haemtech Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注册公司,是一家专业从事体外研究用高质量血浆蛋白分离和表征的主要制造商。HTI的重点是凝血级联中涉及的蛋白质,以及骨代谢的调节。HTI产品系列包括超过150种高度纯化和充分表征的蛋白质,包括酶原,酶,辅因子和抑制剂,以及单克隆和多克隆抗体的互补系列。还可提供因子缺乏的等离子体和定制的血液采集管,用于临床研究。提供的服务包括定制蛋白质纯化,蛋白质修饰,化验开发,合同制造和合同研究。
haemtech HCII-0190说明书
肝素辅因子II抑制凝血酶
凝血酶(IIa),肝素(HEP)和肝素辅因子II(HCII)通过随机顺序双反应机制相互作用形成三元复合物。随着凝血酶与肝素辅助因子II形成共价复合物,肝素随后从复合物解离。
HCII-0190 Human Heparin Cofactor II
Size | 100µg |
Formulation | 50% (vol/vol) Glycerol/H2O |
Molecular Weight |
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Storage | -20°C |
Purity | >95% by SDS-PAGE |
Compound |
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Assay | Thrombin inhibition |
Shelf Life (properly stored) | 12 months |
Chemical Formula |
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肝素辅助因子II(HCII)(肝素辅助因子A,抗凝血酶BM,硫酸皮肤素辅因子,人类leuserpin-2)是丝氨酸蛋白酶抑制剂(丝氨酸蛋白酶抑制剂)家族的单链糖蛋白(Mr = 65,600,10%碳水化合物)成员(1- 3)。肝素辅因子II的氨基酸序列分析显示3个潜在的N-糖基化位点和2个位于NH2-末端附近的7个残基的两个内部重复的硫酸化酪氨酸(4-6)。血浆浓度估计为90μg/ ml(2)。
在凝血级联中,肝素辅助因子II通过在存在(k2 = 4.5×10 8 M -1 min -1)和不存在(k2 = 5.0×10 5 M -1 min -1)的情况下形成双分子复合物来抑制凝血酶。)肝素(2,7-9)。这种复合物对变性剂是稳定的并且基本上是不可逆的。除肝素外,多种多阴离子化合物可加速HCII对凝血酶的抑制作用(3)。在这些化合物中值得注意的是硫酸皮肤素,其加速HCII对凝血酶的抑制,但不加速抗凝血酶III(1,6)。该特征已被用于开发特异于肝素辅助因子II的基于血浆的测定。尽管HCII与其他serpins仅显示约25%的序列同源性,但凝血酶抑制时释放的反应位点肽(COOH-末端36个氨基酸)与凝血酶从抗凝血酶III(AT III)释放的反应位点肽同源性为53%(4,9) )。HCII中的易断裂键是Leu-Ser,这对于精氨酸特异性蛋白酶抑制剂是不常见的(4,9)。与AT III相比,HCII抑制的仅有凝血蛋白酶是凝血酶,HCII抑制的其他蛋白酶包括α-胰凝乳蛋白酶,中性粒细胞组织蛋白酶G和灰色链霉菌蛋白酶B(3)。肝素辅助因子II的主要生理作用可能仍有待发现。
通过修改Griffith等人的方法(9),从新鲜冷冻血浆制备肝素辅助因子II。在SDS PAGE上评估纯度,并且基于在肝素存在下的凝血酶抑制来确定活性。HCII以50%(体积/体积)甘油/ H 2 O供应,在-20℃下储存。
凝胶 | Novex 4-12%Bis-Tris | |||||||
加载 | 人肝素辅助因子II,每泳道1μg | |||||||
缓冲 | MOPS | |||||||
标准 | SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脱氢酶(51 kDa),酒精脱氢酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌红蛋白红(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的) | |||||||
本土化 | 等离子体 | |||||||
血浆浓度 | 90μg/ ml(2) | |||||||
行动方式 | 丝氨酸蛋白酶抑制剂; 抑制凝血酶,α-胰凝乳蛋白酶,中性粒细胞组织蛋白酶G,灰色链霉菌蛋白酶B | |||||||
分子量 | 65,600(2) | |||||||
消光系数 |
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等电点 | 4.95-5.15(2) | |||||||
结构体 | 单链糖蛋白,3个潜在的N-糖基化位点,两个7-氨基酸残基重复序列,反应位点序列:TVTTVGFMPL-STQVRFTVDR(4) | |||||||
碳水化合物百分比 | 9.9%(2) | |||||||
翻译后修改 | 3硫酸化酪氨酸 |
参考
出版物
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