swant 6B3说明书
产品：小鼠抗钙视网膜蛋白抗体（单克隆）
代码：6B3
批号：010399
形式：冻干浓缩上清液（不含防腐剂）。
数量：500µl。
复溶：用500µl双蒸馏水。
用重组人calretinin-22k免疫小鼠产生抗calretinin的抗体6B3[1，2]。钙视网膜蛋白22k是钙视网膜蛋白基因的选择性剪接产物(3)，与钙视网膜蛋白相同，可达Arg178。融合后以人重组钙视网膜蛋白为靶标筛选杂交瘤细胞，筛选克隆6B3。抗体6B3识别钙视网膜蛋白和钙视网膜蛋白-22k共有的前4个EF手结构域内的表位(2)。评价其特异性和效价：a）通过生物素-抗生物素蛋白标记4%多聚甲醛（或10%福尔马林缓冲液）固定的冷冻、振动和石蜡切片，b）通过免疫印迹的免疫酶标记，c）通过组织钙视网膜蛋白基因敲除小鼠的免疫组织化学(6)
该产品是针对钙结合蛋白D-28k和钙调蛋白相关的EF手家族钙结合蛋白calretinin(4)的单克隆抗体。该抗体与不同种属组织中的钙视网膜蛋白发生特异性反应（见免疫印迹）。该抗体不与钙结合蛋白D-28k或其他已知的钙结合蛋白发生交叉反应，通过其在脑中的分布以及免疫印迹测定。Calretinin是一种有吸引力的神经解剖学工具，这种McAB保证了抗Calretinin抗体持续产生具有相同特异性和化学同一性的恒定滴度。该抗体可识别人间皮瘤中的钙视网膜蛋白(4,5)。
复溶后，以小份（例如1µl）冷冻并保持在-80 ℃（或至少-20 ℃）。连续使用时，保持在4 ℃（含0.01%叠氮化纳）。避免反复冻融。
脑提取物的免疫印迹
抗体6B3可特异性染色脑提取物免疫印迹上的钙视网膜蛋白条带（图1）。
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图1单克隆抗体6B3免疫印迹各种属脑匀浆。 1：小鼠；2：大鼠；3：豚鼠；4：兔；5：食蟹猴；6：斑马鱼；7：鸡。在所有种属中，在29 kDa处检测到条带。 |
钙视网膜蛋白基因敲除小鼠的免疫组织化学
抗体6B3免疫标记正常大脑中的神经元亚群，具有高效率（图2a），但不染色钙视网膜蛋白基因敲除小鼠的大脑（图2b）。
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图2a：对照小鼠大脑皮层McAB 6B3的免疫组织化学染色。注意上层散在中间神经元的强染色（箭头）。×100 | 图2b：在calretini基因敲除小鼠的大脑皮层中不存在McAB 6B3的特异性免疫组织化学染色(5)。抗小鼠二抗引起的血管壁非特异性染色（星号）。×100 |
免疫组织化学：当在冷冻切片机或多聚甲醛(4%)或福尔马林固定组织的石蜡切片上进行时，为1:2'000-1:5'000。
免疫印迹：1:1'000-1:2'000。
对于免疫组织化学和免疫印迹，采用抗生物素蛋白-生物素法测定滴度。我们建议通过滴定实验确定宜稀释度
