一、产品概述
KPL 5120-0077(SureBlue TMB Microwell Substrate)是一款基于3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)的单组分即用型显色底物,专为酶联免疫吸附试验(ELISA)和蛋白质印迹(Western Blot)设计。该产品通过过氧化物酶(HRP)催化反应生成深蓝色产物,酸化终止后转为黄色,适用于高灵敏度定量检测,广泛用于科研、临床诊断和生物制药领域。
二、核心特性与技术优势
1. 超高灵敏度
- 检测灵敏度达0.4 ng/mL HRP标记物,优于传统底物(如ABTS),尤其适用于低丰度靶标(如细胞因子、病毒抗原)的检测。
- 显色反应迅速,室温孵育5-30分钟即可获得稳定信号,支持高通量实验需求。
2. 稳定性
- 采用KPL配方,批次间差异小于15%,2-8℃避光保存有效期长达24个月,确保实验可重复性。
- 即用型设计:无需预混或稀释,直接加入反应体系,减少操作误差。
3. 广泛兼容性
- 适配HRP标记的二抗、链霉亲和素-生物素复合物等,支持ELISA、Western Blot、免疫组化(IHC)等多种实验平台。
- 可搭配KPL膜增强剂(Detector Block, 71-83-00)优化Western Blot弱信号检测。
4. 安全环保
- 不含二甲基亚砜(DMSO)、二甲基甲酰胺(DMF)等有害溶剂,符合实验室安全标准。
三、应用场景与实验方案
1. ELISA检测
- 功能:作为显色底物用于检测抗体效价、细胞因子(如IL-6、TNF-α)、病毒抗原(如SARS-CoV-2核衣壳蛋白)等。
- 案例:在传染病诊断中,可精准检测低至0.4 ng/mL的病原体蛋白,助力早期诊断。
2. Western Blot增强检测
- 配套试剂:结合KPL封闭剂(如10% BSA Diluent/Blocking Solution, 50-61-00)或Milk Diluent(50-82-01),可降低非特异性背景,提升低表达蛋白的可视化效果。
- 操作建议:显色后立即酸化终止,10分钟内完成吸光度读取以避免信号衰减。
3. 多重检测平台
- 兼容荧光标记系统,支持多靶标同步检测,适用于复杂样本分析(如肿瘤标志物联合检测)。
四、实验优化指南
1. 反应条件控制
- 孵育时间:根据靶标浓度调整(高浓度样本建议5-10分钟,避免过曝)。
- 终止液选择:推荐1N硫酸或同类酸性溶液,终止后10分钟内读取结果。
2. 封闭方案优化
- 使用KPL封闭剂(如10% BSA或Milk Diluent)可减少非特异性结合。
- 若背景信号偏高,可延长封闭时间至1小时或更换封闭剂类型。
3. 储存与稳定性
- 2-8℃避光保存,避免反复冻融;开封后建议分装使用以延长稳定性。
五、KPL品牌的技术积淀
KPL成立于1982年,是实现亲和素纯化二抗商业化的生物技术公司,2013年被诊断试剂SeraCare收购后,进一步整合资源强化技术优势。其核心创新包括:
- 亲和纯化技术:通过层析去除杂蛋白,二抗特异性提升50%。
- 底物开发经验:TMB底物配方优化,稳定性较竞品提升30%。
六、技术支持与采购信息
作为KPL中国区授权代理商,上海起发实验试剂有限公司提供以下支持:
- 正品保障:原厂直供,提供技术认证文件与售后质量承诺。
- 现货储备:上海浦东仓库常备5120-0077等全线产品,支持加急物流(1-2周到货)。
- 实验方案指导:针对ELISA/WB等复杂需求提供定制化技术支持。
七、总结
KPL 5120-0077凭借高灵敏度、稳定性和即用型设计,成为免疫检测领域的产品。其广泛兼容性可满足科研与工业质检的多样化需求,而上海起发实验试剂的高效供应链与专业服务则为用户提供了可靠保障。
(注:技术参数基于KPL品牌资料整理,具体以品牌说明书为准。)