7TM Antibodies磷酸化状态特异性抗体工具与特约代理经销商介绍

▍前言

德国7TM Antibodies现由上海起发实验试剂有限公司作为特约代理经销商，面向国内科研用户提供产品咨询、订货协调与资料对接服务。

01　品牌与公司介绍

7TM Antibodies是一家专注于七次跨膜受体（7TM receptor）研究工具开发的生物试剂品牌，核心方向为G蛋白偶联受体（GPCR）相关抗体。

GPCR是一类参与细胞信号接收与传递的膜蛋白受体，涉及代谢调节、神经传导、免疫响应、内分泌调控等多个生理过程。由于受体在组织中表达量通常较低，且构象与翻译后修饰状态复杂，常规抗体在固定组织检测、磷酸化状态区分、低丰度受体识别中存在一定限制。

7TM Antibodies围绕这一研究需求，建立以受体羧基末端tail表位为基础的抗体系列，提供：

• 非磷酸化状态受体抗体  

• 磷酸化位点特异性抗体  

• 免疫组化级（IHC-grade）受体抗体  

• 磷酸化谱分析相关试剂与服务  

品牌在受体命名上参考IUPHAR GPCR命名规范，产品以“一个靶标一种充分验证抗体"的思路组织，减少科研人员在多个克隆之间反复筛选的时间成本。

产品主要覆盖：

• 孤儿受体  

• 趋化因子受体  

• 补体受体  

• 血管紧张素受体  

• 生长抑素受体  

• 多巴胺受体  

• 代谢相关GPCR  

• 其他药物研究常用跨膜受体靶标  

抗体在上市前通常经过转染细胞验证、天然组织验证、Western blot与免疫组化验证；在种属兼容性允许的情况下，部分产品进一步使用基因敲除模型进行特异性确认。

02　热门产品介绍

02-01　GPR61非磷酸化受体抗体

〖产品品名〗GPR61 (non-phospho), G Protein-coupled Receptor 61 Antibody

〖产品货号〗7TM0110N

〖规格与宿主〗100 µl，兔源多克隆抗体，IgG类

〖靶标说明〗 GPR61属于孤儿G蛋白偶联受体，参与神经系统相关信号研究。该抗体针对人源GPR61羧基末端远端区域设计，可识别总GPR61受体，不依赖磷酸化状态。

〖产品特点〗  

• 针对非磷酸化受体表位设计  

• 可用于总受体水平检测  

• 经转染细胞验证  

• 适合低表达膜蛋白的识别与富集  

• 液体形式，抗原亲和纯化

〖存储条件〗  

• 短期保存：2–8℃避光  

• 长期保存：-20℃，避免稀释后冻存  

• 保存缓冲液：Dulbecco’s PBS，pH 7.4，含150 mM NaCl、0.02%叠氮钠  

• 避免反复冻融

〖工作原理〗  

抗体通过兔免疫合成肽获得，识别GPR61羧基端特定线性表位。由于表位不依赖磷酸化修饰，可在受体不同激活状态下稳定识别总蛋白，适用于受体表达分布与总量比较。

〖使用方法〗  

1. 蛋白样本制备  

   收集细胞或组织，使用含去污剂的裂解液提取膜蛋白，必要时通过WGA beads富集糖蛋白。

2. Western blot使用  

   • 建议稀释比例：1:1000  

   • 上样前煮沸或按常规变性条件处理  

   • 使用阳性转染细胞系作为对照

3. 免疫组化使用  

   • 石蜡切片脱蜡、柠檬酸修复  

   • 建议稀释比例：1:100  

   • 二抗推荐使用抗兔IgG检测系统

4. 受体富集  

   可用于组织裂解液中GPR61受体的免疫沉淀与富集，实验需设置空白与肽段竞争对照。

02-02　CCR7免疫组化级受体抗体

〖产品品名〗CCR7 (IHC-grade), CC Chemokine Receptor 7 Antibody

〖产品货号〗7TM0064N-IC

〖规格与宿主〗100 µl，兔源多克隆抗体，IgG类

〖靶标说明〗CCR7为CC趋化因子受体7，参与淋巴细胞迁移、次级淋巴组织定位及免疫应答研究。该抗体针对人源CCR7羧基末端设计，可用于总受体检测。

〖产品特点〗  

• 免疫组化级验证  

• 适用于石蜡包埋组织定位  

• 不依赖磷酸化状态  

• 可检测培养细胞与组织切片  

• 适用于受体膜定位观察

〖存储条件〗  

• 短期保存：4℃  

• 长期保存：-20℃  

• 液体形式，未稀释保存  

• 避免反复冻融导致蛋白活性下降

〖工作原理〗  

抗体识别CCR7羧基端合成肽对应表位，与受体磷酸化状态无关。在免疫组化中，抗体结合细胞膜区域的CCR7受体，通过酶底物显色反映受体在组织中的分布位置。

〖使用方法〗  

1. 切片处理  

   石蜡切片常规脱蜡，柠檬酸缓冲液微波抗原修复。

2. 抗体孵育  

   • IHC建议稀释：1:100  

   • WB建议稀释：1:1000  

   • 一抗4℃或过夜孵育

3. 检测系统  

   使用生物素化抗兔二抗及亲和素-生物素复合物，DAB或AEC显色。

4. 结果判读  

   观察细胞膜着色情况，建议同步设置阴性组织、阳性组织及肽段竞争对照。

02-03　GPR84免疫组化级受体抗体

〖产品品名〗GPR84 (IHC-grade), G Protein-Coupled Receptor 84 Antibody

〖产品货号〗 7TM0120N-IC

〖规格与宿主〗100 µl，兔源多克隆抗体，IgG类

〖靶标说明〗GPR84为G蛋白偶联受体84，参与免疫细胞功能、炎症反应及受体偏向性配体研究。该抗体针对人源GPR84羧基末端设计，用于总受体检测。

〖产品特点〗  

• IHC-grade级别验证  

• 适用于WB与免疫组化  

• 可检测细胞与组织中的受体分布  

• 抗原亲和纯化  

• 适合炎症与免疫相关研究

〖存储条件〗  

• 短期：4℃避光  

• 长期：-20℃  

• 保存缓冲液：Dulbecco’s PBS，pH 7.4，含150 mM NaCl、0.02%叠氮钠  

• 原液分装使用，减少冻融次数

〖工作原理〗  

抗体以GPR84羧基端合成肽为免疫原，识别非磷酸化状态受体。其作用不依赖于受体活化后的修饰变化，因此更适合观察受体在组织和细胞中的基础表达与空间定位。

〖使用方法〗  

1. Western blot流程  

   • 细胞或组织裂解后富集膜蛋白  

   • 一抗稀释比例：1:1000  

   • 建议使用稳定表达GPR84的细胞作为阳性对照

2. 免疫组化流程  

   • 福尔马林固定、石蜡包埋切片  

   • 抗原修复后一抗稀释1:100  

   • 二抗显色后复染观察

3. 实验设计建议  

   可结合磷酸化特异性抗体，分别分析受体总量与修饰状态，用于配体刺激前后动态比较。

03　品牌业务可支持的实验场景

03-1　GPCR总受体表达检测

非磷酸化抗体可用于检测受体在细胞系、原代细胞、动物组织中的基础表达水平，适合WB定量与表达谱比较。

03-2　固定组织中的受体定位

IHC-grade抗体可用于石蜡切片中的膜受体定位，帮助判断受体在肝、脾、淋巴结、肠道、脑等不同组织中的分布特征。

03-3　磷酸化状态分析

磷酸化位点特异性抗体可区分受体在配体刺激前后的修饰变化，适用于：

• 受体激活研究  

• GRK磷酸化分析  

• 偏向性信号研究  

• 激动剂与拮抗剂筛选  

03-4　受体富集与免疫沉淀

部分非磷酸化抗体可用于从复杂裂解液中富集低丰度跨膜受体，辅助质谱分析或后续蛋白鉴定。

03-5　药物靶点验证

在药物发现阶段，可配合细胞模型验证靶标表达、受体修饰及信号响应，为候选分子机制研究提供检测工具。

04　实验中常见可解决的问题

04-1　GPCR在WB中信号弱

7TM抗体针对受体羧基端表位设计，并结合抗原亲和纯化流程，可降低非特异性背景，提高低丰度膜蛋白检测稳定性。

04-2　固定组织难以识别受体

IHC-grade系列经过石蜡切片验证，适用于福尔马林固定样本中的膜受体定位。

04-3　无法区分受体总量与激活状态

可使用非磷酸化抗体检测总受体，再配合磷酸化位点抗体分析修饰变化，形成“总量＋状态"的双层数据。

04-4　抗体特异性存疑

部分产品提供转染细胞、天然组织及基因敲除验证数据，便于实验人员设计阴性、阳性与竞争对照。

04-5　多克隆抗体重复性不稳定

产品采用抗原亲和纯化，并提供免疫原区域、适用稀释比例与验证图像，便于实验条件优化。

05　采购与使用时常见疑问

Q1：7TM Antibodies抗体适合哪些实验？  

主要适合Western blot、免疫组化、免疫细胞化学及受体富集实验；具体应用以对应货号说明书为准。

Q2：非磷酸化抗体与磷酸化抗体有什么区别？  

非磷酸化抗体识别受体总量，不依赖修饰状态；磷酸化抗体识别特定位点修饰，适合分析受体激活过程。

Q3：产品是否适用于小鼠或大鼠样本？  

部分产品仅识别人源表位，部分产品具备跨种属反应性。选购时应查看说明书中的Species Reactivity字段。

Q4：抗体收到后如何分装？  

建议按单次使用量分装，原液保存于-20℃，避免反复冻融；不要自行加入甘油或其他保护剂，除非说明书明确允许。

Q5：WB中条带位置与预期不符怎么办？  

可检查样本类型、上样量、转移效率、封闭条件及一抗稀释比例，并设置空载体或野生型/敲除对照。

Q6：IHC没有信号如何处理？  

优先检查抗原修复方式、切片保存时间、一抗孵育时长与二抗检测系统。可先使用阳性组织确认抗体活性。

Q7：能否用于流式细胞术？  

部分受体抗体可用于固定 permeabilization后的细胞内或表面检测，但不是全部产品默认验证应用，需以具体货号数据为准。

Q8：如何选择合适的货号？  

先确认靶标名称、物种、实验类型与是否需要磷酸化状态区分；再匹配non-phospho、phospho-specific或IHC-grade系列。

Q9：产品是否可用于临床诊断？  

不可以。7TM Antibodies产品标注为科研用途，不用于体外诊断或治疗目的。

Q10：如何确认产品资料与批次信息？  

每支产品对应技术数据表、WB/IHC protocol及安全资料，可通过上海起发实验试剂有限公司进行资料对接。

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更多产品信息，请联系中国区域代理商：上海起发实验试剂有限公司

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

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