目录号:IQ580
£226.00
目标抗原
Desmoglein 2
主要说明
小鼠抗桥粒芯糖蛋白2 [7H9]
目录编号
IQ580
数量
0.1毫升
浓度
1mg / ml的
克隆
7H9
主办
老鼠
同型
的IgG1
免疫原
人桥粒芯糖蛋白-2的氨基酸37-164与GST融合
骨髓瘤/融合伴侣
NS1骨髓瘤
物种反应性
人的
纯化
蛋白A亲和色谱
格式
纯化的抗体含有PBS + 0.1%叠氮化NA
应用
WB,ICC / IF
稀释液
宜抗体稀释应通过滴定确定,但作为指导起点
WB 1:100 160 kDa波段(特别识别桥粒芯糖蛋白-2的前体区域)
参考
Keim,S。等。人。针对人桥粒芯糖蛋白-2前体的单克隆抗体的产生和表征。杂交瘤卷 27号:249-258(2008)PUBMED
数据库链接
Entrez基因:1829 人类
Entrez Gene:13511 鼠标
Omim:125671 人类
SwissProt:Q14126 人类
SwissProt:O55111 鼠标
Unigene:412597 人类
Unigene:345891 鼠标
也称为
ARVC 10抗体; ARVC10抗体; ARVD 10抗体; ARVD10抗体; Cadherin家族成员5抗体; CDHF 5抗体; CDHF5抗体; CMD1BB抗体; Desmoglein 2抗体
本产品仅供研究使用。不用于治疗或诊断用途。
细胞间桥粒连接的组成部分。参与斑块蛋白和介导细胞 - 细胞粘附的中间丝的相互作用
免疫荧光方案 - 甲醛固定
1.从Tcunit收集细胞,并用吸力从培养皿中取出培养基。
2.用1x PBS洗涤并取出。
3.在室温下在轨道振荡器上将细胞在预热(37℃)对甲醛中孵育12分钟。
4.去除PFA并在室温下在1x PBS中的0.5%Triton X-100中孵育5分钟。
5.准备封闭试剂,这也是抗体稀释剂。
6.在室温下用1x PBS洗涤细胞2次,在轨道振荡器上洗涤4分钟/洗涤。
7.在室温下用1%NCS和1x PBS封闭30分钟。
8.准备一抗(50μl/盖玻片)和湿润染色室。
9.在室温下用1x PBS洗涤细胞2次并短暂风干。
10.在室温下在黑暗的染色室中与一抗孵育1小时。在此期间准备二抗。
11.用1x PBS洗涤细胞5次(每个烧杯更换5个烧杯/ 5个计数)
12。在室温下在黑暗的染色室中与第二抗体孵育1小时。
13.用1x PBS洗涤细胞5次。
14.登上达皮。
溶液(染色当天新鲜制备)。
* 1x磷酸盐缓冲盐水。
*封闭试剂:1x PBS中1%NCS(使用新鲜的10x PBS)。
*固定液:3.5%对甲醛。
1.75g PFA在20ml d.H2O中加5滴1M NaOH。在50-60℃的热板上搅拌直至溶解。加入4滴IN HCl并检查pH指示条。PH值应为7.4。完成体积,d.H20至25ml,加入25ml 2xPBS。在添加到盖玻片之前检查pH值。
免疫荧光方案 - 甲醇/丙酮固定
1.从TCunit收集细胞,并用吸力从培养皿中取出培养基。
2.用1x PBS洗涤并取出。
3.用冷甲醇:丙酮1:1在冰上固定细胞10分钟。
4.制备阻断试剂,这也是抗体的稀释剂。
5.取出固定剂并在室温下用1x PBS洗涤细胞3次,在轨道振荡器上洗涤4分钟。
6.在室温下用1%NCS和1x PBS封闭30分钟。
7.准备一抗(50?l /盖玻片)和湿染色室。
8.在室温下用1x PBS洗涤细胞2次并风干约7分钟。
9.在室温下在室温下与一抗孵育1小时,在染色室中避光。在此期间准备二抗。
10.用1x PBS洗涤细胞5次(每个烧杯更换5次烧杯/ 5次计数)
11。在室温下,在染色室的黑暗中与第二抗体孵育1小时。
12.用1x PBS洗涤细胞5次。
13.登上达皮。
溶液(染色当天新鲜制备)
* 1x磷酸盐缓冲盐水。
*封闭试剂:1x PBS中1%NCS(使用新鲜的10x PBS)。
*固定液:甲醇:丙酮1:1冰冷。
Western Blotting Protocol
1.将凝胶转移到PDVF或硝酸纤维素膜上
2.将膜置于封闭缓冲液中的塑料托盘中搅拌1小时
3.在洗涤缓冲液中冲洗
4.在洗涤缓冲液和一抗中孵育1小时
5.洗涤6次X用洗涤缓冲液洗涤5分钟
6.在洗涤缓冲液和二抗中孵育1小时
7.用洗涤缓冲液洗涤6X 5分钟
8.检测(例如ECL,Amersham根据制造商的说明)
洗涤缓冲液
PBS + 0.1%Tween 20
阻断缓冲液
洗涤缓冲液+ 5%奶粉
所用抗体的浓度取决于每种抗体,抗原的量和所用的检测方法。通常,稀释在稀释的几百倍稀释到几千倍的范围内,但通常必须凭经验确定。