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ibidi I型胶原蛋白说明书

 更新时间:2021-08-11 点击量:798



ibidi 生产和分销少量经过*质量控制的试剂。这些试剂是专门针对特定应用开发和测试的。在这里找到 LifeAct 肌动蛋白可视化产品、细胞培养和显微镜试剂,以及各种细胞和检测服务。

ibidi I型胶原蛋白说明书


I型胶原蛋白,鼠尾

    I型胶原蛋白,鼠尾

    用于细胞培养应用(例如,3D 凝胶、支架和涂层)的高质量鼠尾 I 型胶原蛋白溶液

    • 提供体内样细胞外基质 (ECM) 结构

    • 用于模拟凝胶基质中生物 ECM 的非胃蛋白酶化的天然胶原蛋白

    • 快速聚合促进 3D 凝胶中的最佳细胞分布

    50201


    应用:

    • 体内样基质中的3D 细胞培养

    • 3D 环境中的活细胞成像

    • 为类器官和球体创建 3D 支架

    • 使用µ-Slide Chemotaxis进行 3D 胶原凝胶的趋化分析

    • 悬浮细胞(如白细胞)的细胞迁移分析

    • 用薄胶原层涂覆细胞培养容器以促进细胞附着

    • 2D 与 3D 环境中的细胞分化研究

    • 由于自发荧光低,非常适合荧光显微镜

    技术特点:

    • 来自大鼠肌腱的高质量纯化蛋白

    • 高度标准化的制造过程,严格的质量控制

    • 温和的制造工艺,实现高水平的诞生

    • 提供了详细的协议以方便处理

    • 冷藏包装运输并在 –20°C 下储存,以获得明确的质量和重现性

    • 有 2 种浓度可供选择:用于标准应用的 5 mg/ml 和用于特殊应用的 10 mg/ml 的高浓度溶液

    • 市场上高水平的天然交联(最高质量等级)

    • 高粘度:建议使用用于高粘度溶液的专用移液器

    • 低自发荧光

    规格:

    源材料鼠尾肌腱
    外貌光学透明粘稠液体
    萃取酸,非胃蛋白酶
    纯度> 90% SDS PAGE
    无菌无菌,用于细胞培养
    质量检测并发现 DNA、细菌、真菌和支原体呈阴性
    生长因子没有任何
    公式以 17.5 mM 乙酸 (0.1%) 提供
    酸碱度3.8
    功能控制细胞培养中的 3D 凝胶和 2D 涂层测试
    贮存–20°C,避免多次冻融循环


    注意:我们推荐 5 mg/ml 胶原蛋白溶液用于 3D 凝胶和培养器皿的薄涂层。由于其高浓度(和高粘度),10 mg/ml 胶原蛋白溶液更适用于特殊应用,例如支架和生物打印。

    使用胶原蛋白作为体内样基质进行 3D 细胞培养

    胶原蛋白是结缔组织的主要成分,在哺乳动物体内含量丰富。它广泛用于 3D 细胞培养以模拟生物细胞外基质,或作为促进细胞附着的涂层。

    许多细胞在三维环境中自然生长。在体外培养时,细胞附着在平坦的 2D 表面上,其行为可能与在 3D 凝胶基质内时不同。在许多情况下,3D 环境更类似于体内情况,在规划细胞培养检测时应考虑到这一点。

    贴壁 HT-1080 癌细胞的显微镜检查

    贴壁HT-1080癌细胞示意图

    贴壁 HT-1080 癌细胞在 2D 表面(左)并嵌入 3D I 型胶原蛋白、大鼠尾基质(右)的显微镜和示意图。

    胶原蛋白结构

    胶原蛋白是一种纤维蛋白,由三个 α 链组成。它们结合形成绳状三螺旋,从而为细胞外基质 (ECM) 提供拉伸强度。α 链包含 GXY 重复序列,其中包括甘氨酸 (G),这是一种非常适合三螺旋的氨基酸。通常,X 和 Y 代表羟脯氨酸和脯氨酸,它们是胶原蛋白稳定性的关键成分。三重螺旋以自组织方式聚集并形成原纤维。在体内,原纤维聚合成纤维,形成肌腱或真皮等组织。

    用于体外实验的胶原蛋白是从动物组织中提取的酸或酶。在酸性条件下(低 pH 值),纤维分解成可溶性原纤维。在一些提取方法中,胃蛋白酶用于促进胶原蛋白的提取。但胃蛋白酶也会在一定程度上消化胶原蛋白,导致天然纤维交联活性显着降低。

    与胃蛋白酶提取的胶原蛋白(通常来自牛皮肤)不同,ibidi I 型鼠尾胶原蛋白是酸提取的。这一点,以及非常温和的制造过程,保留了最大的诞生。

    胶原蛋白的结构

    胶原蛋白的结构

    胶原聚合

    在酸性溶液中,胶原纤维以无定向的方式存在。胶原纤维之间仅形成氢键,这使溶液具有高粘度。变为中性 pH 值会导致原纤维聚合成纤维。这种聚合产生了一种三维胶原凝胶。所用胶原蛋白的原生水平决定了胶原蛋白网络中的纤维交联水平。天然(非胃蛋白酶提取的)胶原蛋白表现出高水平的交联,而胃蛋白酶化的胶原蛋白溶液在体内形成较少的凝胶。

    胶原聚合


    ibidi 胶原蛋白 I 型,鼠尾胶原蛋白由于蛋白质浓度高而具有非常高的粘度,尤其是在 10 毫克/毫升时。pH 驱动聚合改变其特性如下:


    非聚合胶原蛋白聚合胶原蛋白
    宏观光学外观透明至微乳白色白色,混浊
    显微光学外观清晰,无结构纤维网络,构建在显微镜下可见的纤维
    粘度很高,但仍在流动不流动;小的变形(例如,通过移液器吸头)会使结构破裂
    移液可使用特殊移液器移
    取高粘度液体
    无法定义移液,任何机械力都会破坏结构和机械性能





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