rokazyme生产和销售用于研究，诊断和工业测试目的的新型酶。该公司成立于2006年，是冰岛生物技术公司Prokaria的副产品，该公司后来合并为非营利性国有企业Matis。Prokazyme基于二十年的地热生物勘探，微生物基因组学和酶发现。Prokazyme（作为中小企业）与马蒂斯组成了一个研究联盟，并共同参与了由欧盟资助的一些研究项目。持续的研发和与Matis的战略联盟使Prokazyme有机会开发大量不断增长的嗜热细菌和病毒基因数据库，并继续开发新的*酶产品。

Rma DNA ligase from Rhodothermus marinus

来自Rhodothermus marinus的Rma DNA连接酶

热稳定的NAD +依赖性双链DNA连接酶，宽温度范围为5-65°C。 

来自Rhodothermus marinus的 DNA连接酶是一种热稳定的NAD +依赖性双链DNA连接酶，其宽温度范围为5-65℃。所述enzym ë催化高保真DNA连接并适合于各种应用，包括基因合成。

产品Dlig120 Rma DNA连接酶有500个单位和2000个单位以及10x反应缓冲液。

产品：Dlig120S | DNA连接酶500单位| 价格：220.00 EUR

产品：Dlig120L | DNA连接酶2000单位| 价格：320.00 EUR

有关详细信息，请参阅下文或下载说明书

产品描述

介绍：

Rma DNA连接酶催化双链DNA结构中相邻3'-羟基和5'-磷酸末端的NAD依赖性连接。与T4 DNA连接酶相反，Rma DNA连接酶对平端DNA的片段没有可检测的活性。与T4 DNA连接酶不同，Rma DNA连接酶在宜温度条件下仅显示小的连接活性，对于4bp以及2bp的共同末端。Rma DNA连接酶对RNA靶标没有活性。从携带质粒的大肠杆菌菌株中分离和纯化Rma DNA连接酶，所述质粒具有来自冰岛分离的嗜热细菌Rhodother-mus marinus的克隆DNA连接酶基因（1,2）。Rma连接酶的半衰期在91℃下为7分钟（2）。该酶具有广泛的反应温度，宜活性约为55℃。

应用：

Tsc DNA连接酶是需要高温，高严格连接双链DNA的应用的理想酶.Tsc DNA连接酶可用于：

• 基因合成（12）来自重叠的寡核苷酸。

储存：
储存和稀释缓冲液：20 mM Tris-HCl，50 mM KCl，0.1 mM EDTA，0.1％Triton X-100（v / v），1 mM二硫苏糖醇（DTT），50％甘油（v / v），pH 7,6（25℃）。当在-15°C至-25°C下储存时，Rma DNA连接酶是稳定的。

反应条件：
1×反应缓冲液（10x供应）20mM Tris-HCl，20mM KCl，10mM MgCl 2,0,1％Nonidet P40（v / v），0.5mM NAD，1mM DTT，pH 7 ，5（25°C）。

浓度和单位定义
浓度10 U /μl。一个单位的Rma DNA连接酶催化在45℃下1分钟内1μgBstEII消化的λDNA的50％cos位点的连接。

应用方案：活性测定： 单位定义的酶测定法是用BstII消化的λDNA的cos位点的连接。

在45°C孵育1-15分钟。在干冰/乙醇浴中进行反应。在65℃下孵育10分钟，然后在琼脂糖凝胶上进行分析（未连接的cos位点熔化）

通过琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色测定结果。

质量控制：

质量控制：
如下所述，测定每批Tsc DNA连接酶的活性和污染活性。

缺乏DNA核酸内切酶：

• 将0.25μg超螺旋pBR322 DNA与增加量的Tsc DNA连接酶在25μl反应中于37℃温育16小时。> 100U的Tsc DNA连接酶显示pBR322 DNA的超螺旋结构没有松弛。

• 在25μl反应中，在37℃和64℃下，用Tsc DNA连接酶加入0.25μgλ-DNA Eco RI / HindIII片段16小时。100U Tsc DNA连接酶未显示条带图案的改变。

不含核酸外切酶：将增加量的Tsc DNA连接酶在含有[3H] - 标记的DNA的50μl测试缓冲液中于37℃和64℃温育4小时。显示无外切核酸酶活性的酶量> 100U。

缺乏Rnases：
来自Ambion的RNaseAlertTM实验室测试试剂盒（目录号1964）用于根据制造商的方案检测RNase活性。在1小时后37℃孵育Tsc DNA连接酶的XU后未检测到RNase活性。

参考文献：

• Alfredsson GA，et al。1988. J. Gen. Microbiol。134：299-306
• Torbjarnardottir SH等人。1995.基因161：1-6
• Housby JN，et al。2000.核酸研究。28：e10。
• Housby JN，et al。2001.肛门。生物化学。302：88-94
• Sutton JR，et al。1992.转基因研究1：228

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