欢迎进入上海起发实验试剂有限公司!
技术文章
首页 > 技术文章 > immuquest IQ479说明书

immuquest IQ479说明书

 更新时间:2019-02-28 点击量:959

immuquest IQ479说明书

CD44抗体[156-3C11]

流式细胞仪抗CD44:抗体(156-3C11)(IQ479)系列稀释:紫色同种型阴性对照,粉红色1/10稀释

目录号:IQ479

£226.00

目标抗原

CD44

 

主要说明

小鼠抗CD44 [156-3C11]

 

目录编号

IQ479

 

数量

0.1毫升

 

浓度

3.2mg / ml的

 

克隆

156-3C11

 

主办

老鼠

 

同型

的IgG2a

 

免疫原

刺激人体白细胞

 

特异性

该抗体对CD44H分子的表位3具有特异性

 

物种反应性

人类,狒狒

 

纯化

蛋白质A.

 

格式

PBS中纯化的抗体+ 0.1%叠氮化na

 

应用

IHC-P,流式细胞

 

稀释液

抗体稀释应通过滴定确定,但作为指导,尝试以1:10进行流式细胞术

 

参考

白细胞分型V,牛津大学出版社(1995)

 

数据库

Entrez Gene:101008690狒狒

Entrez Gene:960人类

Omim:107269人类

SwissProt:P16070 Human

Unigene:502328人类

 

也称为

LHR抗体; BA-1抗体; CD44抗体; CD44抗体; CD44抗原抗体; CD44分子(印度血型)抗体; CD44分子抗体; CD44_HUMAN抗体; CDw44抗体;细胞表面糖蛋白CD44抗体;硫酸软骨素蛋白多糖8抗体;抗体CSPG8抗体; ECMR-III抗体; Epican抗体;细胞外基质受体III抗体; GP90淋巴细胞归巢/粘附受体抗体; HCELL抗体;造血细胞E-和L-选择素配体抗体;硫酸乙酰肝素蛋白多糖抗体; Hermes抗原抗体;归巢功能和印度血型系统;抗体; HSA抗体; HUTCH-I抗体; HUTCH1抗体;透明质酸受体抗体; IN抗体; MC56抗体; MDU2抗体; MDU3抗体; MGC10468抗体; MIC4抗体; MUTCH1抗体; PGP-1抗体; PGP -I抗体; PGP1抗体;吞噬糖蛋白1抗体;吞噬糖蛋白I抗体
 

本产品仅供研究使用。不用于治疗或诊断用途。

免疫荧光方案 - 甲醛固定

   1.从Tcunit收集细胞,并用吸力从培养皿中取出培养基。
   2.用1x PBS洗涤并取出。
   3.在室温下在轨道振荡器上将细胞在预热(37℃)对甲醛中孵育12分钟。
   4.去除PFA并在室温下在1x PBS中的0.5%Triton X-100中孵育5分钟。
   5.准备封闭试剂,这也是抗体稀释剂。
   6.在室温下用1x PBS洗涤细胞2次,在轨道振荡器上洗涤4分钟/洗涤。
   7.在室温下用1%NCS和1x PBS封闭30分钟。
   8.准备一抗(50μl/盖玻片)和湿润染色室。
   9.在室温下用1x PBS洗涤细胞2次并短暂风干。
  10.在室温下在黑暗的染色室中与一抗孵育1小时。在此期间准备二抗。
  11.用1x PBS洗涤细胞5次(每个烧杯更换5个烧杯/ 5个计数)
  12。在室温下在黑暗的染色室中与第二抗体孵育1小时。
  13.用1x PBS洗涤细胞5次。
  14.登上达皮。

溶液(染色当天新鲜制备)。

    * 1x磷酸盐缓冲盐水。
    *封闭试剂:1x PBS中1%NCS(使用新鲜的10x PBS)。
    *固定液:3.5%对甲醛。

1.75g PFA在20ml d.H2O中加5滴1M NaOH。在50-60℃的热板上搅拌直至溶解。加入4滴IN HCl并检查pH指示条。PH值应为7.4。完成体积,d.H20至25ml,加入25ml 2xPBS。在添加到盖玻片之前检查pH值。


免疫荧光方案 - 甲醇/丙酮固定

   1.从TCunit收集细胞,并用吸力从培养皿中取出培养基。
   2.用1x PBS洗涤并取出。
   3.用冷甲醇:丙酮1:1在冰上固定细胞10分钟。
   4.制备阻断试剂,这也是抗体的稀释剂。
   5.取出固定剂并在室温下用1x PBS洗涤细胞3次,在轨道振荡器上洗涤4分钟。
   6.在室温下用1%NCS和1x PBS封闭30分钟。
   7.准备一抗(50?l /盖玻片)和湿染色室。
   8.在室温下用1x PBS洗涤细胞2次并风干约7分钟。
   9.在室温下在室温下与一抗孵育1小时,在染色室中避光。在此期间准备二抗。
  10.用1x PBS洗涤细胞5次(每个烧杯更换5次烧杯/ 5次计数)
  11。在室温下,在染色室的黑暗中与第二抗体孵育1小时。
  12.用1x PBS洗涤细胞5次。
  13.登上达皮。

溶液(染色当天新鲜制备)

    * 1x磷酸盐缓冲盐水。
    *封闭试剂:1x PBS中1%NCS(使用新鲜的10x PBS)。
    *固定液:甲醇:丙酮1:1冰冷。



Western Blotting Protocol

   1.将凝胶转移到PDVF或硝酸纤维素膜上
   2.将膜置于封闭缓冲液中的塑料托盘中搅拌1小时
   3.在洗涤缓冲液中冲洗
   4.在洗涤缓冲液和一抗中孵育1小时
   5.洗涤6次X用洗涤缓冲液洗涤5分钟
   6.在洗涤缓冲液和二抗中孵育1小时
   7.用洗涤缓冲液洗涤6X 5分钟
   8.检测(例如ECL,Amersham根据制造商的说明)

洗涤缓冲液
PBS + 0.1%Tween 20 

阻断缓冲液
洗涤缓冲液+ 5%奶粉

所用抗体的浓度取决于每种抗体,抗原的量和所用的检测方法。通常,稀释在稀释的几百倍稀释到几千倍的范围内,但通常必须凭经验确定。