invivogen ant-bl-05说明书
Selective antibiotic for the bsr, bls, or BSD genes | 50 mg (5 x 1 ml) 100 mg (10 x 1 ml) 500 mg (50 ml bottle) 500 mg (50 x 1 ml) | ant-bl-05 ant-bl-1 ant-bl-5b ant-bl-5 |
| Blasticidin (powder) | Unit size | Cat. code |
|---|---|---|
Selective antibiotic for the bsr, bls, or BSD genes | 1 g | ant-bl-10p |
杀稻瘟素是一种有效的选择抗生素，可作用于真核细胞和原核细胞。
杀 稻瘟素是一种从灰色产色链霉菌中分离的肽基核苷抗生素，通过干扰核糖体机制中的肽键形成来抑制蛋白质合成。
对杀稻瘟素的抗性是由蜡状芽孢杆菌(bsr)的杀稻瘟素抗性基因赋予的，该基因编码杀稻瘟素-S 脱氨酶 [1]。
来自链轮菌[2] 的杀稻瘟素S 乙酰转移酶基因 (bls)和来自土曲霉[3]的杀稻瘟素 S 脱氨酶基因 (BSD)也赋予了对杀稻瘟素的抗性。
通常，哺乳动物细胞对 1-10 µg/ml 的杀稻瘟素浓度和细菌对 25-100 µg/ml 的浓度敏感。
由杀稻瘟素诱导的细胞死亡迅速发生，允许在一周内选择携带杀稻瘟素抗性基因的转染细胞系。
参考：
1. Izumi M. 等人，1991. 杀稻瘟素 S 抗性基因 (bsr)：哺乳动物细胞的新选择标记。Exp.Cell Res.197:229-33。
2. Perez-Gonalez J. 等人，1990 年。编码来自链轮菌属的杀稻瘟素 S 乙酰转移酶的基因的克隆和表征。基因。86:129-34。
3. Kimura M. 等人，1994. 土曲霉 (BSD) 中的杀稻瘟素 S 脱氨酶基因：一种用于转染哺乳动物细胞的新耐药基因。生物化学。生物物理学。学报。1219:653-9。
杀稻瘟素产品浓度： 10 mg/ml
质量控制：每个批次都经过*测试，以确保没有批次间的差异。
纯度： ≥ 95% (HPLC)
内毒素水平： < 1 EU/mg
理化特性： pH值、外观
细胞培养测试：在杀稻瘟素敏感和抗稻瘟素的哺乳动物细胞系中验证了效力
痕量污染物的非细胞毒性：在杀稻瘟素抗性细胞中证实没有长期影响
杀稻瘟素盐酸盐以无菌过滤溶液的形式提供，浓度为 10 mg/ml，溶于 HEPES 缓冲液。
该产品有四种包装尺寸：
ant-bl-05： 5 x 1 毫升（50 毫克）
ant-bl-1： 10 x 1 毫升（100 毫克）
ant-bl-5： 50 x 1 毫升（500 毫克）
ant-bl-5b： 1 x 50 毫升（500 毫克）
杀稻瘟素盐酸盐也以粉末形式提供：
ant-bl-10p： 1 克（粉末）
杀稻瘟素在室温下运输。
收到后应在 4°C 或 -20°C 下储存。
杀稻瘟素是一种有害化合物。有关操作说明，请参阅安全数据表。
用于哺乳动物细胞系的杀稻瘟素的工作浓度从 1 到 10 μg/ml 不等，在少数情况下可达 30 μg/ml。
在开始实验中，我们建议确定杀死宿主细胞系所需的最佳抗生素浓度。
处理后，细胞死亡迅速发生，允许在转染后短短 7 天内选择带有bsr或 BSD 基因的质粒的转染细胞。
下面列出了在哺乳动物细胞的一些例子中选择的杀稻瘟素的建议浓度。
细胞系 | 中等的 | 杀稻瘟素浓 | 参考 |
|---|---|---|---|
CHO（中国仓鼠卵巢细胞） | DMEM | 5-10 微克/毫升 | 1,2 |
| HEK293（人胚胎肾细胞） | DMEM | 5-15 微克/毫升 | 3、4 |
| HeLa（人类子宫细胞） | DMEM | 2.5-10 微克/毫升 | 5、6 |
| Neuro2a（小鼠成神经细胞） | DMEM | 30微克/毫升 | 7 |
| THP-1（人类单核细胞） | RPMI | 10 微克/毫升 | 8 |
参考：
1. Dorgham K. 等人，2009 年。一种具有抗炎活性的工程化 CX3CR1 拮抗剂。J Leukoc 生物学。86（4）：903-11。
2. Le Bon L. 等人，2014 年。边缘蛋白调节 Notch-配体顺式和反式相互作用以信号状态。eLife Sci，3：e02950。
3. Tomecki R. 等人，2014 年。多发性骨髓瘤相关的 hDIS3 突变导致细胞 RNA 代谢紊乱，并建议 hDIS3 PIN 域作为潜在的药物靶点。核酸研究。42:1270-90。
4. Edbauer D. 等，2004。nicastrin 和早老素的共表达挽救了 APH-1.J Biol Chem 的功能丧失突变体。279:37311-5。
5. Khandelia P. 等人，2011 年。用于培养哺乳动物细胞中短发夹 RNA 干扰和转基因的流线型平台。PNAS 108:12799-804。
6. Lee HK.et al., 2007. β-内酰胺酶互补在 Toll 样受体信号抑制剂的高通量筛选中的应用。摩尔药学。72:868-75。
7. Matsumoto G. 等人，2011。p62/SQSTM1 的丝氨酸 403 磷酸化调节泛素化蛋白的选择性自噬清除。摩尔细胞。44:279-89。
8. Schepetkin IA。et al., 2009. 从 Epilobium angustifolium 中分离的 oenothein B 的免疫调节活性。J免疫学。183:6754-66。
杀稻瘟素的储存方法是什么？
杀稻瘟素在室温下运输。收到后，应在 4°C 下短期储存或在 -20°C 下长期储存。避免重复的冻融循环。有效期在产品标签上注明。
杀稻瘟菌素溶液打开后，可在 -20°C 下保持稳定 1 年，避免重复冻融循环，如果保存在无菌条件下，可在 4°C 下保存 3 个月。
具体而言，对于杀稻瘟素粉末，原液浓度必须为 10 mg/ml，等分试样可在 -20°C 下保存 1 年。请注意，如果等分试样的浓度低于 10 mg/ml，我们无法保证产品的稳定性。重要的是，避免重复的冻融循环。
杀稻瘟素在哺乳动物细胞中的选择浓度是多少？
用于哺乳动物细胞系的杀稻瘟素的工作浓度在 1 - 10 μg/ml 之间变化，少数报道的案例高达 30 μg/ml。在初始实验中，我们建议确定杀死宿主细胞系所需的杀稻瘟素的最佳浓度。
有关更多详细信息，请参阅该产品的技术数据表。
大肠杆菌中杀稻瘟素的选择浓度是多少？
杀稻瘟素在大肠杆菌中的活性较低，但可以在补充有 100 μg/ml 杀稻瘟素的低盐 LB 琼脂培养基 (pH 8) 上选择对杀稻瘟素有抗性的转化体。
请注意：高 pH 值（即 8）会增强杀稻瘟素的活性。
