🔍产品基础信息
- 货号:BCHM-ASY-0005
- 品名:LCGreen Plus Kits 荧光染料
- 品牌:BioFireDefense
- 规格:1000 Reactions
- 应用领域:高分辨率熔解曲线分析(HRM)、基因分型、突变检测、甲基化研究
📝详细介绍
- 技术原理
LCGreen Plus Kits 荧光染料是一种DNA双链饱和荧光染料,通过实时监测PCR产物熔解过程中荧光强度的变化,精准识别DNA序列的微小差异(如单碱基突变、SNP、插入/缺失等)。其化学结构在高温变性时不会迁移至解链DNA区域,确保熔解曲线分辨率高达0.1°C。
- 核心应用
1. 基因分型:区分杂合子与纯合子突变(如CFTR基因突变筛查)。
2. 病原体鉴定:快速检测细菌/病毒耐药基因变异(如结核分枝杆菌)。
3. 甲基化分析:定量评估DNA甲基化水平(如癌症相关基因启动子甲基化)。
4. 质量控制:验证PCR扩增产物特异性,避免非特异性扩增干扰。
- 性能参数
1.灵敏度:可检测低至0.1%的突变等位基因。
2.兼容性:支持Roche LightCycler、Applied Biosystems等主流HRM仪器。
3.安全性:无毒性、无致癌性,符合生物安全标准。
🎯核心优势
1. 超高分辨率
- 区分单碱基差异(如A/T或C/G突变),熔解曲线峰形差异显著。
- 支持400bp以内短片段分析,适合高密度位点筛查。
2. 闭管操作,0污染
- 无需开盖加探针,降低交叉污染风险,适合临床样本检测。
3. 成本效益高
- 无需定制探针,直接替代传统TaqMan探针法,节省50%以上成本。
4. 快速实验流程
- 全程仅需15分钟(传统方法需2小时),支持高通量样本处理。
5. 数据稳定性强
- 高信噪比(SNR>30),重复性CV值<2%,确保结果可靠。
❓常见问题解答
Q1:LCGreen Plus是否适用于所有HRM仪器?
A:兼容主流设备(如Roche LightCycler 480、Qiagen Rotor-Gene),但需验证仪器热均一性。
Q2:能否检测甲基化程度?
A:支持!通过MS-HRM(甲基化敏感性HRM)技术,可定量分析甲基化水平(如MGMT基因启动子)。
Q3:样本类型有哪些限制?
A:适用于DNA样本(纯度OD260/280=1.8-2.0),RNA需先反转录为cDNA。
Q4:如何保存与使用?
A:-20℃避光保存,避免反复冻融。推荐工作浓度为0.2-0.4μM。
Q5:结果如何解读?
A:通过HRM分析软件(如LightCycler® 480 Gene Scanning Software)生成差异图,对比标准品判断突变类型。
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