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kerafast EH1025-PM说明书

 更新时间:2021-06-02 点击量:745

 

 kerafast EH1025-PM说明书

 Pseudotyped ΔG-luciferase (G*ΔG-luciferase) rVSV

 假型ΔG-荧光素酶(G*ΔG-荧光素酶)rVSV

 

ΔG-荧光素酶是一种复制受限的重组水疱性口炎病毒 (rVSV),可用于生产含有来自多种异源病毒(包括需要 BSL-3 或 BSL-4 生物防护的病毒)包膜糖蛋白的假型病毒;然而,由于 rVSV-ΔG 假型的传染性仅限于单轮复制,因此可以使用 BSL-2 遏制措施来处理假型。这些特性与 rVSV-ΔG 假型的快速复制动力学一起,已被证明在旨在鉴定多种病毒的细胞受体的研究中很有用,并且它们还提供了一个强大的平台来筛选进入抑制剂的文库并评估随后的中和抗体反应。疫苗接种[1]。

订购该试剂时,将发送一瓶 VSV-G 假型 ΔG-荧光素酶 (G*ΔG-荧光素酶),按照 [1] 中所述的程序,可直接使用该酶生成含有您选择的包膜蛋白的假型。用 G*ΔG-荧光素酶感染细胞会在感染后 2-3 小时内产生可检测的荧光素酶活性,并在感染后的接下来 4-8 小时内迅速增加。对于每个使用的细胞系,感染性需要针对荧光素酶活性进行标准化。绝对传染性可以通过间接免疫荧光显微镜或流式细胞术使用 VSV 基质 (M) 蛋白、VSV 核衣壳 (N) 蛋白或荧光素酶的抗体进行量化。由于 G*ΔG-荧光素酶经历单轮感染,每个 M、N 或荧光素酶阳性细胞代表一个病毒感染单位。

研究员有责任寻求机构生物安全安全委员会批准在其实验室空间内使用重组 DNA、转基因动物或传染性病原体,并在使用这些材料期间保持机构生物安全安全委员会的批准。

来自Michael A. Whitt 博士的实验室,田纳西大学。

 

 

目录编号产品尺寸价格
EH1020-PM
假型ΔG-荧光素酶(G*ΔG-荧光素酶)rVSV
 
 
300uL
966.00 美元
 
EH1025-PM
假型 ΔG-荧光素酶 (G*ΔG-荧光素酶) rVSVw/ pCAGGS-G-Kan
 
 
300uL;带 pCAGGS-G-Kan
1,073.00 美元
 

 

产品类别:病毒
生物安全等级:BSL-2
载体信息:G*ΔG-荧光素酶使用 [1] 中所述的 VSV 反向遗传学系统从质粒 pVSV-δG-荧光素酶、pBS-N-ΦT、pBS-P-ΦT、pBS-G-ΦT 和 pBS-L-回收ΦT。恢复后,在用 pCAGGS-G 转染的 BHK-21 细胞上扩增斑块分离物(斑块可以在瞬时表达 VSV-G 的细胞上获得)。通过感染用 pCAGGS-G 以低复数 (MOI = 0.1) 转染的 BHK-21 细胞并在 BHK-21 细胞上滴定,产生二级工作原液。
病毒:VSV-G 假型 ΔG-荧光素酶 (G*ΔG-荧光素酶)
滴度:≥ 6x10e8 IU/mL
血清型:印第安纳州/圣胡安
接种条件:为了产生具有异源包膜糖蛋白的假型,细胞(BHK-21 或 HEK-293)首先用表达所选糖蛋白的质粒转染,约 24 小时后用 G*ΔG-荧光素酶以约 3 的复数(MOI)感染到 5. 为了产生 G*ΔG-荧光素酶的工作储备,已用 pCAGGS-G 转染的细胞用低多重性 (MOI = 0.1) 的 G*ΔG-荧光素酶感染,并在大约 18-24 小时后收获培养物上清液。感染。
贮存:储存在-80℃。不推荐多次冷冻/解冻。
发货:在干冰上冷冻

 

注释
如果在 -70 到 -80C 下冷冻储存,病毒储液是稳定的。在不显着降低传染性的情况下,应冷冻和解冻不超过 3 次。要产生额外的 G*deltaG-荧光素酶工作储备,请参阅上面的接种条件。