qa-bio E-EF01说明书
Endo F1从肽和蛋白质中裂解出高甘露糖和一些杂合型N-聚糖
部件号–酶量
E-EF01 – 60 µLs¹
E-EF01-20 – 20 µls¹
E-EF01-200 – 200 µls²¹
含缓冲液
²仅含酶
内切F1,内切糖苷酶F1,内-β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶F
Endo F1裂解天冬酰胺连接的高甘露糖和一些杂合寡糖。核心岩藻糖基化将活性降低了50倍。糖苷内切酶F1将水解含有高甘露糖链的硫酸盐。其在寡糖的二乙酰基壳二糖核心中的两个N-乙酰氨基葡糖残基之间裂解,产生截短的糖分子,其中一个N-乙酰氨基葡糖残基保留在天冬酰胺上。相反,PNGase F可以完整清除寡糖。
附加远藤˚F产品
内切糖苷酶F2释放双触角和高甘露糖聚糖(以40X减小的速率)
内切糖苷酶F3将释放triantennarry和岩藻糖基双触角N-聚糖
的远藤˚F多套件包括每个远藤˚F酶和它们的缓冲器中的20个μLs。
源重组Elizabethkingia miricola(是脑膜脓毒性金黄)在大肠杆菌
EC 3.2.1.96
内切F1特异性裂解所有与天冬酰胺连接的高甘露糖和一些杂合寡糖
内容
在20mM的Tris-HCl 60酶微升等分试样(1 U),pH 7.5中
随附20 µL和60 µL的包装尺寸:
5倍反应缓冲液– 250 mM磷酸钠,pH 5.5
比活度> 16 U / mg
活度> 17 U / ml
分子量32,000道尔顿
建议用法
1.在Eppendorf管中加入200 µg糖蛋白。用去离子水将最终体积调整为38 µl。
2.添加10 µl 5x反应缓冲液5.5。3
.添加2.0 µl Endo F1。在37°C下孵育1小时。
比活性
定义为在37°C,pH 5.5下,在1分钟内催化1微摩尔变性核糖核酸酶B(RNase B)释放N-连接寡糖所需的酶量。通过SDS-PAGE监测切割(切割的RNase B迁移更快)。
储存将酶保存在4˚C下。
稳定性正确存放后至少可稳定12个月。几天暴露于环境温度不会降低活性。
纯度如下测试内切糖苷酶F1对蛋白酶的污染。将10μg变性的BSA与2μL酶在37oC下孵育24小时。经处理的BSA的SDS-PAGE分析未显示降解迹象。
生产宿主菌株已经过广泛测试,不会产生任何可检测的糖苷酶。