冰岛Prokazyme特约代理经销商

▎前言

上海起发实验试剂有限公司作为Prokazyme特约代理经销商，面向国内实验室提供Cel136、Rham142、Rham143等耐热酶产品资料与采购对接。品牌商标Prokazyme专注新型酶研发，覆盖多糖与核酸研究场景，由起发协助完成选型、报价与售后资料传递。

▎一、公司介绍

① 业务定位  

Prokazyme从事新型酶产品的研究、诊断与工业检测用途供应，产品方向包括多糖水解酶、核酸操作酶以及来源于环境DNA、嗜热微生物的特异性酶制剂。品牌依托地热微生物资源、不良环境微生物基因组数据与酶学筛选体系，建立酶发现、活性评价、工艺放大与标准化包装流程。

② 技术路径  

品牌关注嗜热细菌、噬菌体及环境宏基因组来源酶种，通过基因序列分析、蛋白表达、纯化与冻干工艺，形成可重复提供的酶产品。研发合作覆盖学术机构、检测方法与工业用户，产品以研究用试剂形式通过线上目录与代理渠道分发。

③ 产品分类  

主要产品包括β-葡聚糖酶、鼠李糖苷酶、α-L-鼠李糖苷酶、α-L-岩藻糖苷酶、β-半乳糖苷酶、多核苷酸激酶、DNA连接酶及其他特色酶。按照底物类型可分为多糖降解酶、糖苷水解酶、核酸修饰酶；按照使用温度可分为常温稳定酶与嗜热稳定酶。

④ 质量与使用边界  

产品说明书列明酶学编号、底物范围、单位定义、标准assay条件、储存方式与复溶建议。部分产品仅限实验室研究使用，不用于临床诊断、治疗或食品直接添加。用户应以随货COA、产品sheet及代理提供的技术资料作为验收与操作依据。

▎二、热门产品介绍

〖1〗Cel136｜Pustulanase／β-1,6-内切葡聚糖酶／β-glucanase

① 基本货号与品名  

货号：Cel136  

品名：Pustulanase（beta-glucanase）from environmental DNA  

可选规格：Cel136为100 units；Cel136L为500 units。  

酶学编号：EC 3.2.1.75。  

来源属性：环境DNA来源的嗜热稳定β-1,6-内切葡聚糖酶。

② 产品特点  

◇ 对含β-1,6连接的pustulan具有水解能力，可用于酵母β-葡聚糖相关酶法检测。  

◇ 对混合连接β-葡聚糖中的β-1,6键具有作用，适用于laminarin、酵母β-葡聚糖等底物研究。  

◇ 标准assay温度约80℃，pH约5.5，热稳定性较好，适合建立高温酶解流程。  

◇ 冻干形态提供，便于运输与短期实验室管理。  

◇ 可作为面包酵母β-葡聚糖标准检测方法的组件之一，相关方案见USP Food Chemicals Index第7版第3补充册对Baker’s yeast β-glucan的记载。

③ 存储条件  

产品为冻干状态。Prokazyme接收与自备库存环节按冷冻状态管理；用户收到后按1–4℃避光保存，在此条件下有效期按说明书通常按12个月管理。避免反复暴露于高温、高湿与强光环境。若COA另有批号特定要求，以COA为准。

④ 工作原理  

Cel136催化β-1,6糖苷键内切水解，将pustulan及含β-1,6葡萄糖连接的多糖降解为低聚葡聚糖与还原糖。其不作用于β-1,3或β-1,4主导底物，因而可在混合葡聚糖体系中用于β-1,6连接片段释放与定量。单位定义：1 U指在标准条件下每分钟释放1 μmol还原糖的酶量。

⑤ 标准活性测定  

◇ 底物：1% w/v pustulan。  

◇ 缓冲液：0.1 M sodium phosphate buffer，pH 5.5。  

◇ 温度：80℃，孵育10分钟。  

◇ 检测：DNS法测定释放还原糖，以葡萄糖作标准曲线。  

◇ 结果表达：按还原糖生成量折算U数。

⑥ 实验使用方法  

1）确认样品类型：酵母细胞壁提取物、食品多糖粗提物、laminarin混合底物或其他含β-1,6葡聚糖样品。  

2）按COA复溶冻干粉，建议先用少量规定缓冲液轻柔溶解，避免剧烈振荡产生泡沫。  

3）配制0.1 M磷酸钠缓冲液pH 5.5，预热至80℃。  

4）将底物与缓冲液混合，加入适量Cel136工作液，使反应体积与酶量匹配预实验设计。  

5）80℃孵育设定时间，常用初筛可取10分钟。  

6）采用DNS终止并显色，或按实验目的采用HPLC、TLC、还原糖终点法分析。  

7）设空白对照、底物对照与标准糖对照，计算β-1,6葡聚糖水解率。  

8）剩余酶液按1–4℃短期保存，长期按COA建议管理，避免冻融循环。

〖2〗Rham142｜Naringinase／α-L-Rhamnosidase A／柚皮苷酶

① 基本货号与品名  

货号：Rham142  

品名：Naringinase（Rhamnosidase A）from Thermomicrobia sp.  

可选规格：常用100 units包装。  

酶学属性：α-L-鼠李糖苷酶，可归入糖苷水解酶体系。

② 产品特点  

◇ 对naringin具有较高水解活性，对hesperidin、rutin等含鼠李糖糖苷底物亦可开展研究。  

◇ 来源于Thermomicrobia sp.，具有一定热稳定特征，适合柑橘类黄酮脱苦、糖苷结构改造与标准品制备。  

◇ 可切断末端非还原α-L-鼠李糖与aglycone之间的连接，用于黄酮苷向黄酮苷元或次级糖苷转化。  

◇ 提供冻干酶制剂，配合pNP-rhamnopyranoside底物可建立比色活性检测。  

◇ 适用于植物提取物、果汁酶法修饰、天然产物结构解析等研究。

③ 存储条件  

冻干产品收到后按产品COA与说明书管理；短期实验使用可置于1–4℃避光，长期保存温度、有效期以对应批号COA为准。避免室温长期放置，避免与强酸、强碱及蛋白变性剂共同存放。复溶后若一次未用完，应按COA建议分装，减少反复冻融。

④ 工作原理  

Rham142催化α-L-鼠李糖苷末端非还原鼠李糖残基水解，反应可表示为鼠李糖苷＋水→鼠李糖＋aglycone。对naringin而言，可去除末端鼠李糖，改变黄酮糖苷极性、苦感与色谱行为；对hesperidin、rutin可依据底物可及性产生相应去鼠李糖产物。单位定义：1 U指在标准条件下每分钟释放1 μmol p-nitro-phenyl-α-L-rhamnopyranoside（pnpR）的酶量。

⑤ 标准活性测定  

◇ 缓冲液：100 mM KPO4，pH 7.5。  

◇ 底物：pnpR，终浓度2.0 mM。  

◇ 温度：按COA常用室温或控温条件进行；Rham142资料常规assay可设10分钟孵育。  

◇ 检测：测定pNP释放量，于相应碱性终止体系下读取吸收值，绘制pNP标准曲线折算U数。

⑥ 实验使用方法  

1）明确目标底物：naringin、hesperidin、rutin或自定义柑橘糖苷粗提物。  

2）按COA用适宜缓冲液复溶冻干酶，初始可用pH 7.0–7.5磷酸盐缓冲液做预实验。  

3）配制底物溶液，naringin等难溶黄酮苷可先以少量有机溶剂助溶，再调整至工艺允许有机相比例。  

4）将酶工作液与底物混合，设定温度与时间梯度；柑橘脱苦研究可先做50℃、60℃、70℃对比。  

5）到点取反应液，沸水浴或加终止液停止反应，离心取上清。  

6）采用HPLC检测naringin、prunin、naringenin等变化，或以pNP-rhamnoside平行测定残余酶活。  

7）根据转化率调整酶用量；若用于制备级水解，建议分批加酶并监测底物消耗。  

8）未使用酶液按COA存储，记录批号、复溶时间与分装次数。

〖3〗Rham143｜Hesperidinase／α-L-Rhamnosidase B／橙皮苷酶

① 基本货号与品名  

货号：Rham143  

品名：Hesperidinase（Rhamnosidase B）from Thermomicrobia sp.  

可选规格：常用100 units包装。  

酶学属性：热稳定α-L-鼠李糖苷酶，面向hesperidin、naringin、rutin等底物开展去鼠李糖研究。

② 产品特点  

◇ 催化末端L(+)-rhamnose与含鼠李糖苷aglycone之间键断裂，可用于柑橘黄酮、植物糖苷改造。  

◇ 对hesperidin具有研究适用性，可配合naringin、rutin构建多种黄酮苷去糖基模型。  

◇ 来源于Thermomicrobia sp.，可依据实验设计考察中高温条件下的催化稳定性。  

◇ 冻干提供，便于按单位数配置工作液。  

◇ 适用于植物化学、食品酶工程、天然产物结构验证与教学示范。

③ 存储条件  

冻干制剂收到后按COA与产品sheet管理；实验室短期操作可1–4℃避光存放，长期温区与有效期以批号COA为准。复溶后避免多次冻融；若进行多日实验，建议按单次用量分装并标注复溶日期。

④ 工作原理  

Rham143通过α-L-鼠李糖苷酶活性水解末端非还原α-L-鼠李糖残基。以hesperidin为例，可切除鼠李糖形成去鼠李糖次级糖苷，进一步结合其他糖苷酶可继续改造橙皮素类结构。该过程不改变aglycone主体骨架，主要降低鼠李糖取代度，从而影响溶解度、色谱保留与酶解产物分布。单位定义：1 U指每分钟释放1 μmol p-nitro-phenyl-α-L-rhamnopyranoside（pnpR）的酶量。

⑤ 标准活性测定  

◇ 缓冲液：100 mM KPO4，pH 7.5。  

◇ 底物：pnpR，终浓度2.0 mM。  

◇ 孵育：常规10分钟。  

◇ 检测：测定pNP释放量，用pNP标准曲线计算单位数。  

◇ 底物拓展：可分别以hesperidin、naringin、rutin做特异性验证，比较不同底物转化率。

⑥ 实验使用方法  

1）根据目标产物选择底物：若以降低橙皮苷苦感、提高橙皮素溶出为主，以hesperidin为核心；若做广谱鼠李糖去除，增设naringin、rutin对照。  

2）按COA复溶Rham143，用pH 7.0–7.5磷酸盐缓冲液配制母液。  

3）将hesperidin用适宜助溶剂分散，控制有机相比例，避免影响酶构象。  

4）设置酶量梯度，如每毫升反应体系0.1 U、0.5 U、1 U、2 U；设置温度梯度50℃、60℃、70℃。  

5）恒温孵育，按0.5 h、1 h、2 h、4 h取样，终止后离心取上清。  

6）HPLC或LC-MS检测hesperidin、去鼠李糖产物及可能的橙皮素衍生物；用标准品定性定量。  

7）若转化率不足，可补加酶或延长时间，并评估底物沉淀与产物抑制。  

8）剩余工作液按COA存储，整批实验保留COA、色谱条件与酶量记录。

▎三、解决实验中哪些问题

① 酵母β-葡聚糖含量测定不稳定  

Cel136针对β-1,6连接水解，可减少非特异多糖干扰。配合pustulan标准底物与DNS或色谱检测，可建立酵母细胞壁、膳食补充剂粗提物中β-1,6葡聚糖释放量的重复测定流程。

② 柑橘汁苦感物质酶法去除研究困难  

Rham142对naringin活性较强，Rham143可补充hesperidin方向。两者分别或组合使用，可建立柚皮苷、橙皮苷去鼠李糖模型，用于果汁脱苦、黄酮改性及产物比例优化。

③ 植物黄酮苷结构鉴定缺少定向去糖基工具  

对rutin、naringin、hesperidin等鼠李糖取代黄酮，使用Rham142或Rham143可定向切除末端鼠李糖，获得次级苷或苷元参照物，辅助NMR、MS结构归属。

④ 高温酶解体系蛋白失活快  

Prokazyme多款酶来源于嗜热或环境DNA筛选，Cel136标准assay可达80℃，Rham系列可按COA考察中高温稳定性，减少常温酶在高温工艺中活性下降带来的数据偏差。

⑤ 多糖混合底物特异性不足  

Cel136侧重β-1,6，不按β-1,3、β-1,4主导底物设计主活性，可在混合葡聚糖中作选择性水解工具；配合其他专用酶可拆分复杂多糖连接类型。

⑥ 核酸酶研究中缺乏耐热修饰酶选项  

品牌核酸类产品含多核苷酸激酶、连接酶等，可配合耐热流程减少反复补酶。具体货号、单位定义与污染检测以对应产品COA为准。

▎四、购买产品常见疑问与解答

1）问：如何确认买到的是Prokazyme原厂产品？  

答：通过上海起发实验试剂有限公司特约代理渠道询价后，到货应核对品名、货号、批号、单位数、冻干外观与COA。COA会列明酶学信息、标准assay、储存建议与限定用途；如有差异，保留外包装并联系起发技术对接。

2）问：冻干酶收到后马上用不完，怎么保存？  

答：Cel136按接收后1–4℃避光、通常12个月有效期管理；Rham142、Rham143及其他冻干酶以COA标注温区与期限为据。未复溶前不随意常温放置；复溶后按COA分装，减少冻融。

3）问：单位数与实际实验不匹配怎么办？  

答：先按标准assay条件做预实验。Cel136以还原糖释放折U，Rham142/Rham143以pnpR释放折U。若底物为天然粗提物，因纯度、粒径、助溶剂与抑制物不同，实际所需酶量可能高于标准底物，应通过底物浓度、温度、时间三因素梯度确定。

4）问：可以做食品中直接添加吗？  

答：所介绍研究用酶产品按实验室试剂管理，是否可用于食品加工、补充剂生产或商业化工艺，需要另行确认当地法规、GRAS/EFSA等准入与工厂合规要求。采购时如仅用于研究，应按研究试剂验收。

5）问：不同底物转化率差异大正常吗？  

答：正常。鼠李糖苷酶对naringin、hesperidin、rutin的Km、Vmax、可及性不同；β-葡聚糖酶对pustulan、laminarin、酵母β-glucan也有差异。建议每个新底物做初筛曲线，不以单一标准底物活性直接推算所有底物用量。

6）问：复溶用什么缓冲液？  

答：Cel136标准assay用0.1 M sodium phosphate pH 5.5；Rham142/Rham143标准assay用100 mM KPO4 pH 7.5。实际工艺若改变pH、盐型、有机相比例，应先做酶活回收率与稳定性验证。

7）问：高温实验会不会破坏底物其他成分？  

答：会。80℃酶解可提升Cel136效率，但样品中热敏多糖、蛋白、小分子可能同时变化。应设无酶热处理对照、无热处理酶解对照，分离温度效应与酶效应。

8）问：产品能否用于临床诊断？  

答：所介绍Cel136、Rham142、Rham143等按研究试剂资料提供，是否用于体外诊断、医院检验或临床样本处理，应以产品限定声明、注册证及当地监管分类为准。无相应诊断注册信息时，不按诊断试剂使用。

9）问：活性下降如何排查？  

答：依次检查：COA有效期与到货存储温度、复溶缓冲液pH与纯度、底物是否失效、反应温度是否偏离标准、是否存在金属离子或酶抑制剂、取样与终止方法是否一致。保留对照管可快速定位问题。

10）问：大包装与小包装怎么选？  

答：方法开发阶段可选100 units小包装做标准曲线；建立例行检测后可按每月样品量、单位消耗与保存期限选大包装。冻干酶应避免因便宜采购大包装而导致长期不用、超期或反复复溶。

11）问：上海起发实验试剂有限公司提供哪些代理服务？  

答：作为Prokazyme特约代理经销商，起发可提供产品目录对接、货号与规格确认、COA及说明书资料传递、报价交期沟通、到货验收建议与售后技术问题转原厂支持，不替代原厂对产品技术参数的最终解释。

12）问：出口、进口、冷链与票据如何确认？  

答：具体跨境运输方式、冷链要求、报关文件与结算票据，按下单时起发提供的订单确认信息执行；不同货号、不同单位数可能影响交期与运输方案，应以书面订单与COA要求为准。

▎五、适用实验方向归纳

◇ 酵母β-葡聚糖、真菌β-葡聚糖酶法释放与含量研究：Cel136。  

◇ 面包酵母、膳食多糖补充剂中β-1,6连接片段分析：Cel136配合还原糖或色谱检测。  

◇ 柑橘类果汁脱苦与黄酮改性：Rham142、Rham143单独或比较使用。  

◇ 植物次生代谢糖苷去鼠李糖：naringin、hesperidin、rutin标准底物体系。  

◇ 耐热酶工艺开发：以标准assay温度为基础做放大参数验证。  

◇ 教学与标准品制备：小包装冻干酶配合pNP底物建立比色实验。

▎六、采购与资料获取建议

① 先明确实验目的：含量测定、结构改造、工艺放大或教学演示，目的不同所选货号、单位数与复溶方案不同。  

② 提供底物名称、来源、预估样品数、目标温度与检测方式，由代理对照Prokazyme产品sheet推荐Cel136、Rham142、Rham143或其他货号。  

③ 下单前索取COA模板、说明书、运输温度建议与有效期信息。  

④ 到货后按COA验收，建立冻干酶台账，记录批号、复溶日期、分装管数与实验项目。  

⑤ 若出现标准曲线异常、底物不溶或转化率偏低，保留反应原始数据，由起发转原厂技术资料支持。

关键词：Prokazyme耐热酶、β葡聚糖酶Cel136、鼠李糖苷酶Rham142、橙皮苷酶Rham143、酵母β葡聚糖检测、pustulanase标准assay、naringinase脱苦、hesperidinase黄酮改性、环境DNA酶制剂、嗜热微生物酶、上海起发Prokazyme代理、冻干酶COA验收、实验室糖苷水解、多糖连接类型分析、还原糖DNS法、pNP鼠李糖苷活性测定、柑橘果汁酶法脱苦、植物黄酮去糖基、研究用酶试剂采购、耐热酶工艺开发。

更多产品信息，请联系中国区域代理商：上海起发实验试剂有限公司

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

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