Echelon Biosciences Inc（EBI）脂质检测方案与特约代理经销商介绍

▎前言

上海起发实验试剂有限公司作为 Echelon Biosciences Inc.（EBI）特约代理经销商，面向国内科研用户提供 PIP Strips™、鞘脂检测与磷酸肌醇活性试剂盒等产品咨询与供货支持。本文围绕 EBI 商标体系与实验应用，整理常用货号、原理、存储及操作要点，便于实验室选型。

一、公司介绍

Echelon Biosciences Inc.（简称 EBI）专注于脂质信号、磷酸肌醇、鞘脂代谢及相关检测试剂研发。产品覆盖蛋白-脂质互作筛查、第二信使定量、激酶活性测定、脂质标准品、包被板与纳米脂质研究材料等多个方向。

EBI 已形成若干具辨识度的商标与产品系列，包括 PIP Strips™、PIP Array™、COVA PIP™、Shuttle PIP™、SphingoStrips™、Select-HA™ 等。其技术资料通常提供货号、规格、存储条件、操作协议与质量控制说明，适用于细胞生物学、生物化学、药理学、代谢研究和药物筛选等场景。

在脂质研究场景中，EBI 提供从“脂质点阵筛查"到“定量试剂盒"再到“激酶活性评价"的连续工具。科研人员可根据样本类型、目标分子与通量需求选择相应产品，减少自建脂质斑点、标准曲线和检测体系的时间成本。

二、热门产品介绍

2.1 PIP Strips™｜货号 P-6001

① 品名与定位  

产品名称：PIP Strips™。货号 P-6001。用于蛋白-脂质重叠杂交实验，筛查目标蛋白与多种磷酸肌醇及其他膜脂的结合特征。

② 产品特点  

膜条尺寸约 2 cm × 6 cm，疏水膜上点印 15 种脂质，每点约 100 pmol。包含全部八种磷酸肌醇以及 LPA、LPC、PC、PE、PA、PS、S1P 等常见膜脂，并设蓝色空白对照。膜左上角斜切、右下角蓝点辅助定位，脂质点以 Ponceau S 呈粉红标记。10 包装通常附带阳性对照用结合蛋白，便于方法建立。

③ 存储条件  

存储温度 2-8℃。产品对湿度和光照敏感，应原包装密封保存，避免长期暴露空气与强光。到货后按技术资料确认批号与保存状态。

④ 工作原理  

将膜条封闭后，加入待筛蛋白或带标签融合蛋白，目标蛋白若与膜上固定脂质具有亲和力，可在对应点位结合。经洗涤后，使用针对目标蛋白或标签的 HRP 偶联二抗孵育，再次洗涤，最后用沉淀型 TMB 或 ECL 发光底物显色成像。通过斑点信号位置可判断蛋白对特定磷酸肌醇或其他脂质的结合倾向。

⑤ 使用方法  

･ 取出 PIP Strips™，避免用手直接接触点样区。  

･ 用适当封闭液处理膜条，降低非特异性吸附。  

･ 加入纯化蛋白、细胞裂解液或表达产物，按目标蛋白浓度进行孵育。  

･ 洗涤去除未结合蛋白。  

･ 加入 HRP 标记一抗/二抗或抗标签抗体，孵育并洗涤。  

･ 使用 ECL 或沉淀型 TMB 显色，按成像系统记录结果。  

･ 初次筛选可先用随附阳性对照验证膜条、抗体和显色流程。

2.2 Sphingosine 1-Phosphate ELISA Kit｜货号 K-1900

① 品名与定位  

产品名称：Sphingosine 1-Phosphate Assay Kit，简称 S1P ELISA。货号 K-1900，96 次测试。用于生物样本中 1-磷酸鞘氨醇 S1P 的定量检测。

② 产品特点  

提供 S1P 包被微孔板、抗 S1P 抗体、S1P 标准品、去脂血清、封闭液、PBS 片、稀释缓冲液、链霉亲和素-HRP、TMB 底物与终止液等组分。适用于血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解等样本类型的 S1P 浓度测定，可与鞘脂代谢、炎症、血管生物学等课题配套。

③ 存储条件  

试剂盒整体存储于 -20℃。重组或已开瓶溶液稳定性会下降，应按技术资料分区保存。标准品为冻干粉，抗体与酶结合物避免反复冻融；微孔板按说明书防潮避光存放。

④ 工作原理  

采用微孔板免疫检测流程。将样本与 S1P 抗体混合，使样本内 S1P 与包被在板上的 S1P 发生竞争或结合平衡；随后将混合物转入已封闭的 S1P 包被板孵育，洗去未结合成分；加入链霉亲和素-HRP，再通过 TMB 显色、终止液停止反应，于 450 nm 读取吸光度。利用 S1P 标准曲线计算样本浓度。

⑤ 使用方法  

･ 按需要配制 PBS、洗涤液与试剂工作液。  

･ 将 S1P 标准品复溶并做倍比稀释，建立标准曲线。  

･ 样本根据基质类型进行提取或预处理，血清类样本可结合去脂血清降低基质影响。  

･ 将样本与抗 S1P 抗体加入孵育板混合，随后转移至已封闭的包被微孔板。  

･ 室温孵育后洗涤，加入链霉亲和素-HRP，孵育并洗涤。  

･ 加入 TMB 底物，室温显色约 30 分钟，加入终止液。  

･ 用酶标仪读取 450 nm 吸光度，按标准曲线反算 S1P 浓度。  

･ 建议每样本设复孔，基质复杂时做回收率与稀释线性验证。

2.3 Luminescent PI3-Kinase Activity Assay｜货号 K-1300

① 品名与定位  

产品名称：Luminescent PI3-Kinase Activity Assay。货号 K-1300，500 次测试。用于 PI3K 将 PI(4,5)P2 转化为 PI(3,4,5)P3 的活性检测，适合信号通路研究与化合物筛选。

② 产品特点  

套装包含 PI(4,5)P2 底物 K-1301、PI(3,4,5)P3 标准 K-1302、PIP3 检测器 K-1303、生物素化 I(1,3,4,5)P4 K-1305 等组分。采用均相接近发光检测，免放射性、免薄层层析，可适配 384 孔白板与具备 AlphaScreen 功能的读板机。

③ 存储条件  

到货后整体存储于 -20℃。部分组分对光敏感，应避光保存。重组后溶液稳定性低于原装冻存状态，避免多次冻融；具体分装与保存期限以对应技术资料为准。正常存储条件下自收货起稳定性不少于 6 个月。

④ 工作原理  

PI3K 催化 PI(4,5)P2 底物磷酸化生成 PI(3,4,5)P3。检测体系通过生物素化 I(1,3,4,5)P4 与 PIP3 检测器蛋白竞争结合产物，再加入链霉亲和素供体微珠与可接受信号微珠。接近发生时，供体微珠受 680 nm 激发产生单线态氧，激活受体微珠发出放大信号。PI3K 活性越高，PIP3 产物越多，检测信号随之变化。

⑤ 使用方法  

･ 配制 PI3K 反应缓冲液、检测缓冲液与所需酶源。  

･ 将待测化合物、PI3K 酶与 K-1301 PI(4,5)P2 底物加入白板孔中。  

･ 室温孵育约 1 小时，使底物转化。  

･ 加入生物素化 I(1,3,4,5)P4 工作液，再按protocol加入 PIP3 检测器。  

･ 加入 donor 与 acceptor beads，避光室温孵育约 1 小时。  

･ 用 AlphaScreen 模式读板，结合标准 K-1302 建立产物量或相对活性曲线。  

･ 进行抑制剂评价时设置空白、阳性对照与浓度梯度，控制底物饱和条件。

三、解决实验中哪些问题

① 蛋白与哪种脂质结合不明确  

很多 PH 结构域、PX 结构域、ENTH 结构域及信号蛋白对特定磷酸肌醇有选择性。使用 P-6001 可在同一膜条上并行筛查多种 PI、PIP、PIP2、PIP3 及 S1P、LPA、PA、PS 等膜脂，快速缩小候选脂质范围。

② S1P 样本浓度难以稳定定量  

血清、血浆和组织样本中 S1P 受蛋白结合、提取效率和基质效应影响。K-1900 提供包被板、标准品与去脂血清体系，可建立重复性的酶标定量流程，用于鞘脂代谢、疾病模型与药物干预比较。

③ PI3K 活性检测依赖放射性或层析  

传统方法涉及³²P 标记、有机溶剂提取与 TLC 分离。K-1300 以均相发光替代放射性操作，减少废液与分离步骤，更适合常规实验室和中等通量筛选。

④ 脂质标准与互作阳性对照不足  

EBI 提供单个磷酸肌醇标准、脂质点阵、包被板及部分结合蛋白对照。科研人员在建立自身方法时，可用标准脂质验证抗体、探针和纯化蛋白活性。

⑤ 激酶筛选方法转换成本高  

若从放射法转向非放射均相法，K-1300 的模块化组分可与外加 PI3K 酶、缓冲液和微孔板配套，逐步替换原有流程，并保持底物、标准与检测器的一致性。

四、购买与使用常见疑问解答

① 产品是否可用于临床诊断？  

EBI 相关试剂按技术研究用途提供，不用于诊断、治疗或人体直接应用。购买与实验设计应以产品技术资料中的用途说明为准。

② 脂质试剂盒到货后如何确认存储？  

每类产品存储温度不同：PIP Strips™ P-6001 为 2-8℃避湿避光；S1P ELISA K-1900 与 PI3K 发光 K-1300 多为 -20℃；单体脂质按对应技术资料保存。到货后应核对名称、货号、批号与温度状态，按原包装条件转入实验室冰箱或低温设备。

③ 蛋白-脂质筛查没有信号怎么办？  

先检查膜条是否完整、封闭是否充分、目标蛋白浓度与缓冲体系是否合适；再用随附阳性对照验证二抗、HRP 与显色底物。若使用自身抗体，应确认其可识别变性或膜固定状态下的标签/表位。对于弱亲和蛋白，可提高蛋白量、延长孵育或调整洗涤强度。

④ S1P ELISA 标准曲线异常如何处理？  

检查标准品复溶体积、倍比稀释精度、包被板封闭效果与 TMB 显色时间。血清样本若存在基质干扰，可使用去脂血清、做样本稀释并跑回收率。读值前保证终止液加入顺序一致，酶标仪 450 nm 参数按仪器校准。

⑤ PI3K 发光信号偏低如何优化？  

确认底物 K-1301、标准 K-1302、检测器 K-1303 与生物素化 IP4 K-1305 未过期；检查酶源活性、Mg/ATP 等反应条件、beads 避光孵育时间以及读板机 AlphaScreen 设置。信号过低时可优化底物浓度、酶反应时长或微珠比例。

⑥ 脂质标准品溶解困难怎么处理？  

磷酸肌醇类可尝试涡旋、短时水浴超声，必要时使用少量甲醇、乙醇或 DMSO 助溶后转入水相缓冲。避免含磷酸盐不适合的体系影响载体复合；具体溶剂应以对应技术资料为准。分装后 -20℃保存，减少反复冻融。

⑦ 脂质体或脂质悬浮液如何保存？  

水相重构脂质体一般可 4℃短期保存，尽量接近中性 pH；避免冻结，冻融可能导致粒径分布改变和包封物泄漏。含不饱和链的脂质更易氧化，应避光、控温并评估抗氧化措施。

⑧ 抗体适用于哪些检测？  

EBI 脂质抗体可用于部分 ELISA、点阵、免疫检测等应用，但是否适用于 Western blot、免疫细胞化学或流式，应以具体产品页和应用验证为准。购买前应确认目标脂质、物种宿主、克隆信息和推荐稀释比例。

⑨ 技术资料与质控文件如何获取？  

每类产品通常提供 Technical Data Sheet、操作协议与 FAQ。对纯度、批检、SDS 有要求时，可向上海起发实验试剂有限公司在合规范围内申请资料清单，按所购货号匹配对应文档。

⑩ 到货后发现问题如何沟通？  

发现包装破损、温度异常、名称货号不符或性能不达标，应保留原始包装与接收记录，及时通过特约代理渠道反馈。按供应商退货、换货与复检流程处理，不自行修改产品状态后继续使用。

五、选型建议

･ 初筛未知蛋白脂质结合：优先 P-6001 PIP Strips™，可一次观察多种 PI 与常见膜脂。  

･ 定量血清或组织 S1P：选择 K-1900 S1P ELISA，建立标准曲线与基质对照。  

･ 评价 PI3K 抑制剂或信号激活：选择 K-1300 发光活性试剂盒，配合底物、标准与检测器做相对活性分析。  

･ 高通量蛋白-脂质结合：可进一步了解 COVA PIP™ 包被板、PIP Array™ 点阵及其他脂质 beads，但应根据通量与检测方式确认兼容设备。

所有产品均以技术研究为使用目的。实验设计阶段应结合样本类型、目标分子浓度范围、仪器条件和重复次数确定货号规格，并提前核对技术资料中的存储、安全与废弃处理要求。

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更多产品信息，请联系中国区域代理商：上海起发实验试剂有限公司

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

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