​Cytodelics AB全血样本稳定试剂与货号指南

Cytodelics AB（简称 Cytodelics）是一家围绕全血样本稳定与前处理布局产品线的生物技术企业，核心品类覆盖细胞稳定剂、全血固定裂解试剂盒与全血刺激缓冲液。本文以真实货号为线索，说明三款常用试剂的储存条件与操作步骤，并针对中性粒细胞丢失、红细胞裂解不够、跨中心运输导致表型漂移等具体实验问题给出可执行路径。

一、Cytodelics AB 的业务范围与产品线构成

1、业务方向

Cytodelics AB 是一家以全血样本稳定与前处理为核心布局产品线的生物技术企业，简称 Cytodelics。其业务覆盖采血端的细胞稳定、样本运输冻存、固定裂解与染色前处理。产品设计围绕一个现实约束展开：血液离开人体后，细胞状态会随时间快速改变。

2、产品线构成

目前，产品线包含全血刺激缓冲液（WB-STIM）、全血细胞稳定剂（WBCS）、全血固定裂解试剂盒（WBFL）、CRYO#20 冻存缓冲液、PBMC 固定试剂盒与干态保存缓冲液六类。前三类构成全血从采集到上机的主干流程，其余三类分别对应纯化细胞固定、固定细胞冻存与干态运输的延伸场景。

3、文件与标签体系

每批试剂在瓶身标注批号、有效期与储存温度，配套提供技术数据表、安全数据表与现行版操作协议。标签上的科研用途声明界定了使用边界，采购与使用时应以瓶身信息与现行版说明书为准。

4、与授权代理商的分工

中国区域由上海起发实验试剂有限公司承担授权代理，负责产品引进、订单与货期对接、中文技术资料传递以及本地备货协调。代理商不改变产品的原始规格与批号体系，实验口径仍以品牌方发布的协议文件为准。

5、贯穿流程的组合思路

单一支试剂只能解决一个环节，实际项目往往需要组合使用：现场完成全血样本稳定后冻存运输，到实验室再做固定裂解。功能性实验则先在刺激缓冲液中培养，再进入固定流程，模块化组合让采样点与检测点可以分开设置。

二、热门产品介绍

1、WBFL002-1000｜全血固定裂解试剂盒（Whole Blood Fix/Lyse Kit，Gen.2，100 mL）

①、品名与货号。该产品主货号为 WBFL002-1000，规格 100 mL，套装内含 Fix-concentrate 500 mL、Fix-diluent 500 mL、LYSIS buffer（4 倍浓缩）1000 mL、WASH buffer（5 倍浓缩）900 mL 两支以及 CRYO#20 55 mL。同系列还有 WBFL002-500（50 mL）与 WBFL002-200（20 mL）两种规格，可按样本量选择。

②、产品特点。一组试剂内完成固定与红细胞裂解，固定条件温和，可保留细胞活化状态与蛋白磷酸化水平。处理后白细胞群体保留较完整，中性粒细胞不因离心与裂解步骤大量丢失。固定后的样品可直接上机，也可经 CRYO#20 冻存后再染色。

③、存储条件。Fix-concentrate 需 5-8℃ 保存，Fix-diluent、LYSIS buffer、WASH buffer 与 CRYO#20 可室温存放。各组分瓶身均标注批号与有效期，开封后应按协议要求在规定期限内使用。

④、工作原理。Fix-concentrate 与 Fix-diluent 等体积混合配成 1 倍固定液，通过交联作用固定蛋白构象，使信号通路状态在采样瞬间被锁定。LYSIS buffer 破坏无核红细胞膜结构，WASH buffer 则稀释并带走血红蛋白与细胞碎片，为后续抗体染色留出干净的细胞悬液。

⑤、使用方法。固定液用量为血样体积的 10 倍，室温作用 15 分钟；1 倍 LYSIS buffer 用量为血样体积的 40 倍，室温 15-20 分钟至红细胞裂解充分；1 倍 WASH buffer 同样按 40 倍体积洗两次，每次 5 分钟，离心条件 300 g、5-10 分钟，吸去上清而不要倾倒。

⑥、适用检测场景。适用于流式细胞术的表面与胞内染色、磷酸化流式、质谱流式的单细胞蛋白分析。也适用于全血直接处理与稳定后处理并行的项目。

2、hWBCS002-100｜全血细胞稳定剂（人源，100 mL）

①、品名与货号。瓶装人源全血细胞稳定剂货号为 hWBCS002-100，规格 100 mL；预分装冻存管从 hWBCS001-T001 到 hWBCS001-T020，对应 100-2000 µL 十档体积，带条形码的版本在货号末尾加 L。鼠源同类产品货号为 mWBCS002-100。

②、产品特点。单一组分、一步混合，不需要控速降温装置，混合后可直接放入 -80℃ 冰箱。稳定剂处于全血样本稳定流程的起始环节，在冻存过程中维持细胞蛋白表型，白细胞群体保留较完整，适合现场采样与长周期随访。

③、存储条件。瓶装试剂与预分装管均建议 5-8℃ 冷藏，预分装管在此条件下可存放 2 年；室温 20-25℃ 条件可维持 12 周。运输使用冰袋，空运时保持管体直立，全程温度低于 25℃。

④、工作原理。稳定剂与全血等体积混合后迅速进入细胞，抑制离体后蛋白降解与磷酸化修饰的漂移，使细胞在冻存与复苏过程中保持采集时刻的蛋白状态。它与固定裂解试剂盒配套使用，先稳定后固定，两步各司其职。

⑤、使用方法。取预分装管恢复至室温约 5-10 分钟，加入等体积全血，翻转 10-15 次混匀，不可涡旋。室温静置 10 分钟后置 -80℃ 或干冰转运；-20℃ 仅作不超过 3 周的短期过渡。复苏时 37℃ 快速解冻约 1 分钟，随即转入固定液。

⑥、适用检测场景。适用于门诊、ICU、手术室等无法现场处理的采血点，多中心研究的样本集中运输，以及生物样本库的长期留存。稳定后的样本配合固定裂解试剂盒，可完成流式与质谱流式的免疫表型分析。

3、WBST001-100｜全血刺激缓冲液（WB-STIM，100 mL）

①、品名与货号。全血刺激缓冲液货号为 WBST001-100，规格 100 mL，另有 WBST001-500、WBST001-50 与 WBST001-20 三种规格。该缓冲液可按实验设计预先加入细胞因子或微生物成分。

②、产品特点。配方针对全血环境设计，能补充离体血液在培养中快速消耗的营养物质，维持接近生理的培养条件。全血在其中的刺激时间可超过 24 小时，已有实验将培养延长至 7 天。

③、存储条件。缓冲液需 5-8℃ 保存，有效期短于其他几类试剂，具体以瓶身标注为准。开封后应避免反复升温降温，剩余体积按无菌操作分装。

④、工作原理。全血在体外培养时，白细胞会迅速耗尽血浆中的营养底物，导致细胞死亡与表型漂移。该缓冲液补充营养并稳定渗透压与离子环境，使刺激后的信号响应更接近体内真实反应。

⑤、使用方法。采血建议使用肝素管，EDTA 与枸橼酸可能干扰细胞信号。将刺激物加入缓冲液后接入全血，37℃ 培养至设定时点，随后用固定裂解试剂盒固定，或用细胞稳定剂冻存。

⑥、适用检测场景。适用于全血刺激试验、先天免疫应答评估、细胞因子诱导后的胞内信号检测。也适用于需要把功能实验与表型分析放在同一份样本上的研究。

三、常见实验问题与对应解决

1、全血放置数小时后中性粒细胞为什么明显减少？

中性粒细胞离体后凋亡速度快，且容易在离心与红细胞裂解过程中黏附聚集而丢失，这是样本前处理延迟的典型表现。解决方式是在采血点即用 hWBCS002-100 按 1:1 稳定并冻存，到实验室后再用 WBFL002-1000 固定裂解。可观察的改善是白细胞分群中中性粒细胞比例恢复，散点图上不再出现缺失的粒细胞群。

2、红细胞裂解不够、流式图上碎片多怎么办？

常见成因是 LYSIS buffer 用量不足、作用时间偏短或环境温度偏低，红细胞膜未被充分破坏。对应产品为 WBFL002-1000 中的 LYSIS buffer（4 倍浓缩），按血样 40 倍体积配成 1 倍工作液，室温作用 15-20 分钟。改善体现在采集时碎片事件比例下降，背景荧光更干净。

3、多中心采样点没有流式仪，样本寄到实验室已超过一天怎么保？

前处理延迟会让蛋白磷酸化水平与表面标记同时漂移，这是跨中心研究较难控制的变量。用 hWBCS001-T010 或 hWBCS002-100 在采样现场完成全血样本稳定与冻存，样本以 -80℃ 或干冰运输。改善在于各中心样本到达后处理所得表型趋于一致，批次间差异收窄。

4、全血刺激到 24 小时细胞死亡增多、信号偏弱怎么处理？

全血在普通培养基中营养耗尽，白细胞在刺激后期进入应激状态，读出值随之偏低。改用 WBST001-100 作为培养缓冲液，按原实验设计加入刺激物。可观察的改善是 24 小时以上时间点的活细胞比例与信号强度更稳定。

5、固定后磷酸化信号衰减、活化标记测不出是什么原因？

固定延迟或固定液配比、作用时间不当，会让磷酸化位点在处理前已被磷酸酶去除。对应产品为 WBFL002-200，固定液按血样 10 倍体积配制，室温固定 15 分钟。改善表现为 p-STAT 等磷酸化信号在刺激与对照之间仍可分辨。

6、样本量只有 100 µL 还能做多色免疫分型吗？

稀有样本或小鼠实验常受血量限制，常规流程在离心步骤就会损失大部分细胞。可用 hWBCS001-T001 这类 100 µL 预分装管完成全血样本稳定，再以 WBFL002-200 的小体系处理。改善在于低血量样本仍能获得足够事件数，多色 panel 的门控不掉群。

四、常见疑问与解答

1、WBFL002-1000、WBFL002-500 与 WBFL002-200 有什么区别？

三者是同一试剂盒的不同规格，分别对应 100 mL、50 mL 与 20 mL，套装内组分体积按比例配置。选择依据是预计处理的血样总量与单次实验通量，小规格更适合方法摸索与低样本量项目。

2、全血细胞稳定剂有哪几种规格，预分装管怎么选？

瓶装为 hWBCS002-100（100 mL），预分装管覆盖 100-2000 µL 共十档，带 L 后缀的版本附带条形码。按计划采血量选择等体积的预分装管，管体标称容量约为血样体积的三倍，留出混合空间。

3、试剂收到后应如何储存，预分装管可以放室温吗？

Fix-concentrate 与稳定剂类需 5-8℃ 保存，LYSIS、WASH、CRYO#20 及 Fix-diluent 可室温存放。预分装管在 20-25℃ 可维持 12 周，长期存放仍建议冷藏，避免反复升温。

4、稳定剂开瓶后还能用多久？

开瓶后的稳定性取决于储存温度与取用方式，瓶身标注的是未开封状态下的有效期。分装取用、避免反复开盖升温，可减少污染与效价下降的风险；超过标示期限使用前建议先做小样本验证。

5、全血与稳定剂混合后必须多久之内冻存？

协议规定室温静置 10 分钟后即可冻存，全血样本稳定后的冻存窗口建议控制在混合后 10-120 分钟内。若样本需要在台面等待更久，表面标记的稳定性可维持较长时间，胞内信号则缺少长时等待的数据支持。

6、固定裂解后的样本可以冻存后再染色吗？

可以。完成固定、裂解与洗涤后，细胞可重悬于 CRYO#20 直接置 -80℃，复苏后按常规染色流程操作，无需额外洗涤即可上机。是否洗涤取决于所用抗体组合，建议先用小样本验证兼容性。

7、离心后上清为什么必须吸去而不能直接倾倒？

固定后的细胞沉淀附着力较弱，倾倒会让沉淀随液流滑出，造成细胞数量不可控的损失。协议要求 300 g 离心 5-10 分钟后用移液方式吸去上清，保留约 50-100 µL 缓冲液以便重悬。

8、冻存全血复苏后需要洗涤再染色吗？

可直接染色并采集，但建议先确认抗体面板与残留缓冲液的兼容性。染色前以 300-400 g 离心约 5 分钟，吸去部分上清以调整抗体工作液体积，也能降低抗体消耗。

9、中国区域如何通过授权代理商订购，货期如何确认？

中国区域由上海起发实验试剂有限公司受理订单，规格与货号以品牌方产品编号为准。货期需结合库存与运输安排确认，预分装管等特殊规格通常需要预留备货时间。

10、收到试剂后发现有效期临近或外包装异常怎么处理？

先核对瓶身批号、有效期与订单信息是否一致，再检查是否有渗漏、破损或温度暴露迹象。存在异常时保留包装与运输记录，通过授权代理商反馈，不建议在未确认前直接用于正式实验。

更多产品信息，请联系中国区域代理商：上海起发实验试剂有限公司

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

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