lumiprobe ProteOrange 蛋白质定量试剂盒说明书

ProteOrange 蛋白质定量试剂盒

该蛋白质定量试剂盒的核心是一种非常灵敏的 ProteOrange 荧光染料。该染料适用于荧光分光光度计和酶标仪。该试剂盒针对蛋白质定量进行了优化，最终溶液中蛋白质的检测水平低至 10 ng/mL。

ProteOrange 蛋白质定量试剂盒  

带有荧光染料的 ProteOrange 试剂盒允许以比分光光度法和其他用于蛋白质定量的常规方法（Lowry，Bradford，BCA）更高的灵敏度进行蛋白质定量。

ProteOrange 试剂是试剂盒的关键成分，其游离形式几乎没有荧光。在溶液中，它与蛋白质分子形成复合物，并在与蛋白质结合时表现出增加的荧光。ProteOrange 在与蛋白质的复合物中的激发最大值在 ~485 nm，发射最大值在 ~590 nm。该试剂盒可与任何具有合适激发源和检测通道的荧光计一起使用。一般来说，所测蛋白质浓度的工作范围受设备灵敏度的限制。对于比色皿荧光计，推荐的可测量浓度范围为 10 ng/mL 至 10 µg/mL，对于平板荧光计，推荐浓度范围为 100 ng/mL 至 10 µg/mL。

该试剂盒包含 ProteOrange 荧光染料、用于制备染料工作溶液的缓冲液和蛋白质浓度标准品（BSA，2 mg/mL）。为了量化测试蛋白质，制备染料工作溶液并用它来稀释测试样品和已知蛋白质浓度的样品以生成校准曲线。使用来自试剂盒的牛血清白蛋白或（如果有）与测试样品中相同的实验蛋白质制备蛋白质浓度标准。在 95°C 下孵育准备好的样品 10 分钟以使蛋白质变性，让它们冷却至室温并测量荧光强度。

根据样品体积，测量次数从 200（标准荧光比色皿的样品体积 2.5 mL 和分析体积 2 mL）到 2000（96 孔板的样品体积 250 µL 和分析体积 200 µL）不等。