🔍产品基础信息
- 货号:294-88501
- 英文名:LBIS® Rat LH ELISA KIT (S type)
- 中文名:大鼠促黄体生成素(LH)ELISA试剂盒(S型)
- 品牌:Wako和光纯药
- 规格:96T
- 适用领域:内分泌学、生殖医学、药理学研究
- 检测对象:大鼠血清、血浆、细胞培养上清液等生物样本
📝产品详细介绍
1. 检测原理与技术特点
大鼠促黄体生成素(LH)ELISA试剂盒(S型)基于双抗体夹心ELISA法,采用高亲和力单克隆抗体特异性捕获LH分子。样本中的LH与预包被抗体结合后,通过标记的二抗(抗GH抗体)和链霉亲和素-HRP酶联显色系统,生成蓝色产物,终止反应后通过450 nm波长测定吸光度(OD值),实现LH浓度的定量分析。
2. 试剂盒核心组成
- 预包被抗体板:96孔板(8×12条),抗体包被后经清洗处理,可直接使用。
- 标准品:含100 ng/mL的LH标准溶液(需稀释后使用)。
- 缓冲液体系:包括稀释液、测定缓冲液、洗涤液(10×浓缩液)等,均为即用型。
- 酶标试剂:结合抗GH抗体、HRP标记链霉亲和素。
- 显色与终止系统:TMB显色液、1M H₂SO₄终止液。
- 辅助耗材:封板膜、说明书及质控文件。
3. 样本处理与检测流程
- 样本要求:推荐使用EDTA抗凝血浆(避免肝素干扰),血清需静置30分钟后离心(2000×g,10分钟)。
- 稀释方案:样本需进行双重稀释(稀释液2倍→测定缓冲液2.5倍),最终稀释倍数不超过2.5倍,单孔样本量10 μL。
- 实验步骤:
1. 加样:标准品与样本各10 μL/孔。
2. 孵育:37℃温育60分钟(一抗结合)。
3. 洗涤:5次洗板(350 μL/孔),去除未结合物。
4. 酶标抗体孵育:加入HRP标记抗体,37℃孵育60分钟。
5. 显色与终止:TMB显色15分钟,1M H₂SO₄终止反应。
6. 读板:450 nm波长测定OD值,绘制标准曲线计算浓度。
4. 性能参数与数据验证
- 灵敏度:低检测限(LOD)为0.313 ng/mL(标准曲线范围0.313–10 ng/mL)。
- 精密度:
- 板内CV值:4.6%(均值8.40 ng/mL,SD 0.39)。
- 板间CV值:0.038%(均值5.00 ng/mL,SD 0.0019)。
- 回收率:97.7%–103%(样本添加量0.584–4.07 ng/mL)。
- 线性范围:稀释线性实验R²=0.999,支持高浓度样本稀释检测。
🎯核心优势解析
1. 超高灵敏度与宽检测范围
- 可精准检测低至0.3 ng/mL的LH,适用于微量样本(如幼鼠或低分泌模型)。
- 标准曲线覆盖0.3–10 ng/mL,满足从基础研究到临床前药效评估的全场景需求。
2. 微量样本友好设计
- 仅需10 μL样本即可启动检测,减少实验材料消耗,尤其适合珍贵样本或高通量筛选。
3. 即用型试剂与操作简化
- 全套试剂预混即用,无需自行配制,降低操作失误风险。
- 全程仅需3小时50分钟(传统方法需6–8小时),显著提升实验效率。
4. 高特异性与低交叉反应
- 采用单克隆抗体,仅识别LH的β亚基,避免与FSH、TSH等激素交叉反应(交叉率<0.1%)。
5. 安全环保配方
- 采用无叠氮化物防腐剂,符合实验室安全规范。
❓常见问题与解答
Q1:样本反复冻融是否影响结果?
A:LH对反复冻融敏感,建议分装保存(-20℃以下),避免超过3次冻融。若样本浑浊或溶血,需重新离心处理。
Q2:能否检测重组LH?
A:本试剂盒验证过重组大鼠LH的检测,与天然LH具有同等反应性。
Q3:显色后颜色过深或过浅如何处理?
A:- 过深:可能因样本浓度过高,需进一步稀释后复测。
- 过浅:检查HRP酶活性(建议更换新批次试剂)或延长显色时间至20分钟。
Q4:试剂盒有效期如何判断?
A:未开封试剂盒有效期为12个月(2–8℃保存),开封后需密封冷藏并在1个月内用完。
Q5:能否用于临床诊断?
A:本产品为科研用途,不可用于临床诊断。
Q6:如何验证实验数据的可靠性?
A:建议同步进行:
- 重复性测试:同一样本重复3次检测,CV值应<10%。
- 回收率实验:添加已知浓度LH,回收率应在80%–120%之间。
Q7:与其他品牌试剂盒的差异?
A:Wako试剂盒的样本需求量更少(10 μL vs 常规25–50 μL),且孵育时间缩短20%,适合高通量实验。
Q8:运输过程中如何避免试剂失效?
A:建议使用泡沫箱+冰袋运输,避免高温(>30℃)或剧烈震动。
Q9:能否检测其他物种的LH?
A:仅适用于大鼠,与其他物种(如小鼠、人)存在交叉反应风险。
Q10:标准曲线异常(如线性度差)怎么办?
A:检查标准品是否稀释正确,或尝试更换不同批次标准品。若持续异常,联系技术支持。
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(注:本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理,具体以品牌信息文档为准。)
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