抗凝血酶III(ATIII)是单链糖蛋白,分子量为58,000。它是丝氨酸蛋白酶抑制剂(丝氨酸蛋白酶抑制剂)超家族的成员,被认为是凝血级联反应中重要的抑制剂(1,2)。ATIII抑制广泛的丝氨酸蛋白酶,包括凝血酶,因子IXa,Xa和XIa,激肽释放酶,纤溶酶,尿激酶,C1酯酶和胰蛋白酶。抑制机制涉及在蛋白酶的活性位点和ATIII的易断裂键(Arg 385-Ser 386)之间形成稳定的1:1复合物。凝血酶的活性位点丝氨酸已显示与ATIII的P1氨基酸(Arg 385)形成共价中间体。肝素可不同程度地提高ATIII对丝氨酸蛋白酶的抑制率。如果是凝血酶抑制剂或Xa因子抑制剂,在肝素存在下,与ATIII的相互作用增强了3个数量级。ATIII与肝素之间的相互作用涉及肝素上的硫酸化和非硫酸化单糖单元的*序列,以及ATIII上的关键赖氨酸残基。已经证明了ATIII与血管内皮上的类肝素结构的结合,并显示出增强了对因子IXa,Xa和凝血酶的抑制。
ATIII也可以在补体级联反应中起作用。已经证明了ATIII与血清中的液相补体攻击复合物的结合。另外,补体的S蛋白(膜攻击复合物的抑制剂)干扰ATIII /凝血酶的相互作用。
通过肝素-琼脂糖亲和色谱法从新鲜的冷冻血浆中制备ATIII(3)。纯化的蛋白质以50%(体积/体积)的甘油/水的形式提供,应储存在-20°C下。通过SDS-PAGE分析确定纯度。