上海起发为PROGEN的中国代理商，PROGEN公司成立于1983年，总部位于德国海德堡，由海德堡大学教授联合创办，是德国一家生物公司，也是德国癌症研究中心的合作伙伴。

PROGEN 主要产品线：

体外诊断领域中细胞生物学和生物医院学实验所需要的科研试剂盒抗体。

核心产品主要为：K19抗体的衍生类产品和细胞胶蛋白类抗体等。

品牌：PROGEN

货号：PRAAV9

上海起发现货PROGEN PRAAV9说明书

AAV9 Titration ELISA

*的微量滴定板酶免疫测定法，用于定量检测完整的AAV9 wt病毒体，AAV9重组病毒体或人腺相关病毒9的已装配和未装配的空衣壳。捕获抗体检测到未装配的衣壳蛋白上不存在的构象表位。 

货号： PRAAV9 
数量：  96次

腺相关病毒（AAV）是非致病性的ssDNA病毒，作为基因治疗的病毒载体，正在被广泛研究。该病毒转导多种分裂和非分裂细胞，显示长期基因表达，细胞免疫应答低。AAV已用于多项临床试验（例如FIX，CFTR，帕金森氏病，Canavan病）中，显示没有严重的与载体相关的不良反应。AAV9对于CNS中的应用特别有用。 

目前用于表征AAV制剂的方法包括滴定ELISA，实时PCR，DNA点印迹，转导单位测定，感染中心测定，SDS-PAGE或电子显微镜。

AAV制剂所含的空衣壳比填充的，具有治疗活性的病毒颗粒多10倍。由于完整颗粒和空颗粒均可诱导免疫反应，因此对于体内应用而言，确定完整的颗粒滴度至关重要。

通过PROGEN的AAV9滴定ELISA进行免疫定量分析提供了一种快速，灵敏且可重现的方法，用于滴定完整的AAV9 wt病毒体，AAV9重组病毒体或已组装且完整的空AAV9衣壳。

ELISA原理：

该测定基于夹心ELISA技术，其中将对组装的AAV衣壳上的构象表位具有特异性的单克隆抗体（mab）涂在板上，并用于从样品中捕获AAV颗粒。

捕获的AAV颗粒的检测过程分为两个步骤。

1. 生物素偶联的单克隆抗体与捕获的AAV颗粒结合。
2. 链霉亲和素过氧化物酶偶联物与生物素分子反应。底物的添加导致显色反应，其与特异性结合的病毒颗粒的量成比例。

AAV定量方法的比较：

每种常用的量化方法各有利弊：

• qPCR已被广泛使用，但存在一些问题，例如样品制备，引物设计或PCR效率，这些问题可能导致实验室间结果之间的高度差异。
• 数字液滴PCR方法克服了qPCR的某些局限性。但是，由于不同的样品处理方案，实验室之间仍然可能发生变化。
• 如果使用可靠的参考材料，则斑点印迹是一种简单且定量的方法。然而，它通常受蛋白质印迹的线性和动态范围的限制。

考虑到上述技术的实际缺陷，目前常规的夹心ELISA在实验室间和实验室间的变异以及易于使用方面似乎是优越的。因此，它代表了可靠和可再现的总rAVV衣壳滴度定量的宜格式。

改组/变异的AAV的使用：

改组/突变的AAV载体的识别取决于受改组/突变影响的特定衣壳区域。用于PROGEN的AAV ELISA的捕获抗体结合特异性的（在某些情况下还定义为良好的构象表位）。这些表位是由相应的AAV血清型的衣壳组件产生的。ELISA可能识别您的改组/突变的AAV载体的迹象是抗体结合表位的存在。然而，衣壳蛋白的蛋白质序列的变化也可能影响蛋白质的构象，因此，AAV衣壳上呈现的表位的构象。这可能会影响抗体的结合亲和力，并影响基于AAV ELISA试剂盒提供的（非改组）试剂盒对照的效价测定。由于这些属性在很大程度上取决于所执行的特定改组/突变，因此PROGEN无法保证对改组/突变的AAV向量进行成功且的定量。即使改组/突变的AAV衣壳上仍存在抗体结合表位，也需要针对您的特定AAV载体测试和优化您的检测方法。

PROGEN强烈建议您生产和校准合适的（改组/突变）试剂盒对照品，以确保使用PROGEN ELISA试剂盒可靠地确定滴定的AAV载体的滴度。

有限使用标签许可：仅研究使用
产品已授权给PROGEN Biotechnik GmbH。这些产品用于开发，制造和销售基于购买的产品和/或包括购买的产品的次级产品/衍生物
需要使用基于许可的分许可协议。