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bellbrooklabs Transcreener cGAMP说明书

 更新时间:2020-12-29 点击量:1175

bellbrooklabs Transcreener cGAMP说明书

bellbrooklabs Transcreener® cGAMP cGAS

 

bellbrooklabs利用Transcreener cGAMP cGAS分析法发现cGAS抑制剂

Transcreener cGAMP cGAS分析法直接测量由环状GMP-AMP合酶(cGAS,C6orf150、2'3'-cGAMP合酶)产生的环状GMP-AMP  (cGAMP)。通过测量cGAMP的产量,研究人员可以有效地确定 cGAS酶的活性。该测定法提供了一个强大的工具,可以筛选整个化合物库中的cGAS调节剂,以 帮助找到针对cGAS-STING途径的新疗法。

cGAS是STING途径中的重要信使

真核细胞胞质溶胶中DNA的存在是感染或细胞损伤的指示,并且在I型干扰素(IFN)诱导的驱动下引发强烈的免疫反应。cGAS是细胞质中双链DNA的非常灵敏的传感器。DNA的结合激活了该酶,从而产生了*的环状二核苷酸第二信使cGAMP,它充当STING(干扰素基因刺激剂)受体的激动剂,从而导致I型干扰素应答。

cGAS STING途径

直接检测cGAMP以测量cGAS酶活性

Transcreener cGAMP FP分析-了解更多信息
cGAS分析示意图FP
 
 

Transcreener cGAMP cGAS FP检测技术手册(PDF)

 
cGAMP TR-FRET分析-了解更多
cGAS分析示意图TR-FRET
 
 

应用领域

  • 测量cGAS的酶活性
  • 筛选cGAS抑制剂的复合文库
  • 量化抑制剂效力
  • 确定抑制剂-cGAS停留时间

特征

  • 直接检测未标记的cGAMP
  • 易于使用,同质,一步式
  • 初始速度条件下的稳健分析Z'> 0.7
  • 远红色荧光读数大程度地减少了化合物干扰
  • 一种安全的非放射性方法
  • 可用于FP或TR-FRET读数

易于使用,混合阅读,HTS就绪分析

Transcreener cGAS分析法采用易于HTS使用,混合阅读的格式。运行您的酶反应,添加 Transcreener试剂,然后阅读板。该测定与96、384和1536孔格式兼容。

在cGAS初始速度下检测cGAMP

当使用标准曲线将原始数据转换为cGAMP时,该测定法显示线性。cGAS被双链DNA激活,并需要ATP和GTP底物来生产cGAMP。

全长人cGAS滴定

cGAS酶滴定

线性响应

抑制剂筛选和执行SAR

Transcreener cGAS分析法旨在以高通量格式筛选化合物库。还可以使用该测定法进行随访SAR,从而轻松确定抑制剂的效价。

1600复合先导筛

获取准确的剂量响应测量

cGAS抑制剂剂量反应曲线

说明了cGAS酶的DNA和底物依赖性

该测定法准确地证明了cGAS酶的特征。在GTP和ATP均存在的情况下,双链DNA激活了产生cGAMP的酶。一个45个碱基对的ISD(干扰素刺激性DNA)和一个60个碱基对的HSV(单纯疱疹病毒)DNA均可激活该酶。该测定法对cGAMP具有很高的亲和力,即使存在其他核苷酸也可以检测。

dsDNA激活cGAS酶

cGAS DNA滴定

对ATP和GTP的依赖

依赖于ATP和GTP的cGAS酶

出色的信号稳定性

该测定显示24小时以上的信号稳定性。这样的印版稳定性对于大型的高通量筛选至关重要,由于大量样品需要大量时间才能完成。

标准曲线包括ATP,GTP,dsDNA和cGAMP的滴定。在每个时间点读取相同的板。

cGAS分析信号稳定性
 

cGAS分析服务

有兴趣推进您的程序,但不想内部进行分析吗?我们的科学家可以提供帮助!BellBrook的科学家将利用其丰富的生物化学和酶学专业知识与您合作,并加快您的cGAS计划。

分析开发服务

潜在客户发现服务包括:

  • 抑制剂筛选–识别或确认靶标的活性。
  • 抑制剂效能分析–靶标和/或相关蛋白的剂量反应。快速IC 50结果。
  • 停留时间测量–使用“跳跃稀释”酶法测定k off。
  • 作用机理研究–动力学分析定义了抑制方式。

联系我们以了解更多信息

请填写下面的表格。我们将迅速做出响应,以使对话进展顺利,并了解我们如何提供帮助。我们保持事情分散,保密和专业。

 
 

在主要的多模阅读器上验证了远红FP和TR-FRET读数

供应商仪器
bioteklogoTriStar²SLB 942
密特拉拉斯LB 943
 
bioteklogoCytation™5
Cytation™3
Cytation™1
Synergy™H1
Synergy™2 / H4 / 4
Synergy™HTX
Synergy™Neo 2
 
BMGLABTECH徽标POLARstar ®欧米茄
FLUOSTAR ®欧米茄
PHERAstar ® FSX
PHERAstar ®加/ FS
CLARIOstar ® /加
 
MDS AT徽标分析师® GT / HT
双子座® XPS / EM
的SpectraMax ® M2 / M2e的
的SpectraMax ® M5 /的M5e / FlexStation ® 3
的SpectraMax ®范式
 
珀金埃尔默标志的EnVision ® /的EnVision ® XCITE
 
tecanLogo无限® M1000 / M1000Pro / Safire2™
无限® M200
无限® F500
无限® F200 /超进化
Spark™10M

包含什么

 
零件笔记
cGAMP抗体对二核苷酸cGAMP具有特异性的抗体。
示踪剂当被置换时,取决于测定形式,可以在FP或TR-FRET中读取荧光的变化。
停止并检测缓冲区B,10X可以用于终止酶反应以终止终点读数的缓冲液。
三磷酸腺苷ATP可用于酶反应和标准曲线。
GTPGTP可用于酶反应和标准曲线。
cGAMPcGAMP可用于创建标准曲线。
干扰素刺激DNAISD是用于激活cGAS酶的45 bp寡聚体。

您将需要什么

 
零件笔记
cGAS酶您可以直接通过BellBrook Labs购买活性cGAS酶 。
酶缓冲液我们经常使用含有20mM TRIS(pH 7.5)中,5毫摩尔MgCl酶缓冲液2,0.01%的Brij-35和1%DMSO(测试化合物溶剂)。使用适合您的酶条件的缓冲液
检测板您可以直接通过BellBrook Labs购买测定板。

 

FP-需要一个具有非粘合表面的全黑色印版。我们建议康宁384孔板,目录 #4514。

TR-FRET-需要具有无粘合表面的全白色板。我们建议使用康宁384孔板Cat。#4513

 

Transcreener cGAMP cGAS分析试剂盒

*

 
货号。产品描述价钱
3024-1KTranscreener cGAMP cGAS FP测定法(1,000测定法,384孔)$ 798.00
3024-10KTranscreener cGAMP cGAS FP测定法(10,000测定法,384孔)$ 4,615.00
3024-100KTranscreener cGAMP cGAS FP测定(10 X 10,000测定,384孔)$ 23,075.00
3025-1KTranscreener cGAMP cGAS TR-FRET测定(1,000测定,384孔)$ 875.00
3025-10KTranscreener cGAMP cGAS TR-FRET测定(10,000测定,384孔)$ 4,989.00
3025-100KTranscreener cGAMP cGAS TR-FRET测定(10 X 10,000测定,384孔)$ 24,950.00
 

cGAS酶订购信息

 

 
货号。产品描述价钱
2227重组cGAS酶,活性的,人的,全长,10 µg$ 399.00
2228重组cGAS酶,活性的,人的,全长,100 µg$ 1,398.00
 
 

cGAS筛选套件

*当以1.75μg/ mL(30 nM)使用时,包括用于各孔的足够酶

 
猫。没有。产品描述价钱
3024-1K-B包括Transcreener cGAS FP Assay 1K试剂盒和20 µg人类cGAS酶$ 1,275.00
3024-10K-B包括Transcreener cGAS FP Assay 10K试剂盒和200 µg人类cGAS酶$ 6,670.00
3025-1K-B包括Transcreener cGAS TR-FRET Assay 1K试剂盒和20 µg人类cGAS酶$ 1,345.00
3025-10K-B包括Transcreener cGAS TR-FRET Assay 10K试剂盒和200 µg人类cGAS酶$ 6,995.00
 

FP检测板

 

货号。产品描述价钱
2233康宁96孔黑色检测板(#3686),3片装(200+检测)$ 40.00
2229康宁384孔黑色检测板(#4514),3包(1,000多种检测)$ 45.00
2230康宁384孔黑色检测板(#4514),30包(10,000+检测)$ 400.00

 

TR-FRET检测板


货号。产品描述价钱
2234康宁96孔白色检测板(#3642),3包(200多种检测)$ 40.00
2231康宁384孔白色检测板(#4513),3包(1,000多种检测)$ 50.00
2232康宁384孔白色检测板(#4513),30包(10,000+检测)$ 450.00