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Bovogen牛血清白蛋白V(货号:BSAS1.0)中文说明书

更新时间:2026-01-12点击次数:43

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 一、产品描述

1.本产品为Bovogen品牌旗下核心纯化蛋白产品,正式品名为牛血清白蛋白V(又称第五组分),货号为BSAS1.0,英文名是BovoStar Bovine Serum Albumin(Fraction V)。品牌Bovogen成立于2001年,是ANZCO Foods Healthcare的分支机构,后经整合成为由ANZCO Foods与Itoham Yonekyu联合管理的生物制品供应商,专注于高质量动物血清、纯化蛋白及生物技术产品的研发与生产,产品销往超过45个国家和地区。

2.本产品原料源自100%澳大利亚或新西兰原产的健康牛血浆,所有供体牛只均经过政府兽医监管部门的宰前及宰后严格检疫,符合人类食用标准,从源头确保原料的安全性与可靠性。生产过程严格遵循GMP(良好生产规范)要求,在澳大利亚墨尔本的现代化生产基地完成,采用两步纯化及热激工艺,全程通过一次性无菌闭环操作系统进行,避免批次交叉污染。

3.产品形态为白色冻干粉,无异味,易溶于水及常用缓冲液。核心技术参数如下:分子量约为66.5kDa,由581个氨基酸残基组成,含35个半胱氨酸并形成17个二硫键,肽链第34位存在一个自由巯基;等电点为4.8,含氮量16%,含糖量0.08%,含脂量仅0.2%,仅含已糖和已糖胺;纯度不低于99%,无DNase、RNase及Protease污染,内毒素含量控制在极低水平,满足高灵敏度实验需求。

4.产品规格提供多档位选择,包括100g/瓶、500g/瓶及1kg/瓶,均为无菌包装,每批产品均附带完整的分析证书(COA),出口订单可提供原产地证书,实现从牧场到成品的全程溯源。本产品已通过欧洲药品质量管理局(EDQM)认证,证书编号为CEP 2005-293-00 Rev,符合国际生物制品质量标准,广泛应用于生命科学研究、体外诊断、疫苗生产、生物制药等多个领域。

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 二、产品特点

 1. 原料优质且可追溯

原料血浆采集自经USDA认可或政府监管的注册出口屠宰场,仅选用澳大利亚或新西兰健康牛只,所有供体动物均经过严格的疫病筛查,确保无牛源性病毒污染。依托供应链管理系统,实现从牧场、屠宰场、血浆收集到生产加工的全程记录追溯,明确原产地信息,为实验结果的可靠性提供源头保障。

 2. 高纯度与高安全性

采用纯化工艺,产品纯度稳定在99%以上,有效去除血浆中的杂蛋白、核酸酶、蛋白酶等污染物,避免对实验体系造成干扰。通过严格的内毒素检测,确保产品内毒素含量符合低内毒素标准,降低对细胞培养等敏感实验的毒性影响;同时产品不含防腐剂、稳定剂等添加剂,保留天然蛋白活性。

 3. 批次稳定性优秀

生产过程采用标准化操作流程,从原料筛选、纯化、检测到包装均建立严格的质量控制体系,每批产品均需通过第三方认可实验室的多项指标检测(包括纯度、活性、污染物残留等)。长期生产数据显示,不同批次产品的关键性能参数变异系数小,能有效保证实验结果的重复性与可比性,适用于长期系列实验及规模化生产应用。

 4. 功能全面且适用性广

产品兼具维持渗透压、PH缓冲、载体运输、营养补充及生物分子稳定等多重功能,可适配细胞培养、分子生物学、免疫学、药物研发等多个领域的实验需求。无论是作为蛋白标准品、免疫实验封闭剂,还是细胞培养基添加剂、酶反应稳定剂,均能发挥稳定可靠的作用,兼容多种实验体系与操作流程。

 5. 合规性与品质保障

产品符合欧洲理事会优质药品(EDQM)标准,生产设施及工艺满足FDA 21 CFR 211.72规范要求,过滤材料均为FDA认证的食品接触级材料,符合USP生物安全性标准。所有产品均经过严格的无菌检测,无细菌、真菌、支原体等微生物污染,为科研及生产活动提供合规、安全的物料支持。


 三、储存条件

 1. 未溶解产品储存

未开封的冻干粉产品应储存在2-8℃的阴凉干燥环境中,避免阳光直射、高温及潮湿。储存期间需保持包装密封完好,防止吸潮结块。产品常温运输条件下稳定性良好,运输过程中需避免剧烈震荡与异常温度(低于0℃或高于30℃)。

 2. 保质期说明

在规定储存条件下,未开封产品的保质期为自生产当月起3年,具体有效期详见产品外包装盒及分析证书(COA)。超过保质期的产品请勿使用,以免因蛋白活性下降或性能变化影响实验结果。

 3. 溶解后产品储存

产品溶解后,建议立即使用以保证性能。若需短期保存,可将溶解后的溶液分装至无菌容器中,在4℃条件下密封保存,保存时间不超过7天;若需长期保存,应将溶解后的溶液分装为单次使用量,置于-20℃或-80℃冷冻储存,可保存6个月。

 4. 储存注意事项

冷冻储存的溶解液需避免反复冻融(建议不超过3次),反复冻融会导致蛋白构象改变、活性下降,还可能引起蛋白聚集沉淀。储存过程中应避免与挥发性化学品、强氧化剂等有害物质混放,防止污染。若储存期间发现产品出现异常颜色变化、异味或明显结块,应停止使用。


 四、工作原理

牛血清白蛋白(BSA)作为牛血浆中的主要蛋白质成分,其核心功能基于其独特的分子结构与理化性质,在不同实验场景中通过多重机制发挥作用:

 1. 维持渗透压与PH缓冲作用

BSA分子量大且具有一定的亲水性,在水溶液中能形成稳定的胶体体系,可有效维持溶液的渗透压平衡,这一特性在细胞培养中尤为重要,能避免细胞因渗透压变化导致的吸水破裂或失水皱缩。同时,BSA分子中含有的氨基酸残基可通过质子化与去质子化反应调节溶液PH值,发挥温和的缓冲作用,为细胞生长或酶促反应提供稳定的酸碱环境。

 2. 载体运输作用

BSA分子结构中含有多个疏水结合位点,能够与多种小分子物质特异性结合,包括脂肪酸、激素、类固醇、金属离子及部分药物分子等。在细胞培养体系中,BSA可作为载体将难溶性营养物质(如脂肪酸)运输至细胞内,促进细胞吸收利用;在体外诊断或药物研发中,可通过载体作用提高疏水性物质的溶解性与稳定性,优化反应体系。

 3. 营养补充作用

BSA富含多种必需氨基酸,在细胞培养(尤其是无血清培养)中可作为营养补充剂,为细胞生长、增殖提供必要的营养物质,支持细胞代谢活动。对于生长周期较长或营养需求较高的细胞(如原代细胞、干细胞),BSA的营养补充作用能显著提高细胞存活率与增殖效率。

 4. 生物分子稳定作用

BSA能与酶、抗体、核酸等生物分子通过非特异性相互作用形成复合物,减少这些生物分子在储存或反应过程中的构象变化,防止其因氧化、吸附于容器壁或降解而失活。在PCR反应中,BSA可稳定DNA聚合酶的活性,减少抑制物对酶促反应的干扰;在抗体储存液中添加BSA,能延长抗体的保质期并维持其结合活性。

 5. 封闭非特异性结合位点作用

在免疫学实验(如ELISA、Western Blot、免疫荧光)中,实验载体(如酶标板、硝酸纤维素膜)表面存在大量非特异性结合位点,易导致抗体等试剂非特异性吸附,产生高背景信号。BSA作为单一成分的惰性蛋白,可竞争性结合这些非特异性位点,形成致密的封闭层,阻止抗体与载体的非特异性结合,从而提高实验的特异性与灵敏度。


 五、解决实验中哪些问题

本产品凭借其高纯度、低污染、批次稳定等核心特性,可针对性解决生命科学实验中多个常见痛点问题:

 1. 解决实验背景信号过高问题

在ELISA、Western Blot等免疫实验中,非特异性结合是导致背景信号过高的主要原因之一。本产品纯度不低于99%,不含杂蛋白、核酸酶等污染物,作为封闭剂使用时,能高效占据载体表面的非特异性位点,避免抗体的非特异性吸附,显著降低实验背景,使目标信号更清晰,提高检测结果的准确性。

 2. 解决细胞培养中细胞生长不良问题

细胞培养(尤其是无血清或低血清培养)中,细胞常因营养不足、渗透压不稳定或有害物质影响出现生长缓慢、贴壁不良、存活率低等问题。本产品低内毒素(符合实验级标准)且无细胞毒性,添加到培养基中可提供营养支持、维持渗透压平衡,并通过载体作用运输脂肪酸等必需营养物质,同时中和部分培养基中的毒性物质,改善细胞生长微环境,提高细胞贴壁率与增殖活性。

 3. 解决生物分子活性不稳定问题

酶、抗体、蛋白样品等生物分子在储存或反应过程中易因氧化、吸附、降解等因素失活,导致实验失败。本产品可作为稳定剂,通过与生物分子形成复合物、占据容器壁吸附位点、清除体系中的自由基等机制,保护生物分子的天然构象与活性,延长其保质期,确保实验反应的高效进行。例如在PCR实验中,BSA可稳定DNA聚合酶活性,解决因酶失活导致的扩增效率低或无扩增产物问题。

 4. 解决实验重复性差问题

实验材料的批次差异是导致实验结果重复性差的重要因素之一。本产品采用标准化生产工艺与严格的质量控制体系,不同批次间的纯度、活性、内毒素含量等关键参数变异系数小,能有效保证实验条件的一致性。同时,产品可全程溯源,每批均提供详细的分析证书,便于实验者追踪实验材料特性,减少因材料差异导致的实验误差,提高实验结果的可重复性与可比性。

 5. 解决难溶性物质溶解与运输问题

在药物研发、体外诊断等实验中,许多疏水性小分子物质(如脂肪酸、部分药物分子)在水溶液中溶解度低,难以形成稳定的反应体系,影响实验效果。本产品的载体作用可与这些疏水性物质特异性结合,提高其在水溶液中的溶解性与分散性,同时实现对目标分子的有效运输,确保反应体系的稳定性与均一性,解决因物质难溶导致的实验体系不均、反应效率低等问题。

 6. 解决蛋白定量标准品不准确问题

蛋白定量实验(如Bradford法、Lowry法、BCA法)需要高纯度、分子量稳定的标准品来绘制标准曲线。本产品纯度高、分子量均一(约66.5kDa),且不含干扰蛋白定量的杂质,作为标准品使用时,能绘制出精准的标准曲线,提高未知样品蛋白浓度测定的准确性,解决因标准品纯度不足或分子量不均导致的定量结果偏差问题。


 六、使用方法

 1. 前期准备

使用前需将产品从2-8℃储存环境中取出,置于室温下平衡30分钟,避免因温度骤变导致产品吸潮或溶解不够。实验所需的水、缓冲液(如PBS、Tris-HCl)需提前灭菌并冷却至室温,所有实验器具(离心管、移液枪头、烧杯等)需经无菌处理,避免污染。

 2. 溶解步骤

根据实验需求计算所需产品用量,采用无菌操作称取适量冻干粉(建议每次称取不超过单次使用量,避免反复开盖吸潮)。将称取的冻干粉缓慢加入到预冷的无菌水或缓冲液中,建议初始溶解浓度为10-20mg/ml,轻柔颠倒容器混合,避免剧烈搅拌或震荡(防止蛋白变性)。若溶解困难,可将容器置于20-37℃水浴中温和振荡10-15分钟,促进溶解,溶解过程中避免长时间高温放置。

 3. 稀释方法

溶解后的母液需根据不同实验场景进行稀释,稀释时应使用与实验体系一致的缓冲液,避免因缓冲液不兼容导致蛋白沉淀。稀释过程采用梯度稀释法,逐步加入稀释液并轻柔混合,确保稀释均匀。稀释后的工作液需现配现用,若需短期保存,按储存条件要求进行处理。

 4. 不同实验场景的具体使用方法

 (1)蛋白定量标准品使用

- 用无菌水将产品溶解为1mg/ml的标准母液,分装后-20℃冷冻保存。

- 实验时取出母液,用蛋白定量试剂盒配套缓冲液或PBS梯度稀释为0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/ml的标准系列溶液。

- 按照定量试剂盒操作说明,将标准溶液与检测试剂混合,反应后测定吸光度值,绘制标准曲线,用于未知样品的蛋白浓度计算。

 (2)ELISA实验封闭剂使用

- 封闭液配制:用PBS(pH7.2-7.4)或PBST(含0.05% Tween-20的PBS)溶解产品,制备1%-5%的BSA封闭液(常规浓度为3%),溶解后可通过0.45μm滤膜过滤除菌。

- 操作步骤:酶标板包被抗原后,弃去包被液,用PBST洗涤3次,每次3分钟;每孔加入200μl封闭液,37℃孵育1-2小时或4℃过夜;封闭结束后,弃去封闭液,PBST洗涤3次,即可进行后续抗原抗体结合反应。

 (3)Western Blot实验封闭与抗体稀释

- 封闭液配制:用TBST(含0.1% Tween-20的Tris-HCl缓冲液)溶解产品,制备3%-5%的封闭液。

- 封闭操作:转膜完成后,将膜放入封闭液中,室温摇床孵育1小时或4℃过夜,确保膜浸没;封闭后用TBST洗涤3次,每次5分钟。

- 抗体稀释:用含1% BSA的TBST将一抗、二抗稀释至推荐浓度(根据抗体说明书调整),稀释后的抗体溶液4℃可保存1-3天,避免反复冻融。

 (4)细胞培养添加剂使用

- 无血清培养基添加:用无菌水溶解产品后,通过0.22μm滤膜过滤除菌,按培养基体积的0.1%-1%比例加入培养基中,轻柔混合均匀。

- 常规培养基优化:在含血清培养基中添加0.1%-0.5%的BSA,可提高细胞贴壁率与存活率,尤其适用于原代细胞或干细胞培养。

- 使用时机:培养基配制完成后立即添加,避免培养基长时间放置后添加导致污染;添加后的培养基4℃可保存1周,建议现配现用。

 (5)PCR反应体系稳定使用

- 反应体系中加入终浓度为0.1-0.5mg/ml的BSA(根据引物、模板特性调整浓度)。

- 操作步骤:按照PCR反应体系配方依次加入缓冲液、dNTPs、引物、模板、Taq酶,最后加入稀释好的BSA溶液,轻柔混匀后进行PCR扩增。

- 适用场景:适用于模板中含有抑制物(如血红蛋白、多糖)的PCR反应,可提高扩增效率与特异性。

 (6)蛋白样品稳定剂使用

- 蛋白储存液添加:在蛋白样品溶液中加入终浓度为1-5mg/ml的BSA,轻柔混合均匀。

- 抗体储存:在抗体溶液中添加终浓度为2-5mg/ml的BSA,可延长抗体在4℃或-20℃条件下的保质期,维持其结合活性。

 5. 操作注意事项

- 全程严格遵循无菌操作规范,避免微生物污染,尤其是细胞培养和诊断试剂相关实验。

- 溶解与稀释过程中动作要轻柔,避免剧烈搅拌、震荡或反复吹打,防止蛋白变性失活。

- 避免在高温(超过37℃)或强光环境下长时间操作,溶解后的溶液需尽快使用或按要求储存。

- 不同实验对BSA浓度要求不同,使用时建议进行浓度梯度实验,确定使用浓度。

- 若实验体系中含有高浓度盐、洗涤剂或有机溶剂,需先优化体系条件,避免这些物质导致BSA沉淀。

 

七、常见问题与解决方案

 1. 产品溶解困难或出现结块

●问题描述

称取的冻干粉加入溶剂后,长时间不溶解或出现白色结块,难以分散。

●解决方案

- 检查溶剂是否合适,建议优先使用无菌水或低离子强度缓冲液(如PBS)溶解,避免直接使用高浓度盐溶液。

- 适当提高溶解温度,将容器置于20-37℃水浴中温和振荡10-15分钟,促进溶解,切勿高温煮沸。

- 若仍有结块,可将溶液通过无菌移液枪轻轻吹打结块部位,或用无菌滤网过滤去除不溶物(仅适用于对纯度要求不高的实验)。

- 预防措施:溶解前将产品平衡至室温,称取时避免产品吸潮,溶解时按推荐浓度操作,不要超过20mg/ml。

 2. 溶解后溶液出现浑浊或沉淀

●问题描述

产品溶解后溶液浑浊,或放置一段时间后出现白色沉淀。

●解决方案

- 检查溶剂pH值,BSA在pH4.5-8.5范围内溶解性合适,若pH值偏离此范围,需调整溶剂pH后重新溶解。

- 排查是否存在离子强度过高问题,高浓度盐会导致BSA盐析,需用低离子强度溶剂稀释后使用。

- 若沉淀为蛋白变性导致,需重新称取产品,严格按照溶解操作规范进行溶解,避免剧烈搅拌或高温。

- 储存不当也可能导致蛋白沉淀,确保产品储存于2-8℃环境,避免反复冻融。

 3. 免疫实验背景信号过高

●问题描述

ELISA或Western Blot实验中,空白对照或阴性对照出现高吸光度值或条带,影响结果判断。

●解决方案

- 检查BSA纯度,若使用过程中混入杂蛋白,可能导致非特异性结合,本产品纯度不低于99%,若出现此类问题,可更换新批次产品。

- 调整封闭液浓度,适当提高BSA浓度(如从3%提高至5%)或延长封闭时间(如4℃过夜封闭)。

- 优化洗涤步骤,增加洗涤次数(建议4-5次)或延长洗涤时间,确保去除未结合的封闭剂和抗体。

- 检查实验器具是否污染,酶标板或膜是否有破损,更换合格的实验材料。

 4. 细胞培养中细胞生长不良

●问题描述

添加BSA后,细胞出现贴壁率低、生长缓慢、形态异常甚至死亡。

●解决方案

- 检测BSA内毒素含量,内毒素过高会导致细胞毒性,本产品内毒素符合实验级标准,若怀疑污染,可进行内毒素检测或更换批次。

- 调整BSA添加浓度,浓度过高可能导致渗透压异常,建议降低浓度至0.1%-0.5%,并重新配制培养基。

- 检查培养基是否存在其他污染,或BSA与培养基成分是否兼容,可单独配制含BSA的基础培养基进行细胞培养测试。

- 确保BSA溶解后已过滤除菌,未除菌的BSA可能引入微生物污染,导致细胞死亡。

 5. 蛋白定量结果偏差较大

●问题描述

以BSA为标准品绘制的标准曲线线性不佳,或未知样品定量结果与预期偏差较大。

●解决方案

- 检查标准品稀释是否准确,确保梯度稀释过程中操作规范,避免稀释误差。

- 确认检测试剂与BSA的兼容性,不同定量方法(如Bradford法、Lowry法)对BSA的响应不同,需选择匹配的检测试剂盒。

- 避免标准品溶液长时间放置,稀释后的标准系列溶液需在1小时内完成检测,防止BSA降解或构象变化。

- 检查实验仪器(如酶标仪)是否校准,确保吸光度测定准确。

 6. 储存后产品性能下降

●问题描述

产品储存一段时间后,用于实验时效果不佳(如封闭效果变差、蛋白稳定性下降)。

●解决方案

- 检查储存条件是否符合要求,确保产品始终储存在2-8℃阴凉干燥环境,避免阳光直射、高温或潮湿。

- 若产品已开封,需尽快使用,开封后可分装为小剂量,密封后置于-20℃冷冻储存,减少反复开盖吸潮。

- 溶解后的产品若反复冻融,会导致蛋白活性下降,需严格按照储存要求分装保存,避免反复冻融。

- 若产品已过保质期,建议更换新批次产品,确保实验效果。

 7. PCR反应中扩增效率低

●问题描述

添加BSA后,PCR扩增产物量少或无扩增产物,与未添加时差异不大。

●解决方案

- 调整BSA终浓度,建议尝试0.1-0.5mg/ml的浓度梯度,找到合适浓度,浓度过高可能抑制酶活性。

- 检查BSA是否含有DNase污染,本产品无DNase污染,若怀疑污染,可进行酶活性检测或更换产品。

- 优化PCR反应条件,如退火温度、引物浓度等,BSA仅能辅助稳定酶活性,无法解决其他实验条件导致的扩增效率问题。


免责声明

• 本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理,仅个人观点,具体以品牌信息文档为准。


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