QUANTI-Blue™ 溶液是一种比色酶测定法，用于测定生物样品（例如细胞培养上清液）中的任何碱性磷酸酶 (AP) 活性。它已优化用于 96 孔板（标准程序）和 1536 孔板（高通量筛选程序）。 

QUANTI-Blue™ 解决方案可用于检测和量化 AP 或 SEAP 活性。分泌型胚胎碱性磷酸酶(SEAP)，胎盘AP的截短形式，是广泛使用的报告基因。SEAP 被分泌到细胞培养上清液中，因此提供了许多优于细胞内报告基因的优势。InvivoGen 提供了大量带有 SEAP 报告基因的报告细胞系。

QUANTI-Blue™ 解决方案的特点和优势：

• 一种检测和量化 SEAP 和 AP 活动的方便、简单和快速的方法

• 手动操作时间短：< 10 分钟

• 易于制备：只需将 QB 试剂和 QB 缓冲液与水混合

• 高度敏感

• 宽动态范围

• 高饱和阈值

• 允许进行高通量筛选 (HTS)

在存在 AP 或 SEAP 的情况下，QUANTI-Blue™ 的颜色会从粉红色变为紫色/蓝色。紫色/蓝色强度反映了 AP 的活性。AP 的水平可以用肉眼定性测定或使用分光光度计在 620-655 nm 处定量测定。

图

QUANTI-Blue™ 标准程序QUANTI-Blue™ 高通量筛选 (HTS) 程序

规格

物理化学特性：pH 值和溶解度

功能表征：使用表达 SEAP 的报告细胞的碱性磷酸酶进行细胞测定。

内容

QUANTI-Blue™ 解决方案提供三种包装尺寸：

• rep-qbs：5 x 1 ml QB 试剂 + 5 x 1 ml QB 缓冲液，足以为 25 x 96 孔板或 20 x 1536 孔板制备 QUANTI‑Blue™ 溶液

• rep-qbs2：  10 x 1 ml QB 试剂 + 10 x 1 ml QB 缓冲液，足以为 50 x 96 孔板或 40 x 1536 孔板制备 QUANTI‑Blue™ 溶液

• rep-qbs3：  1 x 20 ml QB 试剂 + 1 x 20 ml QB 缓冲液，足以为 100 x 96 孔板或 80 x 1536 孔板制备 QUANTI‑Blue™ 溶液

 将 QB 试剂和 QB 缓冲液储存在 -20°C。

重新配制的 QUANTI-Blue™ 溶液在 2-8°C 下可稳定 2 周，在 -20°C 下可稳定 2 个月。使重新配制的 QUANTI-Blue™ 远离光线。

细节

QUANTI-Blue™ 标准程序

1. 按照数据表上的说明准备 QUANTI-Blue™ 溶液。在 96 孔板的每孔中分配 180 μl QUANTI-Blue™ 溶液。

2. 将 20 μl 来自表达 SEAP 的细胞的培养上清液添加到每个孔中。

3. 在 37°C 下孵育 15 分钟至 6 小时后，使用酶标仪测量 620-655 nm 处的光密度 (OD)