小。该测定法可以在所有常用的荧光或多模式阅读器上读取，并且适用于生化以及基于细胞的测定法来测量色氨酸代谢酶。

有关更多信息和报价请求，请发送电子邮件至services@ntrc.nl。