欢迎进入上海起发实验试剂有限公司!
技术文章
首页 > 技术文章 > bellbrooklabs Transcreener®ADP²激酶测定

bellbrooklabs Transcreener®ADP²激酶测定

 更新时间:2020-05-06 点击量:652

 

bellbrooklabs Transcreener®ADP²激酶测定
可直接检测ADP 的仅有激酶检测方法

转座子激酶测定原理

Transcreener分析是一种混合阅读形式的竞争性免疫分析。示踪剂与ADP抗体的置换引起其荧光特性的变化。Transcreener是测量激酶反应过程中形成的ADP的简单,直接的方法。自2006年推出款产品以来,Transcreener已在数百万口井中用于高温超导和发现铅。

生化激酶测定试剂盒提供远红外FP,FI和TR-FRET检测模式,以确保您的酶标仪具有良好性能。

 

 

ADP FP激酶测定

主力军。用于许多大屏幕。良好的甲板和信号稳定性。

 

ADP FI激酶测定

正FI信号。与简单的荧光酶标仪兼容。读取时间比FP或TR-FRET更快。

 

ADP TR-FRET ATPase检测

对于喜欢TR-FRET检测的客户。使用相同的过滤器设置为HTRF ®

 

Transcreener是通用的–几乎可与任何激酶一起使用

通过使用一套检测不变产物ADP的试剂,克服了对酶家族中单个成员进行耗时的一次性开发的需求。该测定法实际上可用于任何底物,包括肽底物,蛋白质底物和脂质底物。

酶标靶的例子包括:

  • 蛋白激酶
  • 脂质激酶
  • 碳水化合物激酶
  • ATP酶
  • 伴侣蛋白(Hsp90等)
  • 核酸酶
  • 羧化酶
  • 解旋酶

应用领域

  • 筛选小分子抑制剂
  • 确定酶活性
  • 轮廓抑制剂效能/测定IC 50  值
  • 测量铅分子与靶的停留时间/解离速率/解离
  • 抑制剂选择性分析
  • 行动机制研究

特征

  • 简单的均匀生化分析
  • 直接检测ADP消除了费力的耦合步骤
  • 非放射性,安全的测定方法
  • 支持HTS –以96孔,384孔或1536孔格式使用
  • 从荧光偏振(FP),荧光强度(FI)或时间分辨的福斯特共振能量转移(TR-FRET)格式中选择
  • 灵敏,稳定的ADP检测。这意味着多达可减少10倍的酶,大幅降低大屏幕的成本。
  • 与ATP浓度从0.1到1000 µM一起使用
  • 远红外示踪剂进一步降低了荧光化合物和光散射的干扰

直接ADP检测可大程度地减少干扰

 

 

Bellbrook Labs对Select Science的评论

评论贝尔布鲁克精选科学实验室

 

Transcreener ADP 2  激酶检测试剂盒依赖于使用专有抗体直接检测ADP的能力,该抗体以与ADP的特异性和亲和力结合,与ATP的交叉反应性可以忽略。这种出色的选择性允许在过量ATP的存在下直接检测ADP,这是在初始速度条件下(例如,ATP消耗≤10%)进行激酶活性测定的要求。ADP抗体的高亲和力意味着该测定具有灵敏的检测能力,可有效检测  Z'值为0.7或更高的低至10 nM的ADP,因此您可以使用更少的珍贵酶。

其他ADP检测方法 依赖于复杂的测定方案,该方案使用三个或多个酶促步骤将ADP转换为可检测的信号。检测级联中的每种酶都是被筛选化合物的潜在靶标,这会增加假阳性或缺失命中的风险,并需要额外的孔来进行反筛选。

混合读取格式可以在端点或连续模式下使用

Transcreener ADP 2含量 测定均使用均质,混合和读取的含量测定格式,从而简化了自动化过程,并为测定方案提供了大的灵活性。端点测定法通常用于HTS,连续测定法 用于测定法开发或确定激酶抑制剂的停留时间。

用生化分析方法测量药物靶标停留时间的指南

在药物开发计划期间,对药物靶标停留时间的分析可以提高功效,增加治疗范围并降低过早集中于可能具有不良副作用的候选化合物的风险。本指南提供了有关使用Transcreener生化测定法测量药物靶标停留时间的概念和技术的技术背景,以及示例和案例研究。

了解更多信息,包括:

  • 停留时间的基础及其对药物发现的重要性
  • 停留时间确定方法的比较
  • 使用跳跃稀释法和Transcreener生化分析
  • 数据分析用于准确确定停留时间
  • 测量激酶,磷酸二酯酶和糖基转移酶的停留时间的示例

 

坚如磐石的试剂和信号稳定性可确​​保高质量的数据并简化自动化

Transcreener ADP 2抗体和示踪剂在室温下稳定至少8小时。这样可确保在分配试剂之前将试剂在室温下存储或不立即读取板的情况下不会影响数据质量。出色的试剂和信号稳定性使Transcreener ADP 2激酶测定非常可靠,易于在自动化HTS环境中使用。

 

除了为您提供三种检测模式的灵活性外,我们还与主要的多模式阅读器供应商(包括Tecan,BMG和Biotek)合作 为每种Transcreener ADP 分析确定宜的仪器硬件和软件设置成功的验证需要在初始速度条件(≤10%ATP转化率)下用于ADP检测的Z'大于0.7。每种Transcreener分析的技术手册中都总结了宜的过滤器设置和仪器设置,并且在应用笔记中提供了更详细的信息。这样可以确保无论您喜欢哪种荧光检测模式或阅读器,使用Transcreener试剂都能获得可靠的结果。

TranscreenerADP²激酶检测试剂盒

*对于定制或批量订单(超过100,000口井),请联系我们(info@bellbrooklabs.com)以获得报价。