日本Nacalai特约代理经销商-上海起发

▎01 公司介绍

日本Nacalai（NACALAI TESQUE）以试剂为核心业务，产品覆盖生物化学试剂、分析化学试剂、细胞培养相关试剂、免疫与蛋白研究试剂、液相色谱柱及实验室常用缓冲液。品牌业务方向围绕“试剂支撑科研基础工作"展开，为高校、科研院所、医药企业、检测机构提供用于分子生物学、蛋白质研究、细胞生物学、免疫学、神经生物学以及液相分离等场景的消耗型产品。

产品线包含以下几类：

01）液相色谱柱与色谱耗材，用于化合物分离、纯度分析和制备。

02）细胞培养培养基补充物、平衡盐溶液、胰酶、氨基酸、丙酮酸、谷氨酰胺替代物等。

03）蛋白研究试剂，包括细胞裂解、SDS－PAGE、转膜、封闭、抗体反应、染色等相关产品。

04）免疫检测试剂，包括Western Blot封闭液、免疫组化封闭液、标签抗体、二抗及化学发光底物。

05）分子生物学等级试剂，提供核酸、蛋白相关基础化学原料，部分产品进行核酸酶、蛋白酶检测。

06）常规缓冲液与平衡盐溶液，用于洗涤、稀释、转移、短期细胞操作等。

品牌资料着重说明试剂质量管控、目录化供应、定制与大包装服务。对于科研用户而言，重点价值在于产品规格明确、存储条件标注完整、实验流程可复制。

▎02 核心优势

01）产品目录完整

从细胞培养用D－PBS、胰酶，到蛋白提取用裂解液，再到Western Blot用封闭液、预制胶、转膜液、化学发光底物，可提供较完整的实验物料组合。

02）规格与存储信息明确

目录产品通常标注货号、包装、等级、存储温度、适用实验场景。用户可按实验规模选择小包装或常规包装，便于库存管理。

03）蛋白免疫产品流程化

封闭、抗体稀释、预制胶、半干转膜、化学发光检测可形成配套方案，减少自行配制试剂的批间差异。

04）细胞培养缓冲液检测项目清晰

部分平衡盐产品采用0.2μm过滤除菌，并进行细菌、真菌、支原体、内毒素等检测，适合对污染控制有要求的细胞实验。

05）色谱与生化试剂并行

除生命科学常用试剂外，提供COSMOSIL等液相色谱柱及生化分析用试剂，可服务分离纯化、杂质分析、天然产物研究等方向。

06）代理渠道沟通便利

通过特约代理经销商咨询货号、库存、进口周期、冷链运输与售后问题，可降低采购沟通成本。上海起发实验试剂有限公司作为日本Nacalai生物公司特约代理经销商，可提供产品咨询、报价、订货与售后对接。

▎03 热门产品介绍

◇ 3.1 Cell Lysis Buffer 细胞裂解液

01）真实货号与品名

01）Cell Lysis Buffer，1X即用型，货号22352－04，包装100mL，存储条件为冷藏（Refrigerator）。

02）Cell Lysis Buffer（10X）浓缩型，货号22353－81，存储条件为冷冻（Freezer）。10X版本按资料另行包装SDS溶液，以减少SDS对免疫沉淀等操作的影响。

02）产品特点

01）1X版本可直接用于细胞或组织蛋白提取，减少缓冲液配制步骤。

02）10X版本适合批量实验，按需要稀释后使用；SDS单独包装，便于在免疫沉淀、共沉淀等不希望SDS过早介入的步骤中灵活处理。

03）产品资料将其与RIPA类裂解比较，用于总蛋白提取、Western Blot前样品制备；品牌示例中可与Bullet PAGE Plus预制胶、Bullet Blocking One、Chemi－Lumi One Super等配套使用。

03）存储条件

01）22352－04：冷藏保存，具体以瓶身标签和随货资料为准。

02）22353－81：冷冻保存；SDS单独包装部分按对应标签温度存放。

03）收货后检查包装完整性，按标签温度放入冰箱或冷冻柜；避免反复冻融1X分装液。

04）工作原理

细胞裂解液通过缓冲盐维持pH与渗透压，通过非离子或离子型去污剂破坏细胞膜、溶解蛋白，通过盐类与辅助成分释放胞质、膜相关或部分核相关蛋白。1X Cell Lysis Buffer类配方可用于类似RIPA的蛋白提取；10X版本因SDS分开包装，用户可按目标蛋白亚定位、后续免疫沉淀或Western Blot要求决定是否加入SDS。去污剂破坏脂质双分子层，使膜蛋白进入溶液；缓冲体系保持蛋白稳定性；若配合蛋白酶抑制剂，可进一步减少提取过程中的降解。

05）使用方法

01）贴壁细胞：倒去培养液，用预冷D－PBS（如无钙镁版本）轻洗去除残余培养基与血清。

02）按细胞量加入1X Cell Lysis Buffer，置冰上孵育，期间轻度涡旋或上下颠倒。

03）如使用10X产品，先按标签比例用纯水稀释成工作液；需要做IP或pull－down时，按说明决定是否加入分装SDS。

04）裂解后4℃离心，取上清作为总蛋白裂解物；用BCA或Bradford法测定浓度。

05）加入上样缓冲液，按目标蛋白性质进行煮沸或低温变性，随后进行SDS－PAGE。

06）提取膜蛋白、核蛋白或强相互作用复合体时，应提前确认去污剂强度；若做蛋白互作研究，宜减少强变性剂并加入合适蛋白酶抑制剂。

◇ 3.2 Bullet Blocking One for Western Blotting 蛋白印迹封闭液

01）真实货号与品名

01）Bullet Blocking One for Western Blotting，货号13779－14，包装200mL，存储条件为冷藏（Refrigerator）。

02）同系列1L包装货号13779－01，存储条件为冷藏。

其他规格以Nacalai当期目录和上海起发实验试剂有限公司报价单为准。

02）产品特点

01）用于Western Blot膜封闭，资料示例可将封闭时间设为约5分钟。

02）即用型液体，减少脱脂奶配制、过滤、分装等工作。

03）可作为部分抗体稀释介质；用含0.05％－0.1％Tween 20的TBS或PBS稀释时，可按实验需要稀释至适宜倍数，具体比例依一抗、二抗及检测系统优化。

04）与Bullet系列预制胶、半干转膜、化学发光底物配合使用，可缩短从电泳到检测的整体流程。

03）存储条件

01）13779－14、13779－01均按冷藏条件保存，具体以瓶身标签为准。

02）未开封按标签温度存放；开封后避免污染，使用后及时盖紧并放回冷藏。

03）若液体出现异常浑浊、异味、长期室温放置或超过有效期，应停止使用并联系特约代理确认替换。

04）工作原理

Western Blot转膜后，膜上仍有大量未结合蛋白位点，一抗、二抗可能非特异性吸附，形成背景。Bullet Blocking One通过溶液中蛋白或封闭成分占据空白结合位点，降低抗体与膜背景的非特异结合。其配方设计用于在较短时间内形成封闭层，从而减少传统脱脂奶长时间封闭所占用的实验周期。封闭不足会增加背景，封闭过度可能削弱目标信号，因此应按膜面积、抗体性质和检测灵敏度确定时间。

05）使用方法

01）SDS－PAGE后完成转膜，用TBS或PBS短暂漂洗膜面。

02）将PVDF或NC膜浸入Bullet Blocking One；资料示例10cm×10cm膜约用50mL液体。

03）室温轻摇约5分钟；不同抗体、不同目标蛋白可先做条件优化。

04）封闭后直接进入一抗孵育；如一抗需用TBS／PBS－Tween稀释，可将本品按资料建议稀释后作为抗体稀释液，或按抗体说明书选择稀释介质。

05）后续按常规进行一抗、二抗、洗膜与化学发光或荧光检测。

06）注意：封闭时间不宜无依据延长；信号偏弱时检查抗体稀释比、膜类型、转膜效率和曝光条件，而非单纯增加封闭时间。

◇ 3.3 D－PBS（－）without Ca and Mg 无钙镁杜氏磷酸盐缓冲液

01）真实货号与品名

01）D－PBS（－）without Ca and Mg，液体1X，货号14249－95，包装500mL，存储条件室温（RT）。

02）D－PBS（－）without Ca and Mg，液体1X，10瓶×500mL，货号14249－24。

03）D－PBS（－）without Ca and Mg，液体10X，货号11482－15，包装500mL，存储条件冷藏（R）。

02）产品特点

01）无钙、无镁配方，适合细胞消化前洗涤、换液前清洗及不涉及钙镁依赖黏附的实验。

02）14249－95等平衡盐产品资料标注经0.2μm过滤除菌，并进行细菌、真菌、支原体、内毒素检测。

03）1X液体可直接使用，10X液体可按标签稀释后使用，减少现配缓冲液的称量与校正工作。

04）与含Ca／Mg的D－PBS、HBSS等形成区别，用户可按胰酶消化、流式洗涤、固定后洗涤等需求选择对应离子组成。

03）存储条件

01）14249－95：室温保存，具体以瓶身标签和批次资料为准。

02）14249－24：按对应1X液体资料室温保存，整箱避光、洁净存放。

03）11482－15：10X液体按冷藏条件保存；稀释成1X后按使用频率分装，避免反复室温放置。

04）使用前观察液体是否澄清，出现浑浊、沉淀、包装破损或超期应停止使用。

04）工作原理

D－PBS以磷酸盐体系维持pH，以氯化钠维持渗透压，含少量磷酸二氢钾／磷酸氢二钠等成分，用于细胞或组织洗涤。无钙镁版本去除Ca2＋、Mg2＋后，可减少细胞间钙依赖、镁依赖黏附，便于在胰酶／EDTA消化前清洗残留培养基。其等渗环境可短期维持细胞形态，但不替代培养基提供氨基酸、血清与能量代谢支持。

05）使用方法

01）贴壁细胞传代：吸去旧培养基，加入适量1X D－PBS（－），轻摇润洗后吸去，可重复1次。

02）胰酶消化前尽量去除残余血清，因为血清中的酶抑制剂会影响胰酶效率；具体洗涤次数按细胞类型调整。

03）流式或免疫染色前洗涤：用1X D－PBS重悬细胞，离心弃上清，重复洗涤以去除培养基蛋白。

04）10X 11482－15使用时按标签比例用纯水稀释，混匀后用于常规洗涤；若实验要求无菌，使用无菌分装并避免交叉污染。

05）如后续需要维持细胞黏附或进行钙相关信号实验，应改选含钙镁D－PBS或其他平衡盐溶液，不应以无钙镁产品替代。

▎04 解决实验中哪些问题

01）蛋白提取不完整、批间差异大

自行配制RIPA或裂解液可能出现盐浓度、去污剂比例、pH偏差。使用Cell Lysis Buffer 22352－04／22353－81可按固定配方提取总蛋白，减少配制误差；10X加独立SDS更适合需要控制变性强度的IP、Co－IP流程。

02）Western Blot背景高、封闭耗时长

脱脂奶封闭时间长，且不同批次、脂肪含量、过滤状态会影响背景。Bullet Blocking One 13779－14可用于缩短封闭步骤，并通过统一封闭介质降低背景波动；对荧光、化学发光系统可分别做抗体稀释比优化。

03）细胞洗涤造成消化受影响

用含Ca／Mg缓冲液洗细胞后再加胰酶，可能降低消化效率。D－PBS（－）14249－95／14249－24可去除钙镁，减少胰酶抑制；10X 11482－15适合大实验室集中配液。

04）缓冲液污染导致细胞状态下降

常规自配PBS若过滤不够，可能带入细菌、支原体。Nacalai部分D－PBS产品标注0.2μm过滤及微生物、内毒素检测，可用于对污染控制要求较高的原代细胞、药理学细胞实验前期洗涤。

05）免疫检测流程环节不匹配

从裂解、电泳、转膜、封闭到抗体反应若分别采用不同品牌、不同批号试剂，问题排查成本增加。Nacalai Bullet系列、Cell Lysis Buffer、化学发光底物可按实验模块组合，由特约代理统一报价与备货。

▎05 购买本品牌产品的常见疑问与解答

01）问：如何确认某个Nacalai产品货号是否当前在售？

答：可提供拟用产品名称、应用场景、包装规格给上海起发实验试剂有限公司，由工作人员对照Nacalai目录、当期可用货号及替代规格核实。若原货号停产，会按同用途产品推荐替代方案，如不同包装的D－PBS、1X／10X裂解液、不同规格Bullet封闭液。

02）问：进口试剂货期大概多久？

答：货期受货号、包装、日本库存、报关及冷链要求影响。常规目录小包装如D－PBS、Bullet Blocking One、Cell Lysis Buffer如国内有备货可较短周期发货；非常规规格、大包装、定制产品需按进口采购周期确认。询价时建议同时提供预计用量与到货时间要求。

03）问：冷藏、冷冻产品运输如何保障？

答：按产品存储标签分常温、冷藏、冷冻发运。冷藏产品使用保温箱与冷媒，冷冻产品按冷冻链包装；到货后应立即按标签温度入库。若收货时发现温控记录异常、包装破损、液体泄漏，应保留外箱与照片并联系上海起发实验试剂有限公司处理。

04）问：D－PBS有多个货号，应如何选？

答：看三点：是否含Ca／Mg、1X还是10X、液体还是粉末。消化前洗贴壁细胞常用无钙镁1X，如14249－95；大批量配液可用10X 11482－15；需要含钙镁维持黏附则另选D－PBS（＋）相关货号。不要仅按“PBS"简称下单，应注明D－PBS、离子组成和包装。

05）问：Bullet Blocking One能否代替所有WB封闭液？

答：它面向Western Blot设计，资料示例约5分钟封闭，并可作为部分抗体稀释介质。若使用特殊膜、低丰度蛋白、磷酸化蛋白或特定荧光系统，仍建议做一抗稀释比、封闭时间对照。不能用同一产品替代免疫组化专用封闭液，IHC／IF应另选对应Nacalai封闭产品。

06）问：Cell Lysis Buffer做IP或Co－IP是否合适？

答：1X版本可用于总蛋白提取；10X版本因SDS分开包装，便于在共沉淀中控制变性剂加入量。若研究蛋白－蛋白相互作用且希望保留复合体，应先做小量预实验，必要时配合非变性裂解条件、低温操作和蛋白酶抑制剂。强膜蛋白、核蛋白可评估更强去污剂或分级裂解方案。

07）问：产品到货后标签是日文或英文，如何核对？

答：以上海起发实验试剂有限公司发货单、货号、批号、规格、存储条件对照瓶身标签。若名称翻译不一致，以货号与原厂目录信息为准；实验记录建议同时登记英文品名与货号，便于复购和论文材料方法部分撰写。

08）问：小试、课题初期用量少，能否买小包装？

答：可优先选择200mL封闭液、100mL裂解液、500mL D－PBS等小规格；如目录无更小包装，可咨询上海起发实验试剂有限公司是否有试用装、分装政策或同用途小包装替代。分装须在无菌、按标签温度条件下进行，并避免多次冻融。

09）问：内毒素、支原体检测要求如何确认？

答：细胞培养类平衡盐、部分补充物会在目录或COA中列检测项目。下单前可向上海起发实验试剂有限公司索取批次检测概要；对iPS、原代、免疫细胞等敏感体系，应在采购单中注明“需要内毒素／支原体检测资料"。

10）问：出现到货错误、漏发、破损如何售后？

答：保留物流外包装、箱单、照片和产品批号，向上海起发实验试剂有限公司提交货号、数量、异常描述。冷藏冷冻产品如到货温控异常，不自行继续使用；经核实属运输或发货问题的，按补发、换货或协商处理流程办理。

11）问：发票、合同与进口资料怎么处理？

答：可按机构采购要求开具相应发票与合同。进口产品可结合清关和原厂资料提供批次信息；具体可提供的检验、安全资料范围在询价时确认，避免到货后再补充影响报销与审计。

12）问：能否一次性配齐WB整体试剂？

答：可以。按样本类型、目标蛋白分子量、一抗种属和检测系统，由上海起发实验试剂有限公司整理裂解液、预制胶、转膜液、Bullet Blocking One、二抗、化学发光底物货号清单，减少分批采购造成的兼容问题。

▎06 采购服务说明

上海起发实验试剂有限公司作为日本Nacalai生物公司特约代理经销商，可提供以下对接：

01）Nacalai目录查询：按实验类型查找D－PBS、HBSS、细胞培养补充物、Cell Lysis Buffer、Bullet系列、标签抗体、色谱柱等货号。

02）报价与库存确认：区分国内备货、日本订货、进口周期，按用户课题进度排单。

03）技术选型：协助判断1X／10X缓冲液、无钙镁／含钙镁、1X裂解／10X裂解、5分钟封闭液与传统封闭液差异。

04）冷链发货：按冷藏、冷冻、常温分类包装，提供到货验收建议。

05）售后追溯：以货号、批号、瓶身标签、发货单对照处理异常。

Nacalai品牌、货号与实验方案信息以原厂当期目录、产品说明书及COA为准；不同批次标签、包装容量、存储缩写可能调整，采购与实验前应以实物标签为准。

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更多产品信息，请联系中国区域代理商：上海起发实验试剂有限公司

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

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