swant 235说明书
产品：抗小清蛋白单克隆抗体
代码编号：235
批号：10-11(F)
表格：冻干腹水（不含防腐剂）。
数量：200µl
复溶：用200µl重蒸馏水。
单克隆抗小清蛋白是一种小鼠IgG1，由小鼠骨髓瘤细胞与用纯化自 鲤鱼肌肉(1)。评价抗体的特异性和效价：a）通过间接免疫荧光或免疫过氧化物酶标记以及4%多聚甲醛固定组织的冰冻切片机或振动切片机切片的抗生物素蛋白-生物素染色；b）通过免疫印迹的免疫酶标记；c）通过放射免疫测定法(RIA)(1)。
该产品是一种抗小清蛋白的单克隆抗体(McAB)，小清蛋白是一种与钙调蛋白和肌钙蛋白C相关的EF手家族钙结合蛋白。该抗体与人、猴、兔、大鼠组织中的小清蛋白发生特异性反应。 小鼠鸡和鱼。McAB在二维“免疫印迹”中特异性染色小清蛋白的45Ca结合点（MW 12'000和IEF 4.9）。在RIA设置中，McAB测量小清蛋白的灵敏度为10 ng/检测，亲和力为7.9 x 1012 L/M(1)。
钙结合蛋白代表一个小的酸性蛋白家族，配备有特殊的空腔，以高选择性接受Ca2 +。钙结合蛋白有两种类型，“触发”和“缓冲”蛋白。“触发”型（例如钙调蛋白和肌钙蛋白C）通过改变结合Ca2 + 的形状发挥作用。这种失真暴露了蛋白质表面的区域，这些区域与周围的靶分子相互作用，改变了它们的活性。“缓冲液”型的钙结合蛋白被认为是一个负责控制细胞内Ca2 + 浓度的系统。小清蛋白主要存在于神经细胞亚群(2，4)和快肌纤维(3)中。它可能赋予这些细胞处理钙离子的特殊技能。小清蛋白是一种有吸引力的神经解剖学工具，这种McAB保证了
持续产生具有相同特异性和化学特性的恒定滴度的抗小清蛋白抗体。
针对小清蛋白的McAB 235使用自由漂浮或安装的大脑和肌肉部分（可能是所有脊椎动物的部分）特异性定位小清蛋白。固定似乎不妨碍抗原的检测，因为即使是2.5%戊二醛也与半薄（0.5µm薄）冷冻切片上的免疫定位相容。 大鼠皮质(4)。可与大鼠-小清蛋白作为示踪剂定量各种属脑内小清蛋白[1]。
通过脑和肌肉提取物的免疫印迹可以确定抗体235的特异性[1]。然而，该抗体在SDS-凝胶电泳后不能很好地识别小清蛋白分子。
抗体235免疫可高效标记正常大脑中的神经元亚群（图2a），但不会染色小清蛋白基因敲除小鼠的大脑（图2b）。
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图2a：McAB 235免疫组化染色在 对照小鼠的海马。注意II-VI层中间神经元的强染色。×100 | 图2b：小清蛋白基因敲除小鼠大脑皮层中不存在McAB 235的免疫组织化学染色(5)。抗小鼠二抗引起的血管壁非特异性染色。×100 |
免疫组织化学：1:5'000-1:10'000
免疫印迹法：1:1’000。
我们建议通过滴定试验确定宜稀释度。
对于长期储存，将1-2µl的小等份试样保存在-80 ℃（或至少-20 ℃）下。连续使用时，稀释溶液在4 ℃下保存（含0.01%叠氮化纳）。避免反复冻融。
5. Schwaller B.等。(1999)Am.J.生理学。276.C395-403
