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PolyPlus FectoPRO产品

 更新时间:2019-10-11 点击量:3005

 

PolyPlus-transfection(PT)是一家位于法国的生物技术公司,目前已经通过了ISO9001:2000质量体系认证。该公司拥有十几年的的转染试剂研发经验,已经开发了一系列的转染试剂,如:基因的体内和体外转染试剂、寡核苷酸转染试剂和siRNA转染试剂等,可以根据不同的需要获得稳定或瞬时的转染效果

PolyPlus FectoPRO产品

High yields in suspension CHO & HEK-293

  • 惊人的蛋白质和抗体产量
  • 使用较少的质粒DNA量进行具有成本效益的瞬时基因表达
  • 与多种哺乳动物表达培养基和细胞系统兼容
  • 符合生物制造准则
  • 适用于高密度电池系统

技术指标

试剂

FectoPRO ®

分子交付

脱氧核糖核酸

应用领域

生物生产

细胞类型

悬浮液CHO,HEK-293及其衍生物

转染数

1毫升FectoPRO的®足以转染800毫升到1升以上的细胞培养的

存储

5°C±3°C,适当存放可稳定1-2年

提供

FectoPRO ®助推器

摘要

使用瞬时转染和基因表达获得的蛋白质产量

FectoPRO®转染试剂盒专门设计用于使用低DNA量(<1 µg / ml细胞培养物)在各种无血清培养基中的CHO和HEK-293悬浮细胞中增强瞬时基因表达(TGE)。

FectoPRO®介导的转染过程可轻松扩展至几毫升到几升的细胞培养,确保强大的可重复生产蛋白质。更高的生产率和对DNA的低要求使FectoPRO®成为生物生产过程中具有成本效益的解决方案。

订购信息:

 

ProductReference NumberTransfection ReagentExpression BoosterExpression Medium
FectoPRO® Reagent116-0011 ml1 ml-
FectoPRO® Reagent116-01010 ml10 ml-
FectoPRO® Reagent116-0404 x 10 ml4 x 10 ml-
FectoCHO® CD Medium716-01L--1 L
FectoCHO® CD Medium716-06L--6 x 1 L
FectoCHO® Expression System716-01LKIT1 ml1 ml1 L
FectoCHO® Expression System716-06LKIT5 x 1 mL5 x 1 mL6 x 1 L

 

惊人的蛋白质产量

FectoPRO ®使惊人的高蛋白质和抗体的产率在两个CHO和HEK-293细胞在无血清培养基中悬浮培养的(图1)。

FectoPRO-抗体产生CHO细胞图1 FectoPRO ®给出了在悬浮的CHO细胞惊人抗体生产产量。将细胞以1×106细胞/ ml的30ml的FreeStyle™CHO表达培养基中接种,并用FectoPRO染®(0.8微克DNA / ml)或的FreeStyle™MAX试剂(1.25微克DNA / ml)的下列推荐的方案针对各个试剂。重组小鼠IgG产率,使用蛋白G的生物传感器(福特生物转染后1〜6天测定®八位字节RED96系统)。FreeStyle™是Life Technologies™Corporation的商标。数据由ProteoGenix SAS(法国)友善提供。

了解我们的套件致力于CHO细胞:FECTOCHO ®表达系统

FectoPRO ®很大程度上优于其它转染试剂如线性PEI在生物生产过程中常用的转染效率(图2)而言,导致优异的蛋白质生产产率(图3)。

FectoPRO-Microscopie图2 FectoPRO ®给出了在悬浮的CHO细胞转染效率高。的FreeStyle™CHO-S细胞以1×10接种6个细胞/ ml的30ml的FreeStyle™CHO表达培养基中,并用FectoPRO转染® + FectoPRO ®使用0.4微克/毫升和1.25微克/毫升的助推器或的FreeStyle™MAX试剂表达GFP的质粒。转染24小时后,使用荧光显微术测定GFP表达。

FectoPRO-CHO细胞

FectoPRO-HEK-293F细胞图3 FectoPRO ®给出在悬浮液中的CHO和HEK-293细胞优于蛋白质生产的产率。的FreeStyle™CHO-S和HEK-293F细胞以1×10接种6个细胞/ ml的30ml的FreeStyle™CHO或293表达培养基并用FectoPRO转染® + FectoPRO ®助推器(0.4微克DNA /毫升),自由式™ MAX试剂(1.25微克DNA / ml)或PEIpro ®(1个微克DNA /毫升)以下推荐的协议用于相应的试剂。在转染后72小时(CHO细胞)和120小时(HEK-293细胞),通过蛋白G亲和定量(HPLC)和Western Blot测定IgG3-Fc(34kDa)的产生。标准对应于纯化的IgG3-Fc(34 kDa)。

了解我们的套件致力于CHO细胞:FECTOCHO ®表达系统

经济:使用少量质粒DNA

高质量质粒DNA的制备可能非常昂贵,尤其是在大量DNA大量生产大量蛋白质需要大量质粒的情况下。FectoPRO ®节省40〜60%的DNA成本通过使用0.4至0.6微克DNA / 10 6个细胞/ ml的细胞培养物; 因此,使该套件成为生物生产过程中可承受且经济的解决方案。

FectoPRO-表比较竞争对手表1 DNA的量和试剂(FectoPRO的体积®和竞争对手)根据生产商的建议转染。

持续的蛋白质生产

蛋白质生产过程的持续时间在过去几年中有所增加,现在大多数蛋白质生产过程会持续1-2周,以获得量的蛋白质生产。FectoPRO ®已经发展到保证持续生产蛋白质在几天内,同时保持较高的细胞活力,可以长期保存蛋白生产(图4)。

FectoPRO-HEK-293中的生产+可行性图4 FectoPRO ®给出了在悬浮细胞持续蛋白质生产。的FreeStyle™HEK-293F细胞以1×10 6个细胞/ ml的30毫升的FreeStyle™293表达培养基的接种,并用FectoPRO转染® + FectoPRO ®按照标准方案助推器(0.5微克DNA /毫升)中。在不同的时间点后,通过蛋白G亲和定量(HPLC)测定IgG3-Fc的产生。FreeStyle™CHO-S可获得类似的结果(数据未显示)。

轻松扩展

强大的协议可轻松适应各种培养皿,从而简化您的生物生产过程。FectoPRO ®介导的转染,可以线性地从30毫升放大到升细胞培养物的无协议适配(图5)。

FectoPRO-CHO的可行性 FectoPRO-CHO蛋白生产

FectoPRO-可扩展性图5 FectoPRO ®是在CHO细胞中易于扩展和重现的。的FreeStyle™CHO-S细胞以1×10接种6个细胞/ ml在30毫升100毫升300毫升或1升的FreeStyle™CHO表达培养基中,并用FectoPRO转染® + FectoPRO ®助推器(0.5微克DNA / ml)的。在第1至6天,使用台盼蓝排除法(A)测定细胞活力,并通过蛋白G亲和定量(HPLC)(B)和Western Blot(C)测定IgG3-Fc的产生。标准品(C)对应于纯化的IgG3-Fc(34 kDa)。

可重复生产的产量

FectoPRO ®制造和使用配制高度控制生产过程。这样可确保实验之间的结果均具有高度可重复性。此外,为了满足当前的管理指南,FectoPRO ®使用释放先进的质量控制包括用于蛋白质生产率的规范,保证优良批与批之间的一致性(图6)。

FectoPRO-批次间的可复制性图6. FectoPRO ®提供优异的批与批的重现。悬浮CHO细胞以1×10接种6个细胞/ ml在30ml CHO培养基中,并使用3个不同批次FectoPRO的转染®(CCIII 078,CCIII 104或CCIII 106)按照标准方案。转染72小时后,通过蛋白G亲和力定量测定IgG3-Fc的产生。在悬浮的HEK-293细胞上获得了相似的结果(数据未显示)。

与哺乳动物表达系统兼容

不像其它可商购的试剂,FectoPRO ®转染试剂盒是适合于CHO和HEK-293细胞(图2和3)。该试剂与各种培养基配方兼容; 因此,实验室的实施非常简单明了(图7,表2)。

FectoPRO-蛋白质生产图7 FectoPRO ®给出了在不同培养基中生长的悬浮的CHO细胞优于蛋白质生产的产率。CHO细胞以1×10接种6个细胞/ ml的30ml的FreeStyle™CHO表达培养基中,CD CHO培养基或Pro-CHO™4培养基并用FectoPRO转染® + FectoPRO ®助推器或的FreeStyle™MAX试剂以下对推荐的方案各自的试剂。转染72小时后,通过蛋白G亲和定量(HPLC)测定IgG3-Fc的产生。

FectoPRO-台式媒体CHO使用FectoPRO表2蛋白质产量®在不同培养基中的CHO细胞。

FectoPRO-台式媒体HEK使用FectoPRO表3.蛋白质产量®在不同培养基中于HEK-293细胞。

发现我们的套件致力于CHO细胞:FECTOCHO ®表达系统

自由式TM,CD FortiCHO TM,CD的OptiCHO TM,Expi293 TM,ExpiCHO TM和CD293是Gibco公司的商标®
Pro-CHO TM,PowerCHO TM和Pro293 TM是Lonza TM Group的商标。
HyClone TM,HyCell TM和TransFx TM是GE Healthcare TM的商标
BalanCD ®和Transfectory TM是Irvine Scientific公司的商标TM

FectoPRO ®也非常适合病毒生产