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BGTurbo®无甘油,重组β-葡萄糖醛酸酶

 更新时间:2019-09-19 点击量:837

 

kurabiotec BGTurbo说明书

BGTurbo®无甘油,重组β-葡萄糖醛酸酶

Glycerol Free, High Efficiency Recombinant β-Glucuronidase

在自然界中已鉴定出超过8,000种不同的β-葡糖醛酸糖苷酶。只有一种能够在短短10分钟内催化所有葡萄糖醛酸苷的*水解,那就是BGTurbo®

我们精心研制BGTurbo ®使用大量的蛋白质模型和湿实验室筛查,以创建一个大规模优化的β葡萄糖醛酸酶,不仅提供存在任何已知的酶的快的水解,而且还通过消除不必要的转换和减少保存标本和峰值完整性背景噪音。

重组,率BGTurbo ®大化LCMS生产能力和报酬率的投资,兼容将全线自动化,并且既非常纯净,几乎*一致。

我们需要为您提供适合的水解,以便您可以依靠您的答案为人们做多的事情。这就是BGTurbo ®为您提供。

 

产品规格

  • 产品形式:  液体,pH 7.0
  • 温度范围: 20-55°C
  • 宜温度: 50°C
  • pH范围: 6.5-7.2
  • 宜pH值: 6.8
  • 比活度: ≥200,000U/ mg蛋白质
  • 蛋白质: 1.0±0.05mg / ml
  • 纯度: > 90%β-葡萄糖醛酸酶
  • 分子量: ~280KDa
  • 储存/稳定性: 4°C至少10个月。
  • 活性单位定义:在pH 6.8和37℃(测定30分钟)下,一个单位每小时从酚酞葡糖苷酸中释放1.0μg酚酞。

产品概述:

BGTurbo®重组β-葡萄糖醛酸酶,为广泛的共轭分析物提供高的水解活性,包括“难以裂解”的葡萄糖醛酸苷,特别是阿片类和阿片类药物如可待ying。这种超纯水性酶制剂可用于要求苛刻的高通量,临床或法医尿液药物检测实验室。使用BGTurbo®进行快速水解和样品制备,可以消除样品制备瓶颈,同时实现全自动水解和当天报告的准确和可重复的分析结果。

工作温度范围:20 - 55°C蛋白:1.0±0.05mg / ml
工作pH范围:6.5 - 7.2纯度:> 90%β-葡萄糖醛酸酶
具体活动(PPG):> 200,000U / mg蛋白质存储:在-20°C,至少保证10个月。

表1:BGTurbo孵育条件

 

阿片类药物和阿片类药物,ULOQ高达15,000ng / mLB Opiate /阿片类药物,ULOQ高达2,500ng / mL和广谱面板C其他:苯二氮卓类,(合成)大麻素,三环类抗抑郁药......
BGT:尿液(v / v)1:12:51:5
时间(min)10分钟10分钟瞬间
温度(°C)55℃下55℃下室内温度
预计恢复> 85%的> 90%的> 95%

 

逐步协议:

  1. 可选的尿液标本离心。
  2. 根据表2移取尿量。
  3. 根据表2,在50%甲醇(MeOH)+去离子水中加入Buffer +BGTurbo®酶+内标(ISD)。
  4. 在的温度和时间进行水解孵育。
  5. a)对于D&S方法,添加曲线 - 稀释剂并立即注射(无离心)或b)进行F&S,SPE或SLE提取。

表2:水解混合物组合物(LCMS / MS的实施例)请参考下面的图例。

 abC
 样品制备(a)D&S(μL)F&S / SPE / SLE(μL)D&S(μL)F&S / SPE / SLE(μL)D&S(μLF&S / SPE / SLE(μL)
 尿501005010050100

MASTERMIX(d)

缓冲区(B)204020402040
BGTurbo5010020401020
DI-水15三十459055110
ISDs含50%MeOH(c)15三十15三十15三十
 150300150300150300
 孵化时间10分钟10分钟0分钟
 TemperatureTime55℃下55℃下室内温度

 

  • 样品制备方法:D&S稀释和射出/ F&S过滤和射出/ SPE固相萃取/ SLE:支持液体萃取
  • 缓冲液:  磷酸钠500mM。pH 6.8或Kura Biotec提供缓冲液。
  • 50%甲醇中的内标物:总水解混合物中4%至6%MeOH是宜的并且使BGTurbo活化达1.6倍。
  • 可以制备含有50%MeOH中的缓冲液,酶,去离子水和ISD的Mastermix以简化工作流程。储存在2-8°C。5天内使用。