hti荧光底物

基于ANSN的植物基
的一般结构举例说明了基于6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）的荧光基的一般结构。在本发明化合物家族中，R 1是三肽，其COOH-末端残基通常是精氨酸。R 2和R 3可以是氢，烷基，芳基或环烷基。虚线表示各种丝氨酸蛋白酶的水解位点。

包含荧光报告基团6-氨基-1-萘-磺酰胺（ANSN）的底物是用于监测各种丝氨酸蛋白酶（1-12）的酶活性的有用化合物。在这类化合物中，ANSN报告基团（在R1位置）连接至短三肽序列。设计肽序列以优化酶和底物之间的相互作用。可以添加到R2和R3位置的其他组分反映了P'亚位位置的变化，并且通常影响底物的动力学参数。有效底物的化合物在三肽和ANSN基团之间水解。一旦从肽部分上切下，ANSN基团的相对荧光显示出约1000倍的增加。

下一页确定的动力学特性将有助于选择合适的底物。事实证明，ANSN底物对因子VIIa（1-5,7,9,10,12）的分析特别有用。尽管仅因子VIIa的底物水解速率相对较慢，但将组织因子掺入测定系统后，几种化合物（例如化合物SN-17a）的kcat表现出较大变化。

使用信息：
基于ANSN的底物在DMSO中以10mM的储备溶液形式提供，通常可用于分析400 nM至50pM浓度范围内的酶。ANSN底物通常以50至100 µM的终浓度使用，并可以在大多数生理缓冲液（即TBS，HBS，PBS等）中稀释至该终浓度。反应（荧光的相对变化）可以使用标准荧光计或荧光酶标仪进行监测。动力学或终点模式可与仪器一起在以下波长下使用（激发= 352nm，发射= 470nm）。通过在发射光束中使用390至450 nm长通截止滤光片，可以大程度地减少光伪影。

下表列出了每种底物的动力学性质，表格下方包括了一些期刊参考文献以供使用。

DMSO中的底物储备溶液应在4°C或更低的温度下冷冻保存，并避光。在这些条件下，这些化合物将保持稳定超过一年。

**下表的关键字：K _m = µM；k _cat = s ^-1 ; k _cat / K _m = M ^-1 s ^-1 x 10 ^-5 ; ND =未确定

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  结构体	D-AFK-ANSNH-iC 4 H 9 .2HBr
  对...有用	对纤溶酶有用

  公式	二甲基亚砜
  浓度	10毫米

  动力学性质	a	VIIa	VIIa / TF	a	夏	电脑	吨PA	纤溶酶
  ķ 中号	ND	ND	ND	ND	ND	ND	ND	130
  K 猫	ND	ND	ND	ND	ND	ND	ND	3.7
  钾猫 / K M	ND	ND	ND	ND	ND	ND	ND	0.28

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   安全数据表

  结构体	Mes-D-LGR-ANSN（C 2 H 5）2
  对...有用	对因子Xa有用

  公式	二甲基亚砜
  浓度	10毫米

  动力学性质	a	VIIa	VIIa / TF	a	夏	电脑	吨PA	纤溶酶
  ķ 中号	31	180	200	125	580	113	ND	ND
  K 猫	0.63	0.007	0.79	36	15	0.055	ND	ND
  钾猫 / K M	0.2	ND	0.04	2.9	0.26	0.005	ND	ND

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   安全数据表

  结构体	D-LPR-ANSNH-C 3 H 7 •2 HCl
  对...有用	对因子XIa有用

  公式	二甲基亚砜
  浓度	10毫米

  动力学性质	a	VIIa	VIIa / TF	a	夏	电脑	吨PA	纤溶酶
  ķ 中号	0.5	300	300	171	75	45	98	ND
  K 猫	19	0.07	4.5	3.3	53	52	0.31	ND
  钾猫 / K M	380	0.002	0.15	0.19	7.1	12	0.03	ND

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   安全数据表

  结构体	D-FPR-ANSNH-C 6 H 11 •2 HCl
  对...有用	对凝血酶和VIIa有用

  公式	二甲基亚砜
  浓度	10毫米

  动力学性质	a	VIIa	VIIa / TF	a	夏	电脑	吨PA	纤溶酶
  ķ 中号	0.4	150	330	150	ND	7.8	36	ND
  K 猫	17	0.05	8.4	0.32	ND	6.6	0.074	ND
  钾猫 / K M	430	0.004	0.25	0.02	ND	8.6	0.02	ND

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   安全数据表

  结构体	D-FPR-ANSNH-C 4 H 9 •2 HCl
  对...有用	对因子VIIa有用

  公式	二甲基亚砜
  浓度	10毫米

  动力学性质	a	VIIa	VIIa / TF	a	夏	电脑	吨PA	纤溶酶
  ķ 中号	ND	186	102	ND	ND	53	ND	ND
  K 猫	ND	0.11	2.7	ND	ND	21	ND	ND
  钾猫 / K M	ND	0.006	0.26	ND	ND	4	ND	ND

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   安全数据表

  结构体	Boc-L-（pF）FPR-ANSNH-C 2 H 5
  对...有用	对tPA有用

  公式	二甲基亚砜
  浓度	10毫米

  动力学性质	a	VIIa	VIIa / TF	a	夏	电脑	吨PA	纤溶酶
  ķ 中号	3.7	50	217	ND	ND	ND	71	ND
  K 猫	44	0.008	0.88	ND	ND	ND	1.03	ND
  钾猫 / K M	120	0.002	0.04	ND	ND	ND	0.15	ND

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   安全数据表

  结构体	Boc-L-FPR-ANSNH-C 2 H 5
  对...有用	对凝血酶有用

  公式	二甲基亚砜
  浓度	10毫米

  动力学性质	a	VIIa	VIIa / TF	a	夏	电脑	吨PA	纤溶酶
  ķ 中号	17	ND	ND	100	ND	540	47	ND
  K 猫	58	ND	ND	0.31	ND	2.2	0.011	ND
  钾猫 / K M	34	ND	ND	0.003	ND	0.04	0.002	ND

•  SN-45 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）荧光底物定价：请咨询

   安全数据表

  结构体	L-EGR-ANSNH-C 3 H 7 •2 HBr
  对...有用	对因子XIa有用

  公式	二甲基亚砜
  浓度	10毫米

  动力学性质	a	VIIa	VIIa / TF	a	夏	电脑	吨PA	纤溶酶
  ķ 中号	100	ND	ND	110	225	440	ND	ND
  K 猫	2.5	ND	ND	0.2	82	17	ND	ND
  钾猫 / K M	0.25	ND	ND	0.02	3.6	0.39	ND	ND

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   安全数据表

  结构体	中银D-VLR-ANSNH-C 4 H 9
  对...有用	对APC有用

  公式	二甲基亚砜
  浓度	10毫米

  动力学性质	a	VIIa	VIIa / TF	a	夏	电脑	吨PA	纤溶酶
  ķ 中号	19	42	170	19	ND	3.9	ND	ND
  K 猫	0.055	0.007	1.6	0.055	ND	2.1	ND	ND
  钾猫 / K M	0.03	0.002	0.09	0.03	ND	5.2	ND	ND

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   安全数据表

  结构体	D-VPR-ANSNH-C 4 H 9 •2 HCl
  对...有用	对凝血酶和aPC有用

  公式	二甲基亚砜
  浓度	10毫米

  动力学性质	a	VIIa	VIIa / TF	a	夏	电脑	吨PA	纤溶酶
  ķ 中号	2	89	52	160	520	54	110	ND
  K 猫	110	0.019	0.76	3.3	92	72	0.71	ND
  钾猫 / K M	550	0.002	0.14	0.21	1.8	13	0.065	ND