qa-bio E-EF01-20说明书
E-EF01-20
从肽和蛋白质中选择性释放双触角聚糖
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Specsheet CoA SDS
部件号–酶量
E-EF02 – 60 µLs¹
E-EF02-20 – 20 µls¹
E-EF02-200 – 200 µls²¹
含缓冲液
²仅含酶
内切F2,内切糖苷酶F2,内切β-N-乙酰氨基葡糖苷酶F2
Endo F2从糖蛋白上裂解N联(天冬酰胺连接)双触角寡糖。它还可以切割高甘露糖聚糖,但切割速率降低40倍。其在寡糖的二乙酰基壳二糖核心中的两个N-乙酰氨基葡糖残基之间裂解,产生截短的糖分子,其中一个N-乙酰氨基葡糖残基保留在天冬酰胺上。相反,PNGase F可以完整清除寡糖。
内切糖苷酶F2对蛋白质构象的敏感性低于PNGase F,因此更适合天然蛋白质的去糖基化。但是,为获得最佳结果,建议糖蛋白变性。
附加远藤˚F产品
内切糖苷酶F1释放bianatennary和一些混合聚糖
内切糖苷酶F3将释放triantennarry和岩藻糖基双触角N-聚糖
的远藤˚F多套件包括每个远藤˚F酶及其缓冲器的20个μLs。
源重组Elizabethkingia miricola(是脑膜脓毒性金黄)在大肠杆菌
EC 3.2.1.96
特异性
从肽和蛋白质中裂解所有天冬酰胺连接的双触角寡糖和高甘露糖(尽管降低了40倍)
内容
60的酶微升等分试样(0.3 U)在10mM乙酸钠的25mM NaCl,pH为4.5
包括20 µL和60 µL的包装尺寸:
5x反应缓冲液– 250 mM乙酸钠,pH 4.5
比活度> 20 U / mg
活度> 5 U / ml
分子量32,000道尔顿
建议用法
1.在Eppendorf管中加入200 µg糖蛋白。用去离子水将最终体积调整为38 µl。
2.添加10 µl 5x反应缓冲液4.5。3
.添加2.0 µl Endo F2。在37°C下孵育1小时。
比活性
定义为在37°C,pH 5.5下1分钟内催化1微摩尔变性猪纤维蛋白原释放N-连接寡糖所需的酶量。通过SDS-PAGE监测裂解(裂解的纤维蛋白原迁移更快)。
储存将酶保存在4˚C下。
稳定性正确存放后至少可稳定12个月。几天暴露于环境温度不会降低活性。
纯度如下测试内切糖苷酶F2对蛋白酶的污染。将10μg变性的BSA与2μL酶在37oC下孵育24小时。经处理的BSA的SDS-PAGE分析未显示降解迹象。
生产宿主菌株已经过广泛测试,不会产生任何可检测的糖苷酶。