陕西普罗安蒂生物科技发展有限公司PROANDY免疫印迹试剂与货号选型

陕西普罗安蒂生物科技发展有限公司（简称普罗安蒂，英文标识PROANDY）的免疫印迹试剂，围绕蛋白电泳到显影之间几个容易卡住的环节展开：转膜后是否还要封闭一小时、跨度大的蛋白如何共用一块胶、染色后是否必须脱色过夜。本文按货号拆解抗体稀释液、PAGE凝胶制备试剂盒与蛋白染色液，给出可对照的操作参数与保存条件。

一、公司与业务介绍

1、业务范围与产品线构成

陕西普罗安蒂生物科技发展有限公司（简称普罗安蒂，PROANDY）面向生命科学实验室的蛋白与抗体研究，提供试剂产品与委托技术服务两类供给。试剂端覆盖重组蛋白、抗体、免疫印迹试剂、质粒以及核酸提取与qPCR等分子生物学产品，服务端承接抗原设计、蛋白表达、抗体制备与纯化、抗体标记、检测试剂盒研发。

目前，产品线沿三个方向展开：抗体与重组蛋白表达产品、免疫印迹相关产品、质粒平台。免疫印迹方向按电泳、转膜、抗体孵育、显影、染色的顺序配置，制胶试剂盒、抗体稀释液、封闭液、洗膜液与ECL发光试剂可以单独取用，也可以按实验阶段组合。

重组蛋白方向提供带His、GST、Nus等不同标签的蛋白，以及链霉亲和素、Protein L等常用品种，标签抗体与内参抗体另设目录。质粒方向提供人、小鼠、大鼠来源的质粒，供转染与表达实验选用。

2、质量管理与批次追溯

免疫印迹试剂的研发与配制在分子、蛋白及细胞培养实验室中完成，研发团队由博士带队，配方与操作参数随说明书固化。每支产品标签标注货号、批号与保存温度，说明书列明组分、操作步骤和效期，实验记录可据此回到具体批次。

同一货号在不同包装规格之间保持同一配方，差异只体现在装量与取用便利性上。规格变化不影响操作步骤，按说明书比例换算即可。

3、与授权代理商的合作

上海起发实验试剂有限公司是普罗安蒂的授权代理商，国内科研用户的订购、备货与配送衔接由该代理商完成。品牌方负责产品资料与技术口径，代理商负责订单与物流，用户在两者之间按环节对接。

下单前核对货号与包装规格，库存与发货安排以代理商的确认结果为准。这一分工也让技术问题与商务问题各自有明确的受理方。

二、热门产品介绍

1、10541-1｜免封闭-超快通用型抗体稀释液

①、品名与货号：品名为免封闭-超快通用型抗体稀释液，100mL规格货号10541-1，500mL规格货号10541-2。这是免疫印迹流程中与抗体孵育直接相关的一支即用型试剂。

②、产品特点：转膜后不需要封闭，直接稀释抗体孵育；一抗10min、二抗10min；配方中含抗体结合反应增强成分；不含磷酸盐、叠氮钠或硫柳汞类防腐剂；无动物源性蛋白。

③、存储条件：2-8℃保存，效期1年。取用后盖紧放回冷藏，避免长时间置于室温。

④、工作原理：以高分子复合原料为基础，配合抑制非特异性结合的成分，降低抗体与膜之间的吸附，让封闭与抗体孵育合并为一步。抗体与抗原的特异性结合由增强成分支撑，因此省去封闭环节后仍能保持信噪比。

⑤、使用方法：转膜后用1×TBST浸没印迹膜漂洗30秒，直接用本品按合适倍数稀释一抗，孵育10min；TBST洗3次，每次5min；二抗孵育10min后同样洗涤，ECL曝光。稀释后的抗体可回收再用。

⑥、适用检测场景：主要用于Western Blot，适合样本量较大、当天需要出结果的实验，也适合抗体用量需要控制的场景。酶标二抗的稀释液4℃可放约1个月，一抗可更长，但不能把本品当作抗体的长期保存液。

2、10621-1｜色彩标记一步法通用型PAGE凝胶制备试剂盒（10-250KD）

①、品名与货号：品名为色彩标记一步法通用型PAGE凝胶制备试剂盒，货号10621-1，规格125T。试剂盒内含下层胶溶液、下层胶缓冲液、上层胶溶液、彩色上层胶缓冲液与改良过硫酸铵溶液。

②、产品特点：单一配方覆盖10-250kDa，低、中、高分子量蛋白可均匀分布，条带形态接近梯度胶，不必按分子量分别选胶浓度；上层胶带颜色，点样孔清晰；预混配方加改良型促凝剂即可凝胶，不需要另加TEMED。

③、存储条件：常温运输，4℃保存；改良型促凝剂单独置于-20℃，保质期12个月。已开盖的促凝剂可放4℃保存至少三个月。

④、工作原理：上层胶与下层胶均为预混溶液，过硫酸铵在体系内引发丙烯酰胺聚合，形成凝胶网络。上层胶不含浓缩能力，只承担上样通道作用，分离效果由下层胶决定。

⑤、使用方法：取等体积下层胶溶液与下层胶缓冲液混匀，按0.75/1.0/1.5mm胶厚分别加入40/60/80μL促凝剂，注入玻璃板；再取等体积上层胶溶液与彩色缓冲液混匀，加10/15/20μL促凝剂，无需等下层胶凝固即可灌入并插梳，约15min凝固后拔梳电泳。

⑥、适用检测场景：变性蛋白电泳、native PAGE、Western Blot、明胶酶谱以及免疫沉淀后样品的分离。150V恒压约55min完成电泳，200V约35min，具体时间随电泳仪不同而变。

3、10138-2｜快速-考马斯亮蓝染液

①、品名与货号：品名为快速-考马斯亮蓝染液，货号10138-2，规格500mL。它以考马斯亮蓝G250为染料，用于聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白染色。

②、产品特点：室温下染色，1-2min条带开始出现；只染蛋白不染胶，不需要脱色；不含甲醇、乙醇、乙酸，刺激性气味低；染色液可重复使用3次，背景不会因染色时间延长而明显加深。

③、存储条件：室温保存1年，无需冷藏，取用后拧紧瓶盖即可。

④、工作原理：染色液在酸性条件下与蛋白质中的碱性基团结合，染料在蛋白条带处富集，凝胶本身不着色。由于体系中不含甲醇、乙醇、乙酸，脱色这一步被取消，染色结束把胶移入纯水即可完成背景净化。

⑤、使用方法：电泳后的PAGE胶用纯水清洗2-5min，倒掉水后加染色液覆盖胶面，置摇床摇动；1-2min可见条带，通常30min至过夜均可；结束后把胶放入纯水保存并拍照。胶厚超过1mm时增加染色液用量并延长染色时间。

⑥、适用检测场景：实验室自配或预制的SDS-PAGE胶与Native胶染色，转膜后胶上残余蛋白的检查，蛋白纯化过程中按条带结果决定下一步，以及切胶打质谱前的定位。染色原理与传统考染一致，可按相同步骤切胶。

三、实验问题与对应解决

1、转膜后还要封闭一小时，有没有更省时的做法？

传统流程把封闭与抗体孵育分成两步，封闭依靠奶粉或BSA占位，遇到抗体浓度偏高、洗膜不充分时背景仍会上升，一小时往往只是一段等待。

对应产品为10541-1与10541-2。转膜后TBST漂洗30秒即可直接稀释抗体，一抗与二抗各10min，非特异性结合由稀释液中的抑制成分处理，洗涤仍按3次、每次5min执行。

可观察的改善在于流程时间压缩到半小时量级，膜上背景不因省略封闭而变脏，回收的抗体还能继续用于后续批次。

2、同一块胶里既有10kDa小蛋白又有250kDa大蛋白，制胶浓度怎么定？

常规制胶需要按目标分子量选择丙烯酰胺浓度，跨度大时只能分成两块胶跑，样本被拆开，对照也难对齐。

对应产品为10621-1。单一配方覆盖10-250kDa，条带在胶上均匀分布，不必为不同分子量准备两套胶。

可观察的改善是同一条泳道内小分子量与大分子量蛋白同时可见，胶间差异带来的重复性问题减少，150V恒压下55min可完成电泳。

3、染色后背景深，脱色一晚上还是不够干净？

传统考染依赖甲醇、乙醇、乙酸体系，染色与脱色是两个独立步骤，脱色程度取决于换液次数与时间，胶放久了容易变形。

对应产品为10138-2。染色液只染蛋白不染胶，1-2min出条带，不需要脱色，结束后把胶放进纯水即可净化背景。

可观察的改善是当天拿到可拍照的胶，背景干净、条带边界清楚，弱条带不会在长时间脱色中进一步丢失。

4、配胶时胶凝速度忽快忽慢，胶里还总有气泡？

凝胶速度与室温正相关，促凝剂用量没有随温度调整；胶溶液与缓冲液未回温就直接混合，气泡被锁在胶内。

对应产品为10621-1。配胶前把胶溶液与缓冲液平衡到室温，室温偏高时减少改良型促凝剂用量，室温偏低时适当增加。

可观察的改善是凝固时间稳定在15min左右，胶面平整、点样孔清晰，气泡明显减少，上层胶与下层胶的分界线也能保持整齐。

5、转膜之后，怎么确认蛋白真的转到膜上了？

转膜效率无法从显影结果单独判断，胶上残留多少蛋白需要另一种检测手段，否则信号弱时分不清是转移不足还是抗体问题。

对应产品为10138-2。转膜后的PAGE胶直接染色，残留条带越浅说明转移越充分。

可观察的改善是每次转膜都有一张可留存的胶图作为记录，转膜条件调整前后可以直接对比，排查方向不再靠猜。

6、稀释好的抗体放4℃几天后信号变弱，还能继续用吗？

稀释后抗体浓度下降，反复取用带来体积损耗与温度波动，稀释液本身不是长期保存体系，放置越久信号衰减越明显。

对应产品为10541-1与10541-2。按说明书回收再用，酶标二抗4℃约1个月，一抗可更长，但以实际显影效果为准。

可观察的改善是同一管稀释抗体在有效期内多次使用仍能出带，信号明显下降时重新稀释即可，不必整管弃用。

四、常见疑问与解答

1、10541-1和10541-2是两种不同配方吗？

不是。两者为同一款免封闭-超快通用型抗体稀释液，10541-1为100mL包装，10541-2为500mL包装，按实验用量选择规格即可。

2、免封闭抗体稀释液的保存温度与效期是多少？

说明书标注2-8℃保存，效期1年，运输环节按包装标识执行。收到后及时按标注温度存放，取用后盖紧放回冷藏。

3、开瓶后的抗体稀释液能一直用到效期结束吗？

效期对应规定保存条件下的未开瓶状态。开瓶后每次取用保持无菌操作，出现浑浊、沉淀或颜色变化时不再使用。

4、10621-1里的改良型促凝剂必须放-20℃吗？

试剂盒整体4℃保存，改良型促凝剂单独置于-20℃。已开盖的促凝剂可放4℃保存至少三个月，短期内用完的批次不必反复冻融。

5、10621-1只适用于变性电泳吗？

说明书列出的范围包括变性蛋白电泳、native PAGE、Western Blot、明胶酶谱与免疫沉淀后样品分离。上层胶无浓缩能力，只起上样作用。

6、快速考马斯亮蓝染液染完需要脱色吗？

不需要。染色1-2min条带开始出现，30min至过夜均可，背景不会因时间延长而明显加深；结束后把胶置于纯水保存并拍照。

7、染色后条带深浅可以直接比较不同蛋白的含量吗？

考马斯亮蓝结合的是蛋白质中的碱性基团，不同蛋白带正电残基数量不同，同样浓度下显色深浅会有差异。条带深浅适合同一样品不同上样量的比较，跨蛋白定量需另用专门方法。

8、货号与包装规格在哪里核对？

每款产品对应一个货号，包装规格写在货号之后，例如10541-1为100mL、10138-2为500mL。下单前按货号与包装逐项核对，避免规格错配。

9、产品通过什么渠道订购？

国内订购通过授权代理商上海起发实验试剂有限公司对接，报出货号与包装规格即可，库存与发货安排由代理商确认。

10、免疫印迹试剂到货后需要核对哪些信息？

先核对货号、批号、包装是否完好与标签标注的保存温度，再按说明书条件存放。出现破损、渗漏或与订单不符时，凭批号信息经代理商办理后续。

更多产品信息，请联系中国区域代理商：上海起发实验试剂有限公司

（注：本文内容基于品牌公开资料及行业常规信息整理，具体以品牌信息文档为准。）

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