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swant 7697说明书

 更新时间:2019-11-15 点击量:1013

swant 7697说明书

产品名称钙网膜蛋白兔多抗 CR 7697

      英文名称  Rabbit anti-calretinin

货号  7697

批号 1893-0114

外观 冻干粉

      溶解每管用200 µl双蒸水溶解

规格200UL

产品描述

兔抗calretinin抗血清是用N末端含有6-his标记的重组人calretinin蛋白免疫家兔制备的。

该抗体为兔抗calretinin多克隆抗体[1],与钙结合蛋白D-28k和钙调素[2]都属于EF-手性家族的钙结合蛋白。7697钙网膜蛋白特异表达于包括人、猴子、大鼠、小鼠、豚鼠,鸡和鱼的组织中(图1)与钙结合蛋白D-28k或其他已知的钙结合蛋白不产生交叉反应,此特异性取决于改抗原在脑组织中的分布位置。

 

抗体特异性及效价:

1、生物素-亲和素标记免疫组化检测4%多聚甲醛(或10%福尔马林缓冲液)固定的脑组织冷冻/石蜡切片;

2、免疫酶标记/免疫印迹验证;

 

反应种属:

 WB:小鼠、大鼠、豚鼠、兔子、斑马鱼、食蟹猴、和鸡。

 IHC:人,大鼠,小鼠

 

 经测试 应用:

 WBIHC-P/Fc,ELISA

 WB 免疫印迹; IHC :免疫组织化学; ELISA:酶联免疫。

 

稀释比例

免疫组化(IHC): 12'000 - 15'0004%多聚甲醛/福尔马林固定组织的冰冻或石蜡切片。

免疫印迹(WB): 11'000 - 12'000

本说明书IHCWB采用的是生物素标记法,建议根据实验方法及内容选择合适的抗体稀释比例。

 

储存:

      解冻后分装(如每管1ul5ul等)保存于- 80°C冰箱。短期保存-20°C。近期频繁使用保存于 4°C(增加

      0.01% 叠氮钠) 避免反复冻融。建议分装小份储存。

 

应用

Calretinin可能属于“触发”钙结合蛋白的一类。它主要出现在神经细胞亚群中,是间皮瘤的良好标志物[3,4]

 

免疫印迹(WB

1:不同种属全脑组织蛋白抽提液用于SDS-PAGE Western blot检测,结果表明所有种属均可特异性检测到分子量为29-30k Da的条带。

 

1 2 3 4 5 6 7 8

. 1 7697钙网膜蛋白对不同种属脑组织匀浆液的WB检测结果。上样顺序依次为:1 小鼠;2 大鼠;3 豚鼠;4 兔子;5 食蟹猴;6 斑马鱼;7鸡,8重组calretinin蛋白。WB结果表明,在所有物种中都能检测到29kDa的条带。

 

Calretinin基因敲除小鼠的免疫组织化学染色

Calretinin高表达于正常小鼠脑组织神经元(图2a)calretinin基因敲除小鼠脑组织区域未见阳性表达(图2b)

 

 

 2a正常小鼠脑组织7697钙网膜蛋白免疫组化结果:阳性染色分散于大脑皮层神经元细胞。100 X镜下

2b calretini基因敲除小鼠大脑7697钙网膜免疫组化染色结果:未见大脑皮层神经元阳性染色。100 X镜下

 

参考文献

  1. Schwaller B., Buchwald P., Blümcke I., Celio M.R. and Hunziker W. (1994) Characterization of a polyclonal antiserum against the purified human recombinant calcium-binding protein calretinin. Cell Calcium 14: 639-648.
  2. Schiffmann S.N. et al (1999) Impaired motor coordination and Purkinje cell  excitability in mice lacking calretinin. PNAS, 96: 5257-5262.
  3. Gotzos V., Vogt P. and M.R. Celio (1995) Calretinin is a selective marker for malignant pleural mesotheliomas of the epithelial type. Pathol. Res. Pract. 192:137- 147.
  4. Doglioni, C. et al. (1996) Calretinin: a novel immunocytochemical marker for mesothelioma. Am. J. Surg. Pathol. 20:1037-1046.