nordicmubio FIX＆PERM®细胞固定和通透试剂盒
在流式细胞仪中使用抗体对蛋白质生物标志物进行细胞内染色，为研究和临床诊断中的细胞表型和功能表征提供了多种新选择。
实际上，某些细胞类型的明确表型鉴定可能需要同时标记细胞表面和细胞内标记物。另外，典型膜分子的胞质定位可以证明是可靠的谱系标志物，例如未分化白血病中的胞质CD3和CD22。
在这种情况下，对于许多其他细胞生物学和功能研究，必须进行细胞内免疫染色。为此，Nordic-MUbio提供了细胞固定和通透试剂盒FIX＆PERM®，与流式细胞术中细胞内细胞染色的其他方法相比，它具有许多优势。
FIX＆PERM®
- 温和固定细胞，保留其流式细胞仪散射特征
- 允许同时表征细胞内和细胞表面标记
- 快速的技术–整个过程可以在不到一小时的时间内完成，可以立即进行分析或存储24小时
- 严格的质量控制程序–使用定义明确的血液样本并随后比较获得的白细胞群的散射特征来确定每批样品的质量，从而确保一批又一批的结果一致且可靠
- 一系列具有优化方案的细胞内抗体，可与FIX＆PERM®一起使用
FIX＆PERM®是使用两种试剂的简单程序。试剂A轻轻固定细胞，而试剂B透化细胞。特定的制剂可降低背景并允许同时添加通透性培养基和荧光染料标记的抗体，从而可以对细胞内结构（如细胞质或核酶，癌蛋白，细胞因子，免疫球蛋白等）进行染色。
程序
对于每个要分析的样品，在5 ml试管中使用50 µl全血，骨髓或单核细胞悬浮液 - 加入100 µl试剂A（固定介质，室温下保存和使用）
- 在室温下孵育15分钟
- 加入5 ml磷酸盐缓冲盐水并以300 g离心5分钟
- 除去上清液，并向细胞沉淀中加入100 µl试剂B（通透性培养基）和20 µl适当的单克隆抗体偶联物
- 低速涡旋1-2秒
- 在室温下孵育15分钟
- 如上所述，用磷酸盐缓冲液洗涤细胞
- 除去上清液并将细胞重悬于鞘液中以便立即分析，或将细胞重悬于0.5 ml 1.0％甲醛中，并在黑暗中于2-8°C储存
- 在24小时内分析固定细胞
为与FIX＆PERM®一起使用而优化的产品
大多数可用的单克隆抗体偶联物均可与FIX一起使用。但是，在某些情况下，可能必须优化固定步骤。
Nordic-MUbio提供了多种针对FIX＆PERM®而优化的小鼠抗人偶联（PE / FITC）单克隆抗体。
| Antigen | Clone | Isotype | Format | Quantity | Cat. No. |
| CD3 | UCHT1 | IgG1 | Purified | 0.2 mg | GM-4011 |
| | | | FITC-labeled | 100 tests | GM-4012 |
| | | | PE-labeled | 100 tests | GM-4013 |
| CD22 | RFB4 | IgG1 | Purified | 0.2 mg | GM-4051 |
| | | | FITC-labeled | 100 tests | GM-4052 |
| | | | PE-labeled | 100 tests | GM-4053 |
| Lactoferrin | 4C5 | IgG1 | Purified | 0.2 mg | GM-4111 |
| | | | PE-labeled | 100 tests | GM-4113 |
| Myeloperoxidase | 8E6 | IgG1 | Purified | 0.2 mg | GM-4191 |
| (MPO-C2) | | | FITC-labeled | 100 tests | GM-4192 |
| | | | PE-labeled | 100 tests | GM-4193 |
| Lysozyme | LZ-2 | IgG1 | Purified | 0.2 mg | GM-4131 |
| | | | FITC-labeled | 100 tests | GM-4132 |
| CD68 | Ki-M7 | IgG1 | FITC-labeled | 100 tests | GM-4152 |
| IL-1 beta | FIB3 | IgG1 | FITC-labeled | 100 tests | GM-4162 |
| IFN-gamma | GZ4 | IgG1 | FITC-labeled | 100 tests | GM-4172 |
Furthermore, a number of Combi panels are offered for dual immunostaining protocols.
| Antigen | Clone | Isotype | Format | Quantity | Cat. No. |
| Negative control | Vl-AP | IgG1 | FITC-labeled | 50 tests | GIC-201 |
| | Vl-AP | IgG1 | PE-labeled | | - |
| Lysozyme | LZ-2 | IgG1 | FITC-labeled | 50 tests | GIC-206 |
| Lactoferrin | 4C5 | IgG1 | PE-labeled | | - |
| Myeloperoxidase | 8E6 | IgG1 | FITC-labeled | 50 tests | GIC-212 |
| Lactoferrin | 4C5 | IgG1 | PE-labeled | | - |
| Myeloperoxidase | 8E6 | IgG1 | FITC-labeled | 50 tests | GIC-213 |
| CD3 | UCHT1 | IgG1 | PE-labeled | | - |
| Myeloperoxidase | 8E6 | IgG1 | FITC-labeled | 50 tests | GIC-214 |
| CD22 | RFB4 | IgG1 | PE-labeled | |
