genovis FabRICATOR® Enzyme说明书

FabRICATOR酶以冻干粉形式提供，不添加任何防腐剂，并且有2000瓶和5000单位瓶装，可消化2至5 mg IgG。

Fabricator（IdeS）是一种半胱氨酸蛋白酶，可在铰链下方的特定位点消化抗体，孵育30分钟后会产生F（ab'）2和Fc / 2片段的均质库。

详细资料

Fabricator（IdeS）是一种*的酶，可在铰链区下方的特定位点消化IgG，从而生成F（ab'）2和Fc / 2片段的均质库。除IgG外，没有其他已知的底物。IgG会在30分钟内被消化，如果延长孵育时间，则不会存在消化过度的风险。由于FabRICATOR在生理反应条件下消化IgG，因此可以保留免疫反应性。在37°C时可获得佳活性，但也可在室温下使用延长的反应时间进行消化。

Fabricator消化人类的所有亚类，以及猴子，兔子和绵羊IgG的某些类。它对小鼠IgG2a和IgG3的活性有限-对于这些抗体种类的消化，我们建议使用FabRICATORZ。

使用FabRICATOR消化IgG，然后还原，可产生三个25 kDa大小的片段（Fd'，Fc和LC），可以使用LC-MS仪器轻松对其进行分析。高精度质量概况能够检测抗体微变体，例如糖基化，C端赖氨酸钳制，氧化和脱酰胺等。

FabRICATOR从化脓性链球菌克隆  并在大肠杆菌中表达。该酶含有His标签，分子量为37 725 Da。FabRICATOR是IdeS的重组修饰形式，由Genovis AB开发，用于要求高标准和一致性的生物技术应用。 

储存和稳定性

将FabRICATOR酶冻干并通过添加水进行重构。重构后，Fabricator在+ 4-8°C稳定1个月。该产品在室温下运输，到达时应储存在-20°C下。

缓冲液

已测试以下缓冲液与FabRICATOR消化在不同pH值下的相容性。注意，在pH 5.0以下，Fabricator酶不可逆地失活。pH 8.0以上的消化需要延长/优化的条件。

• 磷酸盐缓冲液（PBS）6.0 – 8.0
• Tris缓冲区7.0 – 8.0
• MES缓冲区5.5 – 6.5
• HEPES缓冲区7.0 – 8.0
• 碳酸氢铵缓冲液6.0 – 7.0
• 醋酸钠缓冲液6.0

单位定义

在10 mM磷酸钠，137 mM NaCl，2.7mM KCl pH 7.4中于37°C孵育30分钟后，一个单位可消化≥95％的1µg人IgG。