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invivogen Zeocin说明书

 更新时间:2021-08-19 点击量:1303


invivogen Zeocin说明书

Zeocin

Zeocin™ (solution)Unit sizeCat. code
Selective antibiotic for the Sh ble gene
500 mg (5 x 1ml)
1g (10 x 1 ml)
5g (50 x 1 ml)
5 g (50 ml bottle)
ant-zn-05
Zeocin™ (powder)Unit sizeCat. code
Selective antibiotic for the Sh ble gene
1 g (powder)
5 g (powder)
ant-zn-1p


Zeocin™ | 选择抗生素:内毒素检测,无菌试剂

InvivoGen 是全球的 Zeocin™ 生产商。

Zeocin™ 是腐草霉素D1的制剂,一种由Streptomyces CL990生产的铜螯合糖肽抗生素 。 Zeocin™ 通过嵌入 DNA 并切割 DNA 来导致细胞死亡。
Zeocin™ 的作用对大多数 需氧细胞有效因此,Zeocin™ 是一种流行且有效的抗生素,用于 在各种细胞类型(细菌、真核微生物、植物和动物细胞)中选择带有Sh ble基因的载体 

Zeocin™ 抗性是由来自印度链球菌Sh ble基因产物赋予的,它在与抗生素结合后使 Zeocin™ 失活 [1-3]。Sh ble是一个 370bp 大小的小基因,在许多 InvivoGen 的载体中都携带。 

通常,哺乳动物细胞对 50-400 µg/ml 的 Zeocin™ 浓度敏感,而细菌对 25 µg/ml 的浓度敏感。

仅供研究使用

参考:

1. Drocourt D. 等,1990。用于将低等和高等真核生物转化为腐草霉素抗性的 Streptoalloteichus hindustanus ble 基因盒。核。酸。水库 18: 4009。2 
. Gatignol A. 等人,1988 年。FEBS快报。230:171-5。
3. Dumas P. 等,1994. Embo J. 242 (5) 595-601。

InvivoGen 的 Zeocin™InvivoGen 的 Zeocin™
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规格

产品浓度:  100 mg/ml 溶液

CAS号: 11006-33-0

质量控制:每个批次都经过*测试,以确保没有批次间的差异。

内毒素水平: < 1 EU/mg

理化表征: HPLC、pH、外观

细胞培养测试:在 Zeocin™ 敏感和 Zeocin™ 抗性哺乳动物细胞系中验证效力

微量污染物的非细胞毒性:在 Zeocin™ 抗性细胞中证实没有长期影响

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内容

Zeocin™ 以无菌过滤蓝色溶液的形式提供,浓度为 100 mg/ml,在 HEPES 缓冲液中。

本产品提供三种包装尺寸:

  • ant-zn-1: 10 x 1 毫升(1 克)

  • ant-zn-5: 50 x 1 毫升(5 克)

  • ant-zn-5b: 1 x 50 毫升(5 克)

Zeocin™ 也以蓝色粉末形式提供:

  • ant-zn-1p: 1 x 1 克

  • ant-zn-5p: 1 x 5 克

Zeocin™ 在室温下运输。

收到后应在 4°C 或 -20°C 下储存。

Zeocin™ 是一种有害化合物。有关操作说明,请参阅安全数据表。

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细节

工作浓度

Zeocin™ 通常以 100 μg/ml 的浓度使用,是原液的 1000 倍稀释液。但是,需要为您的细胞确定最佳浓度。
下面列出了在某些哺乳动物细胞示例中选择的 Zeocin™ 的建议浓度:

细胞系

中等的

Zeocin™ 浓

参考

B16(小鼠黑色素细胞)

RPMI

20-250 微克/毫升

1-3

CHO(中国仓鼠卵巢细胞)

DMEM

100-500 微克/毫升

1、4、5

COS(猴肾细胞)

DMEM

100-400 微克/毫升

6、7

HEK293(人胚胎肾细胞)DMEM100-400 微克/毫升8、9
HeLa(人类子宫细胞)DMEM50-100 微克/毫升10、11
J558L(小鼠黑色素细胞)RPMI400 微克/毫升12
MCF-7(人乳腺腺癌细胞)DMEM100-400 微克/毫升13、14
MEF(小鼠胚胎成纤维细胞)DMEM200-400 微克/毫升15、16
THP-1(人类单核细胞)RPMI200 微克/毫升17

参考:

1. Bouayadi K. 等,1997。DNA 聚合酶 beta 的过度表达使哺乳动物细胞对 2',3' 脱氧胞苷和 3'-叠氮基-3'-脱氧胸苷敏感。癌症研究。57:110-116。
2 Hirose Y. 等人,2012 年。抑制 Stabilin-2 可提高循环透明质酸水平并防止肿瘤转移。PNAS, 109: 4263 - 4268. 
3. Fan H. et al., 2012. 使用碳纳米管的脑内 CpG 免疫疗法消除了小鼠皮下黑色素瘤的生长。临床癌症研究 18(20):5628-38。
4. Li F. 等人,1996 年。重组 P 选择糖蛋白配体 1 的翻译后修饰,这是与 P 和 E 选择结合所需的。J.生物。化学 271:3255-3264。
5. Ogura T. 等人,2004 年。B16 黑色素瘤细胞对 CD47 诱导的运动负调节的抗性,这是由于 SHPS-1 的异常 N-糖基化所致。J 生物化学。279(14):13711-20。
6. Saxena A. 等,2002。H2,人类去唾液酸糖蛋白受体的次要亚基,在细胞内运输并形成同源寡聚体,但不结合去唾液酸-口粘蛋白。J 生物化学。277(38):35297-304。
7. Kanamori A. 等人,2002. 使用支持所有三种选择素在剪切流下介导的滚动的细胞公开了选择素的不同硫酸化要求。L-选择素更喜欢碳水化合物 6-硫酸化酪氨酸硫酸化,而 p-选择素则不然。J 生物化学。277(36):32578-86。
8. Ahmed 等人,2013 年。TRIF 介导的 TLR3 和 TLR4 信号传导受到 ADAM15 的负调控。J免疫学。190(5):2217-28。
9. Büllesbach EE。& Schwabe C.,2006。松弛素样因子 (RLF) 与富含亮氨酸重复 G 蛋白激活受体的相互作用模式 8。J Biol Chem。281(36):26136-43。
10. Mesnil M. et al., 1996. 单纯疱疹病毒胸苷激酶基因对癌细胞的旁观者杀伤是由连接蛋白介导的。PNAS 93(5):1831-5。
11. Maszczak-Seneczko D. 等人,2013 年。UDP-N-乙酰氨基葡萄糖转运蛋白 (SLC35A3) 调节高度支化 N-聚糖和硫酸角质素的生物合成。J 生物化学。288(30):21850-60。
12. Cedeno-Laurent F. 等人,2010 年。开发用于研究白细胞 galectin-1 配体和免疫疾病调节作用的新生 galectin-1 嵌合分子。J免疫学。185(8):4659-72。
13. 金 HS。等人,2004 年。胰岛素样生长因子结合蛋白 3 通过 MCF-7 人乳腺癌细胞中的死亡受体介导途径诱导半胱天冬酶依赖性细胞凋亡。癌症研究。64(6):2229-37。
14. 列出 HJ。等人,2001 年。核酶靶向表明核受体辅激活因子 AIB1 是人类 MCF-7 乳腺癌细胞雌激素依赖性生长的限速因子。J 生物化学。276(26):23763-8。
15. Waak J. 等,2009。介导蛋白质稳定性和 DJ-1 与细胞凋亡信号调节激酶 1 的细胞保护相互作用的可氧化残基。J Biol Chem。284(21):14245-57。
16. Maue A. 等人,2013 年。空肠弯曲杆菌的多糖胶囊调节宿主免疫反应。感染免疫。81(3):665-72

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常见问题

你们提供的 Zeocin™ 是盐酸还是硫酸盐?

我们提供盐酸 Zeocin™。


Zeocin™ 是光敏的吗?
不,Zeocin™ 不具有光敏性。


Zeocin™ pH 值敏感吗?
Zeocin™ 在低和高 pH 值(<6 和 >8)或弱氧化剂存在下会发生不可逆的变性。


什么缓冲液可用于稀释 Zeocin™ 以制备中间工作溶液?
应在无菌水中进一步稀释,以创建中间工作溶液。


用于重构 Zeocin™ 的 HEPES 缓冲液的浓度是多少?
用于重构 Zeocin™ 的 HEPES 缓冲液浓度为 5 g/L。


Zeocin™ 的储存方法是什么?
Zeocin™ 在室温下运输。收到后,应在 4°C 下短期储存或在 -20°C 下长期储存。
避免重复的冻融循环。
有效期在产品标签上注明。
对于 Zeocin™ 粉末,一旦以 100 mg/ml 重悬,它可以在 4°C 下储存 12 个月或在 -20°C 下储存 18 个月。
对于 Zeocin™ 溶液,一旦打开,它可以在 -20°C 下保持稳定 1 年,避免重复冻融循环,如果保持在无菌条件下,它可以在 4°C 下保存 3 个月。


Zeocin™ 在哺乳动物细胞中的选择浓度是多少?
Zeocin™ 在哺乳动物细胞系中的工作浓度在 50 - 400 μg/ml 之间变化,有少数报道使用较低(即 20 μg/ml)和较高(即 1000 μg/ml)浓度的案例。在初始实验中,我们建议确定杀死宿主细胞系所需的最佳 Zeocin™ 浓度。有关更多详细信息,请参阅该产品的技术数据表。


Zeocin™ 在大肠杆菌中的选择浓度是多少?
在补充有 25 μg/ml Zeocin™ 的低盐 LB 琼脂中选择 Zeocin 抗性转化体。
重要提示:不要使用含有 Tn5 转座因子(即 MC1066)的大肠杆菌受体菌株。Tn5 编码一种博莱霉素抗性基因,可赋予 Zeocin™ 抗性。