瑞士Swant特约代理经销商-上海起发

▎关于Swant

瑞士Swant（Swant AG）是一家长期聚焦于钙相关蛋白抗体与抗原研发生产的生物企业，总部位于瑞士，核心团队将数十年精力投入到一个看似狭窄、实则极其关键的生物学方向上——钙结合蛋白及其相互作用分子的免疫学检测工具。

在细胞生物学和神经科学中，钙离子（Ca²⁺）作为第二信使参与的信号通路覆盖了从神经冲动传导、肌肉收缩、激素分泌，到细胞凋亡、基因转录调控等大量生命过程。而钙结合蛋白（Calbindin D-28k、Calretinin、Parvalbumin等）正是这些信号事件中的传感器与缓冲器。要在组织切片中看清它们在哪里、在什么细胞类型中表达；要在蛋白水平上确认它们的丰度变化——就需要特异性强、效价稳定、可重复性好的免疫学试剂。

Swant所做的，正是为这一需求持续提供经过验证的单克隆与多克隆抗体工具，以及配套的高纯度重组抗原蛋白。经过多年的积累，Swant的抗体产品已在大量同行评议文献中被采用，尤其在脑组织分型、神经元亚群标记、神经胶质细胞鉴定、钙信号相关蛋白定位等研究方向形成了相对稳定的使用者群体。

▎核心优势

① 方向聚焦，产品线围绕"钙结合蛋白"体系搭建

Swant不是大而全的通用抗体工厂，而是围绕钙生物学这条主线，把几个关键分子的抗体做出深度：

• 钙结合蛋白系列：Calbindin D-28k、Calretinin、Parvalbumin、Calmodulin、Oncomodulin、S-100β、S100A6等；

• 钙转运与泵控系统：Na⁺-Ca²⁺交换子（NCX）蛋白抗体、质膜Ca²⁺-ATPase（PMCA1～4）抗体；

• 神经活性物质相关：GABA抗体、Glutamate抗体；

• 内分泌/生长因子轴：IGF-1、IGF-2抗体；

• 肾素-血管紧张素系统：Renin、Angiotensinogen抗体；

• 重组抗原蛋白：提供经HPLC/FPLC纯化级别的Calbindin D-28k、Calretinin、Parvalbumin、Calmodulin、S-100β等重组蛋白，用于阳性对照、标准品或包被抗原用途。

这种聚焦策略的好处在于：每一款主力抗体都在其目标应用场景中被反复打磨过，而不是广撒网式的"铺货型"产品列表。

② 抗体以高浓度培养上清冻干形式供应，兼顾稳定性与用量灵活性

Swant的经典抗体多以浓缩培养上清（conc. supernat.）冻干（lyophilized）形式提供，也有部分腹水来源（ascites）制备的批次。冻干形式在避光、低温条件下可以较好地维持抗体活性，同时便于运输和长期储备；复溶后可根据实验类型与信号强弱，摸索合适的稀释倍数。

③ 可用于高稀释倍数下的免疫组化（IHC），适合连续切片染色方案

Swant的抗体在ABC法（Avidin-Biotin Complex）等常见IHC体系中，有资料记载可在超过1:5,000倍甚至更高稀释度下仍获得可用的信噪比（具体最佳稀释比需按各实验室固定流程重新滴定）。这意味着一支200 μL的抗体管在实际使用中往往能支撑大量切片，对于需要跑批量染色、做多组比较的实验设计而言，有一定实用价值。

④ 重组抗原蛋白经HPLC/FPLC纯化，可作为方法学验证的补充材料

除了抗体本身，Swant同时提供对应靶点的重组蛋白，这对于以下场景尤其有用：

• Western Blot中跑一块阳性对照泳道，确认抗体识别条带的预期分子量；

• IHC/ICC中设置吸附实验（pre-absorption）对照，评估染色特异性；

• ELISA或体外结合实验中的包被抗原/标准曲线原料。

⑤ 跨物种适应性的实际意义——人源组织的适用性

Swant的Calbindin D-28k、Calretinin、Parvalbumin等关键抗体，在多种脊椎动物（包括人、大鼠、小鼠等）的样本中都有文献使用记录，特别是对人脑组织亚区神经元分型的支持，这是很多实验室选择它们的原因之一。

▎热门产品介绍

一、抗Calbindin D-28k 单抗

▸ 品名  

Calbindin D-28k（钙结合蛋白D-28k）小鼠单克隆抗体，IgG1亚型

▸ 产品特点  

• 靶标分子量约28 kDa的可溶性钙结合蛋白，主要在一类特定神经元亚群（如小脑浦肯野细胞、部分大脑皮层中间神经元、齿状回颗粒细胞、部分感觉神经元）以及某些非神经组织中表达；

• 以浓缩培养上清冻干粉末或纯化腹水来源提供，适用于多种免疫检测平台；

• 在免疫组化中呈现细胞质与部分树突区域的细腻染色特征，背景相对干净，适合做连续切片的细胞类型定位。

▸ 存储条件  

• 收到冻干粉后建议短期内不开启的情况下，存放于2～8 °C避光干燥环境；

• 一旦复溶（通常加入指定体积的超纯水或含稳定剂的缓冲液，以说明书标注为准），应分装为若干小管，存放于-20 °C（非反复冻融）；

• 工作中稀释液建议现配现用或4 °C短期保存（≤1周），避免污染。

▸ 工作原理  

Calbindin D-28k作为EF-hand结构家族成员，其空间构象在不同物种间保守程度较高。该单抗通过识别Calbindin D-28k特异的构象或线性表位，在组织切片或膜上形成抗原-抗体复合物；随后借助二抗（抗小鼠IgG）+ 显色系统（HRP-DAB化学显色或荧光二抗）将结合信号转化为可视化的棕褐色沉淀或荧光信号，从而标记出哪些细胞、哪些区域含有该钙结合蛋白。

▸ 使用方法（以石蜡切片IHC为例的典型流程框架）  

1. 切片准备：组织经合适固定剂（常用4%多聚甲醛/PFA）灌注固定或后固定→梯度酒精脱水→二甲苯透明→石蜡包埋→切片贴附于带电荷或APES处理玻片；  

2. 脱蜡复水：二甲苯×2 → 递减酒精系列→蒸馏水洗；  

3. 抗原修复：根据经验选用柠檬酸钠缓冲液（pH 6.0）或EDTA缓冲液（pH 9.0）的热诱导修复（HIER：pressure cooker或microwave/sub-boiling），这一步对核内/胞质钙结合蛋白的暴露尤为关键；  

4. 内源性过氧化物酶阻断：3% H₂O₂（甲醇或PBS配制），室温10～15 min；  

5. 封闭：含5～10%正常血清（与二抗同源）的缓冲液 + 0.1～0.3% Triton X-100（视穿透需求定），30 min～1 h；  

6. 一抗孵育：按预试滴定好的稀释比（文献参考范围常在1:1,000～1:10,000区间，但必须以自身系统做梯度滴定）用抗体稀释液（PBS/0.1% BSA/0.3% Triton）稀释，4 °C过夜或室温2 h；  

7. 二抗与信号放大：生物素标记抗小鼠IgG → ABC复合物 → DAB显色（或荧光二抗直标方案跳过DAB步骤）；  

8. 复染、封片、镜检（水性封片剂用于荧光，DPX/中性树脂用于DAB）。

二、抗Calretinin 单抗

▸ 品名  

Calretinin 小鼠单克隆抗体

▸ 产品特点  

• Calretinin同样属于EF-hand钙结合蛋白家族，分子量约29 kDa，在特定皮层/海马中间神经元、视网膜双极细胞、内耳毛细胞、部分感觉神经节等位置有特征性分布；

• 该抗体常用于神经元亚型分型方案中，与Parvalbumin、Calbindin D-28k搭配组成"三色/三标"或连续切片标记组合，帮助区分抑制性中间神经元的谱系归属；

• 在人组织样本中，Calretinin也对某些间皮细胞及间皮瘤相关标记有交叉讨论价值（需结合形态与多标确认）。

▸ 存储条件  

同前述冻干抗体的一般原则：2～8 °C干燥避光未复溶；复溶后分装-20 °C保存，避免反复冻融。

▸ 工作原理  

Calretinin在细胞内以可溶胞质蛋白形式存在，因此多数情况下不需要强变性条件即可被抗体接触。单抗结合后通过二抗/酶标系统级联放大，使目标神经元胞体与突起呈现出与周围细胞可区分的显色或荧光轮廓。

▸ 使用方法  

流程与上述Calbindin D-28k基本一致。需要注意的是：

• Calretinin对某些修复条件较敏感，EDTA pH 9.0的HIER方案（pressure cooking约2～3 min持压）在很多人的操作中表现稳定；

• 若做多标免疫荧光，建议将Calretinin与另两种标记错开宿主物种来源（或采用间接法的TSA多轮放大方案/直接偶联一抗方案），减少交叉反应干扰。

三、抗Parvalbumin 单抗

▸ 品名  

Parvalbumin（PV）小鼠单克隆抗体

▸ 产品特点  

• 分子量约12 kDa的小分子EF-hand钙结合蛋白，在快速放电型（fast-spiking）抑制性GABA能中间神经元中表达丰富（如大脑皮层、海马CA1的篮状细胞与胆碱能中间神经元等），也见于骨骼肌与某些感觉系统；

• 因分子量偏小，石蜡切片中若固定过度或修复过度，可能出现表位遮蔽或弥散丢失，因此对固定时长与修复条件的控制更为敏感；

• 常与Calretinin、Calbindin D-28k以及GABA等组合，用于绘制"抑制性回路图谱"。

▸ 存储条件  

冻干粉：2～8 °C，干燥避光；复溶后分装 -20 °C，尽量减少冻融循环。工作中4 °C可短暂放置。

▸ 工作原理  

Parvalbumin的胞内定位以细胞质为主，由于是小分子可溶性蛋白，在良好渗透条件下可较好地被抗体浸润。一抗结合后经酶联或荧光二抗可视化，即可在切片上读出PV阳性神经元密度、分布形态、突起网络等信息。

▸ 使用方法要点  

• 固定建议控制在合理窗口内（例如4% PFA灌注固定数小时至过夜，避免过度交联）；  

• 抗原修复常用柠檬酸盐pH 6.0（低压锅或水煮法），亦可试验EDTA pH 9.0作对比；  

• 一抗稀释比同样需要自身系统滴定——PV抗体在优化条件下可以用到相当高的稀释倍数，但前提是背景控制到位（封闭血清种类、Triton浓度、内源性过氧化物酶清除质量都要匹配）。

四、抗Na⁺-Ca²⁺交换子蛋白（NCX/Cardiac NCX）抗体

▸ 品名  

Na⁺-Ca²⁺ exchanger protein（NCX）小鼠单克隆抗体

▸ 产品特点  

• NCX是位于细胞膜上的双向逆向转运体，利用钠离子梯度排出胞内多余钙离子，在心肌细胞、神经元、肾细胞等兴奋细胞中起关键稳态作用；

• 抗体靶点多设计于胞内环域（loop domain）或C端区域，适合Western Blot（还原条件下）与固定后透化免疫荧光；石蜡IHC的可行性取决于表位是否耐受固定交联。

• 产品可作为研究心脏电生理、神经元钙稳态调控、缺血再灌注损伤模型的材料之一。

▸ 存储条件  

冻干品：2～8 °C干燥避光；复溶后分装 -20 °C保存；工作液4 °C短期。含甘油的防冻版本（如有）可按说明书低温冷冻。

▸ 工作原理  

NCX作为跨膜多次的蛋白，其胞内片段在通透化处理后暴露于抗体。一抗识别特定表位后，通过二抗-HRP或荧光二抗实现可视化。在WB中表现为预期分子量附近的条带（注意糖基化与剪切变体可导致条带迁移偏移，需结合阳性对照判断）。

▸ 使用方法  

• WB：组织/细胞RIPA裂解→BCA定量→SDS-PAGE→转PVDF/NC膜→5%脱脂奶或BSA封闭1 h→一抗4 °C过夜→TBST洗→二抗→ECL显影；  

• IF/IHC：需保证透化（0.1～0.3% Triton X-100）与封闭充分；心肌组织因富含内源性生物素与过氧化物酶，建议加做内源性生物素阻断（Avidin/Biotin blocking kit）及延长H₂O₂处理。

▎Swant的试剂，解决你实验中的哪些问题

1. 神经元亚群分型时缺乏可靠的细胞类型标记  

当你的研究对象是"中间神经元有哪些亚型""不同脑区的抑制性回路如何分布""某种干预后特定神经元谱系是否改变"——你需要一组在本地固定条件下能稳定给出干净信号的亚型标记抗体。Calbindin D-28k / Calretinin / Parvalbumin 这三类经典标记之所以被长期沿用，正是因为它们的表达分区相对稳定、胞质染色模式容易辨认。

2. 钙信号相关蛋白的定位数据与WB定量需要互相印证  

用Fura-2/GCaMP等手段拿到钙动态之后，下一步常常要问"到底是哪类细胞在驱动这个信号"——PMCA与NCX抗体让你在组织原位看到钙外排机器的空间分布，和功能性钙成像形成互补。

3. 人脑组织或临床病理标本的标记需求  

人源样本中很多抗体交叉反应性会下降。Swant的上述几款钙结合蛋白抗体在多篇涉及人脑、人肿瘤（如间皮瘤中Calretinin的讨论）的文献中出现，为需要在人源材料中做验证的课题组提供了一条已有先例的路线。

4. 抗体效价不稳定导致染色批次间差异大  

Swant以冻干浓缩形式供应的设计在一定程度上减缓了"液态抗体在反复开管中活性漂移"的问题——前提是你做好复溶后的分装纪律。

5. 需要配套重组抗原做严谨的抗体验证  

如今期刊对抗体验证的要求趋严（参见RRID与抗体验证工作组的原则），有对应重组抗原可跑阳性对照与吸附实验，等于给你的数据多一层可追溯的证据链。

▎购买Swant产品——常见疑问与解答

Q1：Swant的抗体都是小鼠单抗吗？能不能做多色荧光里和我的兔一抗搭配？  

A：Swant的主力产品线以小鼠来源单克隆抗体（IgG1/IgG2A/IgG2B/IgG3依克隆号而定）为主。如果你的另一支关键抗体也是小鼠来源，那么在同一张切片上直接做间接法双标就会产生二抗交叉识别。解决路径包括：①将其中一个标记改用直接偶联一抗（F(ab')₂-level conjugation）跳过二抗步骤；②采用TSA-酪胺信号放大系统的多轮染色方案（每轮结束后用强洗脱液去除一抗/二抗复合物但保留HRP沉积信号）；③将其中一者的IHC留作相邻连续切片单独染色比对。具体选哪条路，取决于你实验室已有的二抗体系和染色设备。

Q2：冻干粉收到后，用什么复溶液？复溶后能放多久？  

A：具体复溶体积与推荐缓冲液组成务必以随瓶说明书为准（常见做法是加入指定μL的超纯水或含0.1%BSA的PBS）。复溶后强烈建议分装（例如10～20 μL/管）存-20 °C，每次实验取一管融化使用；不要整管反复从-20取出→化冻→放回。工作中稀释好的工作液一般4 °C可撑当天或数天，但不建议长期囤工作液。

Q3：我用Swant的Calbindin D-28k做石蜡IHC，怎么选抗原修复？  

A：这是一个没有"正确答案"的参数。两条最常见的修复路线是柠檬酸钠pH 6.0和EDTA pH 9.0（HIER，压力锅或水煮法）。很多用户的经验是：Calbindin D-28k在EDTA pH 9.0高压修复下信号更亮，但也更依赖背景控制（封闭血清浓度、内源性过氧化物酶清除、二抗来源纯度）。建议第一次上新抗体时，做一个2×2小矩阵：修复缓冲pH 6.0 vs 9.0 × 一抗稀释1:2,000 vs 1:5,000，用同一块阳性组织（小脑是好的内置阳性对照——浦肯野细胞强阳性、颗粒层弱/阴），一眼就能选出你的系统优条件。

Q4：抗GABA抗体染色太浅 / 背景花，怎么办？  

A：抗递质抗体对固定的依赖是所有IHC里最"挑剔"的一类之一。如果你的固定只用4% PFA没有戊二醛，递质分子可能在漂洗与后续步骤中流失，导致信号弱。改善方向：①改用0.1～0.5%戊二醛 + 4% PFA灌注固定（戊二醛味大且有自发荧光风险，需要NaBH₄后处理减荧）；②提高封闭液BSA到2%并降低一抗稀释度（宁浓勿稀的思路）；③做吸附对照确认信号是不是真的递质依赖；④考虑用GAD65/67（合成酶）免疫标记作为GABA能表型的补充证据，二者逻辑不同但互相支撑。

Q5：Parvalbumin染色在石蜡切片上总是"只有零星几个细胞亮"，是抗体不行吗？  

A：不一定。PV是小分子蛋白，对过度固定和过度修复都很敏感。排查顺序建议是：①检查原始固定方案（灌注固定是否及时、固定液是否新鲜、固定时长是4 h还是过夜以上）；②换修复条件做对比（柠檬酸盐pH 6.0 vs EDTA pH 9.0，压力锅时间从短到长梯度试）；③确认阳性对照组织——小脑的浦肯野细胞通常不表达PV（注意这与Calbindin D-28k不同），但小脑白质中的篮状/星形细胞及某些脑干运动核周围有PV阳性信号，可用作内部参照；④如果仍只有个别细胞亮，考虑是否存在组织预处理温度过高（如烤片>65 °C太久）导致小蛋白表位降解，可尝试降低烤片温度/缩短时间。

Q6：我做Western Blot，PMCA抗体出现了好几条带，怎么判断哪个是对的呢？  

A：PMCA有多个基因（PMCA1～4）、可变剪接异构体、以及不同程度的糖基化修饰，因此在不同组织中的条带图谱不全一致。判读原则：①看说明书提供的预期表观分子量范围（通常在120～140 kDa附近，但糖基化可让部分条带上移）；②一定跑阳性对照（推荐用Swant自家的重组PMCA片段蛋白或已知高表达组织裂解物）；③必要时用重组抗原做吸附对照——能被吸附走的条带更可能是真实结合，不能被吸附的非特异带则需要靠更严格的封闭条件（0.05% NaN₃？不，NaN₃会杀HRP——改为提高盐浓度如300 mM NaCl + 0.1% Tween-20）来压制。

Q7：Swant的抗体能不能用于流式细胞术（表面染色）？  

A：Swant的主力抗体多为针对胞内/胞质抗原（钙结合蛋白、递质、钙泵胞内域等），因此在完整活细胞表面染色场景下通常不适用。如果想用于胞内流式（intracellular flow），需要做固定+透化预处理，且事先要验证该克隆在透化条件下的结合行为与信噪比——这不是默认保证的用途，建议先小量试用以确认可行性再批量采购。

Q8：如果我想确认某支Swant抗体对应的RRID或文献引用，去哪里查？  

A：可以在CiteAb、Antibody Registry以及PubMed中用靶标名称（如"Calbindin D-28k Swant" / "Parvalbumin PV235 Swant"等）做组合检索；Swant（swant.com）也会列出部分产品引用的代表性文献方向供参考。采购时你也可以向供货方索要该批次对应的已有验证数据摘要。

Q9：订购与售后技术支持由谁负责？  

A：在中国区，Swant品牌相关产品的咨询、报价与供应服务，由上海起发实验试剂有限公司作为特约代理经销商提供服务支持，包括产品选型沟通、批次信息确认、到货冷链物流跟踪以及售后问题的对接反馈。

Q10：Swant的产品能否用于临床体外诊断或人体治疗？  

A：不能。Swant的抗体与抗原产品均标注为仅供科研使用（for research use only），不用于临床诊断、治疗或直接施用于人体。

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更多产品信息，请联系特约代理经销商：上海起发实验试剂有限公司

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

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