使用FAM FLICA Caspase-1检测试剂盒检测caspase-1活性。该体外测定采用荧光抑制剂探针FAM-WEHD-FMK标记活细胞中的活性caspase-1酶。使用荧光显微镜，荧光板读数器或流式细胞仪分析样品。

 分类：细胞凋亡，Caspase-1，胱天蛋白酶，FLICA®

胱天蛋白酶在细胞凋亡和炎症中起重要作用。研究人员使用ICT的FLICA检测试剂盒，以通过胱天蛋白酶在培养的细胞和组织中定量凋亡的方法。FAM FLICA Caspase-1探针使研究人员能够评估caspase-1的激活。

FLICA试剂FAM-WEHD-FMK进入每个细胞，并与激活的caspase-1不可逆地结合。由于FAM-WEHD-FMK FLICA试剂与活性酶共价偶联，因此保留在细胞内，而任何未结合的FAM-WEHD-FMK FLICA试剂则扩散出细胞并被冲洗掉。剩余的绿色荧光信号是添加试剂时细胞中存在的活性caspase-1酶活性的直接量度。包含结合的FLICA的细胞可以通过荧光酶标仪，荧光显微镜或流式细胞仪进行分析。可以立即读取用FLICA试剂标记的细胞，或使用试剂盒中包含的固定剂保存16小时。未固定的样品也可以分别用碘化丙锭或Hoechst 33342进行分析，以检测坏死或核形态的变化。

1.准备样品和对照
2.用diH 2 0稀释10X细胞凋亡洗涤缓冲液1:10。3 
.用50μLDMSO稀释FLICA 。
4.加入200μLPBS稀释FLICA 1：5。
5.以1:30的比例将稀释的FLICA加到每个样品中（例如，将10μL加到290μL培养的细胞中）。
6.孵育大约1小时。
7.取出培养基并洗涤细胞3次：添加1X细胞凋亡洗涤缓冲液并旋转细胞。
8.如果需要，用其他污渍标记，例如Hoechst，碘化丙啶，7-AAD或抗体。
9.如果需要，固定单元格。
10.用荧光显微镜，荧光板读数器或流式细胞仪进行分析。FAM-FLICA在492 nm处激发，并在520 nm处发射。

如果使用贴壁细胞，请参阅手册以了解其他方案。

ICT的FAM-FLICA Caspase-1（WEHD）试剂盒（＃9162）用于检测THP-1单核细胞的凋亡。用FAM-WEHD-FMK标记细胞，先用阴性对照（DMSO）或LPS（1 µg / mL，3小时）处理，再用尼古丁（20 µM，30分钟）处理，以诱导细胞凋亡。处理后，将细胞洗涤并重悬于PBS + 0.5％BSA中。然后将细胞用Hoechst 33342染色，固定并使用配备了EGFP（Ex 470/30，Em 530/50）和DAPI（Ex 375/28，Em 460/50）LED的Logos iRiS数字细胞成像系统进行观察以20倍的尺寸过滤立方体。与DMSO模拟处理的细胞（下部的图像）相比，在LPS +尼日利亚霉素处理的细胞（上部的图像）中观察到绿色FAM-FLICA染色水平升高（最左侧的图像）。还显示了Hoechst 33342染色（中间图像）以及EGFP和DAPI通道的覆盖图（最右边的图像）。

 •试剂名称：FAM-WEHD-FMK 
•目标：Caspase-1 
•激发/发射：492 nm / 520 nm 
•分析方法：流式细胞仪，荧光显微镜，荧光板读数器
•样品类型：细胞培养
•储存：2 -8°C 
•运送：过夜（国内）运送，国际优先运送

试剂盒9161：25个测试
•FLICA Caspase-1试剂（FAM-WEHD-FMK），1小瓶，＃6708 
•10X细胞凋亡洗涤缓冲液，15 mL，＃635 
•固定剂，6 mL，＃636 
•碘化丙锭，1 mL， ＃638 
•Hoechst 33342，1 mL，＃639 
•试剂盒手册

试剂盒9162：100个测试
•FLICA Caspase-1试剂（FAM-WEHD-FMK），4个样品瓶，＃6708 
•10X细胞凋亡洗涤缓冲液，60 mL，＃634 
•固定剂，6 mL，＃636 
•碘化丙锭，1 mL， ＃638 
•Hoechst 33342，1 mL，＃639 
•试剂盒手册