Worthington Biochemical Corporation酶制剂与生化试剂品牌及代理商介绍

❖ 前言

上海起发实验试剂有限公司是Worthington Biochemical Corporation（商标：Worthington）授权代理商，供应其酶类与生化产品。本文介绍胶原酶、脱氧核糖核酸酶I、木瓜蛋白酶等热门货号及实验应用。

📌 下图为上海起发实验试剂有限公司作为美国Worthington Biochemical Corporation授权代理商的授权书

1. 品牌与产品定位

Worthington Biochemical Corporation 专注纯化酶、蛋白质、核酸相关试剂以及细胞分离系统，产品用于原代细胞分离、组织解离、蛋白质研究、核酸处理、生物工艺与诊断支持。其产品组合覆盖胶原酶、胰蛋白酶、弹性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、溶菌酶、蛋白激酶、氧化酶及多种解离系统。

在科研场景中，Worthington 提供按活性单位、纯度等级、来源和过滤状态区分的酶制剂；在生物工艺场景中，提供无动物源、低内毒素、可放大供应的部分产品。产品以冻干粉、溶液、试剂盒等形式交付，部分品线带 SequENZ®、STEMxyme®、PDS、NCIS 等专用名称，便于按实验目的匹配。

2. 热门产品介绍

2.1 胶原酶 Type 4 Filtered｜货号 LS004210／LS004212

品名：Collagenase，Type 4，Filtered

规格示例：LS004210 为 50 mg 瓶装；LS004212 为 5×50 mg 组合装。

产品特点：采用溶组织梭菌来源胶原酶，经 0.22 μm 过滤后以冻干粉形式分装；Type 4 标注活性不低于 160 CLS 单位/mg 干重，适合对活性稳定性和杂质分布有要求的组织解离。与未过滤常规胶原酶相比，过滤型可减少微粒污染风险，便于直接配制无菌消化液。

存储条件：2—8℃避光保存；冻干粉避免受潮，复溶后如需留存可分装冷冻，避免反复冻融。

工作原理：胶原酶水解天然胶原三股螺旋中的肽键，尤其对 Gly‑Pro‑Y 等序列具有作用；组织中常配合中性蛋白酶、透明质酸酶、弹性蛋白酶等共同破坏细胞外基质。Worthington 胶原酶同时含有一定次级蛋白酶活性，不同 Type 的胶原酶单位、酪蛋白酶单位和杂质比例不同，因此选型时应以目标组织的胶原含量、细胞类型和消化耐受性为依据。

使用方法：

1）取平衡盐溶液或指定缓冲液配制工作浓度，常用范围需按组织类型、细胞密度和预实验确定。

2）胶原酶可直接溶于 Hanks、Earle 等平衡盐溶液，建议经 0.22 μm 滤膜除菌。

3）工作液 pH 可控制在 7—9 区间，37℃孵育；组织块消化可设 30 分钟至数小时，悬浮细胞低密度消化可缩短时间。

4）消化结束后用含血清培养基或酶抑制剂终止，离心洗涤后重悬计数。

5）未用完复溶液分装冻存，避免同一管多次冻融。

2.2 脱氧核糖核酸酶 I，RNase & Protease Free，Solution｜货号 LS003744

品名：Deoxyribonuclease I，RNase & Protease Free，Solution

规格示例：LS003744 为溶液型、500 单位装。

产品特点：该规格面向分子生物学与原代解离配套使用，低核糖核酸酶、低蛋白酶背景，可减少 DNA 消化过程中对 RNA 与蛋白靶标的二次影响。与常规 DNase 相比，溶液型免去了自行复溶的配比误差，适合与胶原酶、木瓜蛋白酶等联合使用。

存储条件：按产品标签执行；同类 Worthington DNase 冻干品通常可 2—8℃短期存放，长期液体保存可采用合适缓冲体系并分装至 -20℃或 -70℃，避免反复冻融。含 50% 甘油的液体可在 -20℃保持流动性，具体以 LS003744 说明书为准。

工作原理：脱氧核糖核酸酶 I 为核酸内切酶，可切断双链 DNA 磷酸二酯键，降低裂解液或消化后体系的黏稠度。牛胰腺来源 DNase I 最适 pH 接近 7.8，活性受 Mg²⁺、Ca²⁺促进，受 EDTA、SDS 等抑制；因此在组织解离中加 DNase，可降解破损细胞释放的 DNA，减少细胞团和滤网堵塞。

使用方法：

1）若与组织消化酶联用，按体系体积加入适量 DNase I，使释放 DNA 被持续降解。

2）分子生物学提取 RNA 时，可在裂解后加入该酶降低 DNA 污染；具体单位与目标 DNA 量、反应体积匹配。

3）复溶或稀释使用非磷酸缓冲体系时需参照货品说明；避免强螯合剂长时间共存。

4）轻轻混匀，避免高速涡旋造成剪切变性；分装后低温保存。

5）终止可采用热失活、EDTA 或纯化柱去除，按下游 PCR、电泳、建库要求选择。

2.3 木瓜蛋白酶，Lyophilized／Papain Dissociation System｜单酶货号 LS004798，系统货号 LS006344

品名：Papain，Lyophilized；系统名 Papain Dissociation System，简称 PDS

规格示例：单酶 LS004798 为 25 mg 冻干粉；PDS 系统 LS006344 为 3 盒装解离系统，含平衡盐、激活剂与相关组分。

产品特点：木瓜蛋白酶提取自番木瓜乳胶，属半胱氨酸蛋白酶，对多种肽键具有水解能力。相较胰蛋白酶，其在加入 L‑半胱氨酸等激活剂后可用于神经元、视网膜、平滑肌等较脆弱组织的解离；PDS 系统将盐溶液、激活剂、酶粉和终止组分配套，减少逐瓶配制偏差。

存储条件：冻干粉 2—8℃保存，避免吸潮；复溶后按说明分装冷冻，避免反复冻融。PDS 各组分按盒内标签分别存放，含 EBSS 的组分按系统说明保存。

工作原理：木瓜蛋白酶通过巯基活性中心水解细胞间蛋白基质中的肽键；在 L‑半胱氨酸、EDTA 等存在下保持还原环境，最适 pH 约 6.0—7.0。它可破坏黏连蛋白与部分细胞外蛋白，使组织分散为单细胞或小块细胞簇，同时较利于保留部分膜受体完整性。

使用方法：

1）单酶配制：以选定平衡盐溶液溶解木瓜蛋白酶，加入 1 mM L‑半胱氨酸、0.5 mM EDTA 等激活/稳定组分；常用工作浓度可按 20 单位/mL 左右预试，最终以组织类型调整。

2）PDS 系统：按盒内流程取 EBSS 重悬酶与激活剂，37℃预孵使酶活化。

3）组织切片或小块加入工作液，37℃轻微摇晃消化；神经元类可设 30—60 分钟观察，致密组织可适当延长。

4）消化中用移液器轻柔吹打，过筛后加含血清培养基或系统终止液中止。

5）离心洗涤、台盼蓝计数；后续用于贴壁培养、流式分选或电生理前处理。

3. 可解决的实验问题

3.1 原代组织解离不充分

肝、脂肪、心脏、肿瘤、肺等组织胶原与基质成分不同。单用胰蛋白酶常对胶原作用有限；胶原酶 Type 4 可针对胶原基质进行水解，配合 DNase 降低核酸黏度，提高单细胞得率。

3.2 消化后细胞结团、滤网堵塞

组织机械破碎后，破损细胞释放 DNA 会增加液相黏度并形成网状团聚。DNase I LS003744 可将游离 DNA 降解，改善滤过效率，减少原代细胞损失。

3.3 神经元与脆弱组织损伤大

胰酶短时消化可对部分贴壁细胞适用，但对中枢、视网膜、背根节细胞易造成膜蛋白影响。木瓜蛋白酶配合半胱氨酸激活，可在弱酸性至中性区间逐步解离，降低机械吹打次数。

3.4 分子提取中核酸交叉降解

RNA 提取时若 DNase 含 RNase 杂酶，会导致 RNA 降解；蛋白研究若 DNase 含蛋白酶杂酶，会影响免疫沉淀、质谱样品。LS003744 低 RNase、低蛋白酶定位，可适配核酸与部分蛋白共处理流程。

3.5 工艺放大时酶批差明显

科研小试转生物工艺时，酶活性、内毒素、动物源因子需统一管理。Worthington 提供无动物源胶原酶、部分过滤型与特定纯度等级产品，可按工艺验证要求索取活性报告与质控文件。

4. 购买与使用常见疑问

4.1 胶原酶 Type 1—Type 5 及 Purified 有何区别，如何选货号？

主要区别在 CLS 胶原酶单位、次级蛋白酶、过滤状态和来源处理。Type 4 Filtered 用 LS004210／LS004212，适合对微粒和活性一致性有要求的原代解离；其他类型按组织胶原密度、伴生蛋白酶需求和预实验数据替换。选型时应提供组织种类、目标细胞、消化温度和终浓度范围。

4.2 DNase I 溶液与冻干装如何选？

LS003744 为溶液型，适合直接加入解离体系或核酸裂解液，减少复溶误差；冻干装如 LS02122 等可按大体积配制，但需按说明选择醋酸盐、水或专用缓冲液。若下游对 RNase、蛋白酶背景敏感，应优先选 RNase & Protease Free 等级并核对COA。

4.3 木瓜蛋白酶单独买与买 PDS 系统有何差别？

LS004798 单酶适合已有平衡盐、半胱氨酸、EDTA 配方的研究者；LS006344 的 PDS 系统提供配套组分，可缩短方法建立时间，适合神经元、视网膜等需要重复配方的实验。若仅做普通组织预试，单酶更灵活；若建立固定解离SOP，系统更稳定。

4.4 冻干粉开封后如何避免失活？

从 2—8℃取出后先恢复至室温再开瓶，避免冷凝水进入；用无菌、低颗粒物缓冲液复溶，经 0.22 μm 过滤后分装；复溶液不长期放 2—8℃，建议按酶种执行 -20℃或 -70℃分装，避免多次冻融。弹性酶、胶原酶、DNase 均应按各自说明处理。

4.5 无动物源产品是否可用于细胞治疗工艺？

Worthington 部分无动物源胶原酶、重组或发酵来源酶可提供动物源因子、内毒素及微生物检测资料；但是否用于临床、细胞治疗或转临床工艺，需结合申报要求、工艺验证、批次文件和法规审核确定，不能仅凭科研级标签直接使用。

4.6 酶活单位不同厂家不通用怎么办？

胶原酶存在 Mandl、Wunsch 等不同单位体系；Worthington 对 CLS 单位、酪蛋白酶单位分别标注。跨品牌替换时不应只看毫克数，应以目标组织消化时间、细胞存活率、杂质蛋白酶活性和文献浓度做平行对照。

4.7 组织解离加 DNase 是否影响后续转染或测序？

按推荐单位加入并终止、洗涤，通常不会残留足以影响转染的 DNA 片段。RNA 测序前若用 DNase 去基因组污染，应热失活或柱纯化去除酶蛋白，并做无酶对照、核糖体RNA 比例与 DNA 污染检测。

4.8 弹性酶是否必须与胶原酶联用？

不一定。弹性酶 ESFF 等纯品可单独处理弹性蛋白丰富组织；肺、血管类常将弹性酶与胶原酶、DNase 搭配。联用比例、pH 与孵育时间需按组织块大小预试，弹性酶在中性和高浓度下溶解性较差，可通过调节离子强度、pH 与逐步稀释改善。

4.9 订购前需要提供哪些信息以获得选型建议？

建议提供组织来源物种、组织类型、目标细胞、解离方式、培养体系、是否需要无动物源、内毒素上限、规格毫克数或单位数、预计批次数量。上海起发实验试剂有限公司作为授权代理商，可据此匹配 Worthington 对应货号与COA资料。

4.10 产品到货后活性与既往批次不一致如何处理？

先核对存储温度、到货时长、复溶缓冲液和过滤方式；再用标准底物法复测胶原酶、DNase 或蛋白酶单位。若与COA偏差超出接受范围，保留批号、发票、运输温控记录并联系售后，按授权代理流程申请技术复核或换批。

5. 实验选型建议

组织解离类项目可按以下顺序整理需求：先确定组织胶原、弹性蛋白、基质蛋白占比；再确定目标细胞对膜蛋白、受体、表面标志的要求；最后确定后续是培养、流式、类器官、单细胞测序还是蛋白提取。胶原酶负责胶原框架，DNase 负责降黏度，木瓜蛋白酶与中性蛋白酶适合温和解离，弹性酶补充弹性纤维水解，胰蛋白酶适合多数上皮细胞短时消化。

对科研常规课题，LS004210／LS004212、LS003744、LS004798／LS006344 三者可覆盖多数原代解离、RNA 提取前处理、神经元解离需求。对工艺项目，可进一步评估无动物源胶原酶、过滤型规格、低内毒素 DNase 与定制活性批次。

6. 质量与合规说明

Worthington 酶制剂按ISO9001体系组织生产与质控，具体产品提供活性单位、纯度等级、来源、内毒素或微生物检测项以COA为准。科研试剂通常不直接作为临床药物或治疗产品使用；进入细胞治疗、疫苗、体外诊断试剂生产前，应根据工艺风险、杂质可接受和监管要求完成验证。

采购时应确认货号、规格、保存条件与运输包装。冻干酶避免高温与湿度；需冰袋或冷藏运输的品种应按代理方提示接收；需冷冻保存的复溶液分装后标注批号与日期，建立实验室酶库存台账。

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更多产品信息，请联系中国区域代理商：上海起发实验试剂有限公司

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）