molzym D-321-050说明书
微生物 DNA 的分离
MolYsis™ Complete5
样本预处理和细菌/真菌 DNA 分离试剂盒，用于全血和其他体液的无背景 PCR 分析
小样本量 (≤1 mL) 中等样本量 (5 mL)
MolYsis Complete5 试剂盒包括用于以下微生物 DNA 纯化步骤的所有成分：
人/动物细胞裂解
人/动物 DNA 降解
革兰氏阳性和 革兰氏阴性菌和真菌
PCR 抑制剂的去除
微生物 DNA 纯化
Kit Contents – MolYsis™ Complete5 50 reactions 100 reactions Extraction Buffers (store at +18 to +25°C) SU 1x 50ml 2x 50ml CM 1x 100ml 2x 100ml DB1 1x 100ml 2x 100ml RS 1x 50ml 2x 50ml RL 1x 5ml 2x 5ml RP 1x 7.5ml 2x 7.5ml CS 1x 12.5ml 2x 12.5ml AB 1x 12.5ml 2x 12.5ml WB 1x 20ml 2x 20ml 70% Ethanol 1x 20ml 2x 20ml Deionized water 1x 5ml 2x 5ml Enzymes & Reagents (store at -15 to -25°C) MolDNase B, solution 1x 0.5ml 2x 0.5ml BugLysis, solution 1x 1.0ml 2x 1.0ml -mercaptoethanol, solution 1x 0.08ml 2x 0.08ml Proteinase K, solution 1x 1.0ml 2x 1.0ml Consumables (store at +18 to +25°C) Spin columns in 2.0ml Collection tubes 1x 50 2x 50 Collection tubes, 2.0ml 2x 50 4x 50 Elution tubes, 1.5ml 1x 50 2x 50 Manual Manual 1x 1x
本手册规定的试剂盒完整性能的储存和稳定性保证仅在遵循储存条件时有效。 请注意，MolDNase B、BugLysis、-巯基乙醇和蛋白酶 K 在-15 至-25 ℃ 下处理和储存。 缓冲液和耗材应在室温（+ 18 至 + 25 ℃）下储存。在规定条件下，可保证试剂盒的完整性能长达 24 个月。
产品使用限制本产品仅供研究使用，不用于诊断程序。
缓冲液 CM 和 CS 分别含有盐酸胍和硫氰酸胍，当与次氯酸盐或其他酸性溶液结合时，可形成高活性的化合物和有毒气体。如果含有这些缓冲液的液体溢出，使用适当的实验室清洁剂和水进行清洁。如果溢出的液体中含有潜在的传染性物质，首先用实验室清洁剂和水清洁受影响的区域，然后用 70% (v/v) 乙醇清洁。本试剂盒仅供经过培训的熟练人员使用，操作感染性材料和分子生物学方法。为避免处理过程中 DNA 污染试剂和传染性病原体感染用户导致的错误分析结果，请始终佩戴无菌防护手套、一次性袖套、实验服和护目镜。根据制造商的说明手册，开始前在经 UV 辐照的 II 级生物安全柜中工作。工作期间必须关闭紫外灯。按照制造商的说明维护工作站。根据卫生组织的国家指令（例如，Richtlinieüber die ordnungsgemäße Entsorgung von Abfällen aus Einrichtungen des Gesundheitsdienstes，2002），处置潜在传染性材料和样本制备废弃物。可根据要求提供所用化学品的单独材料安全数据表。Molzym 保留更改或修改产品以提高套件性能的权利。
简介
Kit Description 临床材料和动物系统（如血液和其他体液）液体样本中致病菌和真菌的分子分析会受到宿主和死细胞 DNA 高背景的严重干扰。除 PCR 抑制剂外，细菌和真菌序列特异性引物与宿主序列的非特异性结合可对病原体分析产生负面影响。Molzym 通过 MolYsis™Complete5 开发了一种工具，用于富集细菌和真菌细胞，并从血液和其他液体中分离富集的微生物 DNA。MolYsis™Complete5 是去除样品中 PCR 抑制剂和宿主及死细胞 DNA 的完整解决方案，可通过 PCR 或实时 PCR 可靠灵敏地检测微生物病原体。 MolYsis™Complete5 允许从人和动物体液样本中分离微生物 DNA：i）来自例如儿科患者或动物的 1 mL 样本。ii）成人患者 5 mL 样本。
评价样本：人源性：全血（含抗凝剂）、滑液、胸水、脑脊液、腹水、脓液、支气管肺泡灌洗液、鼻灌洗液、尿液。 动物来源：来自鸟类、小鼠、大鼠和猴的全血（含抗凝剂）、仓鼠卵巢细胞培养物（每份样品≤5*108 个细胞）、猴肾细胞培养物、哺乳动物细胞培养物。
MolYsis™Complete5 Technology MolYsis™Complete5 是 Molzym 的专有专有技术，能够从液体临床样品和用于分子分析的动物模型材料中富集和纯化微生物 DNA。该程序包括以下方案： i）人/动物 DNA 去除。ii）普遍裂解革兰阴性菌和革兰阳性菌以及真菌。iii）微生物 DNA 的分离。 获得耗尽宿主 DNA 的微生物 DNA 制剂只需要三个步骤（图 1）。1）：I）向液体样品中加入离液缓冲液可裂解宿主细胞，而微生物细胞不受影响。宿主细胞以及死亡细胞释放的 DNA 被 Molzym 专有的、抗混沌的 MolDNase B.Ⅱ）降解微生物细胞沉淀，用 BugLysis 试剂处理，降解革兰阴性菌、革兰阳性菌和真菌的细胞壁后再经蛋白酶 K 处理消化。三）提取微生物 DNA，然后通过快速的结合-洗涤-洗脱程序进行分离，采用 Molzym 的 CCT 技术，DNA 定量结合到过滤器基质上，从色谱柱中回收微生物 DNA 高
